微生物实验室分离操作作业规程.doc

微生物实验室样本分离操作规程标本解决、检查与成果报告：1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35温箱培养48 小时观测培养液有无混浊，采样涂于普通血平板、麦康凯平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置35温箱培养。培养第24、48 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至72 小时未见可疑菌落，则报告未培养出普通致病细菌。真菌培养阴性操作程序1、仔细核对标本标签与检查单与否对的，标本质量与否合格，若收检标本与检查单核对对的，标本质量合格则进行接受检查，否则查找因素并在关于记录本上记录。2、标本解决、检查与成果报告：1)拭子、分泌物标本 标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观测平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观测平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观测平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观测平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观测平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35温箱培养48 小时观测培养液有无混浊，采样涂于TTC-沙保罗平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置25温箱培养。培养第24、48、72 小时观测平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第4 天未见可疑菌落，则报告未培养出真菌。苛养菌培养阴性操作程序1、仔细核对标本标签与检查单与否对的，标本质量与否合格，若收检标本与检查单核对对的，标本质量合格则进行接受检查，否则查找因素并在关于记录本上记录。2、标本解决、检查与成果报告：1)拭子、分泌物标本 标本涂于普通血琼脂平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线，再以无菌接种环画线分离后置C02 缸，35温箱培养。培养第24、48、72 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。2)尿液标本 取5ml 尿液,3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线，再画线分离后置C02 缸，35温箱培养。培养第24、48、72 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。3)引流液 标本3000 转/分离心5 分钟，取离心沉淀物，接种环取样画线分离接种普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板，置C02 缸，35温箱培养。培养第24、48、72 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。4)痰液或咽拭子标本 无菌接种环可疑处采样涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板原始线，再画线分离后置C02 缸， 35温箱培养。培养第24、48、72 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，则报告未培养出肺炎球菌、嗜血杆菌等苛养菌。5)粪便或肛拭子等肠道标本 以无菌接种环桃取可疑处标本涂于血平板、布氏血平板成原始线，再分离画线后置于C02 缸，放入35温箱培养。另取约1g 标本接种碱性蛋白胨水中，35温箱培养24-72 小时，再转种高盐平板、中华人民共和国兰平板、山梨醇麦康凯平板。培养第24、48、72 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，则报告未培养出弧菌、螺杆菌等细菌。6)留置针头、小导管等标本 标本置无菌管中，加入增菌液2ml，35温箱培养48 小时观测培养液有无混浊，采样转种血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始线，再画线分离后置于C02缸，35温箱培养。培养第24、48、72 小时观测各平板上有否浮现可疑菌落，若继续培养至第5 天未见可疑菌落，则报告未培养出奈瑟氏菌、嗜血杆菌等苛养菌。抗酸培养阴性操作程序1、仔细核对标本标签与检查单与否对的，标本质量与否合格，若收检标本与检查单核对对的，标本质量合格则进行接受检查，否则查找因素并在关于记录本上记录。2、标本解决、检查与成果报告：液性引流标本(如腹水、尿液、CSF 等)直接离心留沉淀物，杂菌污染标本(如大便、痰等)取样置无菌管，加入1N NaOH1ml 作用30 分钟，再加入1N HCl1ml 中和，3000 转/分钟离心5 分钟，取沉淀物100l 量接种罗氏培养基，置37温箱培养。每星期观测一至两次培养基斜面，成果持续观测七个星期以上未发既有可疑菌落生长，报告未培养出分枝杆菌。支原体培养检查操作程序