谢氏四妙宣痹颗粒质量标准研究.pdf

nng炮制制剂Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2023;14(5)29；中药与临床谢氏四妙宣痹颗粒质量标准研究刘雅琴，李睿”，石倩，赵琪，赖先荣，李姝摘要】目的：建立谢氏四妙颗粒的质量标准研究。方法：通过薄层色谱鉴别方法对颗粒中含有的黄柏、野菊花、紫花地丁、木瓜、川牛膝、牡丹皮六味药材进行定性鉴别。结果：在六味药材的定性鉴别方法中，显色明显，RF值在可行性范围内，阴性无干扰。结论：建立的薄层色谱鉴别方法专属性强，操作简便，重复性好，因此该方法可行。关键词】谢氏四妙颗粒；质量标准；薄层色谱中图分类号 R283.6文献标识码 A文章编号】16 7 4-9 2 6 X(2023)05-006-04Study on quality standard of Xies Simiaoxuanbi Granules/LIU Ya-qin,LI Rut,SHI Qian,ZHAO Qi,LAI Xian-r,LI Shu(1.School of Pharmacy,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,Sichuan;2.MeishanHospital of Traditional Chinese Medicine,Meishan 620000,Sichuan)Abstract Objective:To study the quality standard of Xies Simiao Granules.Method:The six medicinal materialsincluding Huangbo,Yejuhua,Zihuandiding,Mugua,Chuan niuxi,Mudanpi in Xies Simiao Granules were qualitatively identifiedby TLC.Result:In the qualitative identification method of six medicinal materials,the color was obvious.RF value was withinthe feasibility range,without negative interference.Conclusion:The established TLC identification method has strong properties,simple operation and good repeatability,so the method is feasible.Key words Xies simiaoxuanbi Granules;quality standard;TLC谢氏四妙宣痹颗粒是由黄柏、野菊花、紫花地丁、木瓜、川牛膝、牡丹皮等十三味药材制备成的复方颗粒，是眉山市中医医院治疗风湿痹症的经验方。黄柏作为君药，具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮的功效。野菊花作为臣药，具有清热解毒，泻火平肝的功效。十三味药材通过君臣作使，相煎制成的颗粒具有祛风清热，利水消肿，通络止痛的功效，临床用于治疗湿热、关节红肿的痹症，效果显著，既有传统中药易于吸收、作用快的特点，又方便携带，不易变质 2。为保证制剂质量及临床应用安全有效、我们对颗粒剂中的药材进行定性鉴定，为颗粒的质量标准提供科学依据。作者单位 1.成都中医药大学药学院药学院，四川省成都市611137；2.眉山市中医医院，四川眉山6 2 0 0 0 0作者简介 刘雅琴，女，在读硕士，从事新制剂、新剂型、新工艺的研究Tel:17773852376Email:通讯作者 赖先荣，男，博士，教授，硕士生导师，从事新制剂、新剂型、新工艺的研究Tel:13880078303Email:；李姝，女，本科，从事药物制剂的研究Tel:18990333568Email:收稿日期 2 0 2 3-0 2-0 31仪器与材料1.1仪器DZKW-S-4暗箱式紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂），WK-60摇摆式制粒机(山东省青州市精诚医药制备有限公司），FA1004分析电子天平（上海良平仪器仪表有限公司），DHG-9624A电热恒温鼓风干燥箱（上海将任实验设备有限公司），BSA124S万分之一电子天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司），UPH-I-10T型优普纯水制造系统（成都优普超纯科技有限公司），DZKW-S-4型电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂)，SHZ-DW予华牌循环水真空泵、RE-2000A旋转蒸发器均购自巩义市英峪高科仪器有限责任公司等。1.2试药黄柏（批号2 10 9 0 1)、野菊花艺（批号2 10 8 0 1）、紫花地丁（批号2 10 7 0 1）、木瓜（批号2 10 8 0 1)、川牛膝（批号2 10 50 1）、牡丹皮（批号2 112 0 1）均购于洪雅县瓦屋山药业有限公司；川牛膝对照药材（批号12 10 6 5-2 0 17 0 7）、野菊花对照药材（批号12 0 9 9 5-2 0 17 0 7）黄柏对照药材（批号121510-201807）紫花地丁对照药材（批号12 142 9-202106）木瓜对照药材（批号12 10 0 3-2 0 12 0 6）30Pharmacyand ClChinese MateriaMedica2023;14(5)中药与临床均购于中国食品药品检定研究院；小檗碱对照品（批号DSTDY002801）、蒙花苷对照品（批号DSTDM004301）均购自成都德思特生物技术有限公司，各对照品质量分数均9 8%，符合要求；秦皮乙素对照品（批号PS000763）、丹皮酚对照品（批号PS00281）、杯苋笛酮照品（批号PS010993）、熊果酸对照品（批号PS012671）均购自成都普思生物科技股份有限公司，各对照品质量分数均9 8%，符合要求；甲醇、醋酸、乙酸乙酯、丁酮、甲酸、三氯甲烷、氨水、甲苯、环已烷、硫酸、丙酮均为分析纯，购于成都市科隆化学品有限公司。2方法和结果2.1黄柏的薄层鉴别2.1.1专属性考察（1）供试品溶液的制备称取颗粒剂粉末1g，加1%醋酸甲醇溶液40 mL，于6 0 超声处理2 0min，滤过，滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。（2）对照品溶液的制备米精密称取盐酸小柏碱对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。（3）对照药材溶液的制备称取黄柏对照药材0.1g，加1%醋酸甲醇2 0 mL，按照“2.1.1”项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。（4）阴性对照品溶液的制备称取除黄柏外的处方量药材按照颗粒剂制备方法制成阴性颗粒，粉碎过筛，按照“2.1.1”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。(5）鉴别方法照薄层色谱法（通则0 50 2）试验，吸取上述三种溶液各3-5L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:6:1:1）的下层溶液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（36 5nm）下检视 。（6）结果供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果如图1-A所示。2.1.2耐用性考察考察了三青岛海浪硅胶干燥剂有限公司、南京全隆生物技术有限公司和青岛海湾精细化工有限公司个不同厂家的薄层G板，0、15和35三个不同的温度，以及2 0%和7 5%两个不同的湿度，样品与对照品和对照药材在相应的位置出现颜色相同的斑点，阴性无干扰。2.2野菊花薄层鉴别2.2.1专属性考察（1）供试品溶液的制备称取颗粒剂粉末1g，加甲醇15mL，超声处理30 min，放冷，滤过，取滤液作为供试品溶液。（2）对照品溶液的制备精密称取蒙花苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液。（3）对照药材溶液的制备称取野菊花对照药材0.3g，按照“2.2.1”项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。（4）阴性对照品溶液的制备称取除野菊花外的处方量药材按照颗粒剂制备方法制成阴性颗粒，粉碎过筛，按照“2.2.1”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。（5）鉴别方法照薄层色谱法（通则0 50 2）试验，吸取上述三种溶液各3L，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开剂用乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水（15:15:6:4:1），展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，置紫外光灯（36 5nm)下检视 。（6）结果供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，结果如图1-B所示。2.2.2耐用性考察考察了三青岛海浪硅胶干燥剂有限公司、南京全隆生物技术有限公司和青岛海湾精细化工有限公司个不同厂家的薄层G板，0、15和35三个不同的温度，以及2 0%和7 5%两个不同的湿度，样品与对照品和对照药材在相应的位置出现颜色相同的斑点，阴性无干扰。2.3紫花地丁薄层鉴别2.3.1专属性考察（1）供试品溶液的制备称取颗粒剂粉末2 g，加甲醇2 0 mL，超声处理2 0 min，滤过，滤液蒸干，残渣加热水10 ml，搅拌使溶解，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。（2）对照品溶液的制备米精密称取秦皮乙素对照品，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液作为对照品溶液。（3）对照药材溶液的制备称取紫花地丁对照药材2 g，按照“2.3.1”项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。（4）阴性对照品溶液的制备称取除紫花地丁外的处方量药材按照颗粒剂制备方法制成阴性颗粒，粉碎过筛，按照“2.3.1”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。31Pharmacyand ClinicsfChineseMateriaMedica2023;14(5)中药与临床（5）鉴别方法照薄层色谱法（通则0 50 2）试验，吸取供试品溶液5-10 L、对照药材溶液5L、对照品溶液5L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5:3:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（36 5nm）下检视。（6）结果供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，结果如图1-C所示。2.3.2耐用性考察冬考察了三青岛海浪硅胶干燥剂有限公司、南京全隆生物技术有限公司和青岛海湾精细化工有限公司个不同厂家的薄层G板，0、15和35三个不同的温度，以及2 0%和7 5%两个不同的湿度，样品与对照品和对照药材在相应的位置出现颜色相同的斑点，阴性无干扰。12356123456123456ABCA.黄柏薄层色谱图（TLCofphellodendron），1.盐酸小檗碱（Berber-inehydrochloride），2.黄柏对照药材（ReferenceherbalsolutionofPhel-lodendron），3-5.黄柏供试品（testsolutionofPhellodendron），6.黄柏阴性对照（NegativecontrolsolutionofPhellodendron）；B.野菊花薄层色谱图（TLCofwildchrysanthemum），1.蒙花苷（monosine），2.野菊花对照药材（Referenceherbalsolutionofwildchrysanthemum），3-5.野菊花供试品（testsolutionofwildchrysanthemum），6.野菊花阴性对照（Negativecontrolsolutionofwildchrysanthemum）；C.紫花地丁薄层色谱图（TLCofpurpleflowerdiploid），1.秦皮乙素（Ce p h a l o e t h i n h y d r o c h l o r i d e），2.紫花地丁对照药材（Reference-herbalsolutionofpurpleflowerdiploid），3-5.紫花地丁供试品（testsolu-tionofpurpleflowerdiploid），6.紫花地丁阴性对照（Negativecontrolso-lutionofpurpleflowerdiploid);图1薄层色谱图Fig1 Chromatogram of TLC2.4木瓜薄层鉴别2.4.1专属性考察（1）供试品溶液的制备取颗粒剂3g，加三氯甲烷2 0 ml，超声处理1h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇-三氯甲烷（1:3）混合溶液2 ml使溶解，作为供试品溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光斑点；（2）对照品溶液的制备精密称取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。（3）对照药材溶液的制备称取木瓜对照药材1g，按照“2.4.1”项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。（4）阴性对照品溶液的制备称取除木瓜外的处方量药材按照颗粒剂制备方法制成阴性颗粒，粉碎过筛，按照“2.4.1”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。（5）鉴别方法照薄层色谱法（通则0 50 2）试验，吸取上述三种溶液各1-2 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（6:0.5:1:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在10 5加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（36 5nm）下检视。（6）结果在与对照品色谱相应的位置上，显相同橙黄色荧光斑点，结果如图2-D所示。2.4.2耐用性考察考察了三青岛海浪硅胶干燥剂有限公司、南京全隆生物技术有限公司和青岛海湾精细化工有限公司个不同厂家的薄层G板，0、15和35C三个不同的温度，以及2 0%和7 5%两个不同的湿度，样品与对照品和对照药材在相应的位置出现颜色相同的斑点，阴性无干扰。2.5川牛膝薄层鉴别2.5.1专属性考察（1）供试品溶液的制备称取本品粉末2 g，加甲醇50 ml，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，然后加30mL热水制成供试品溶液。（2）对照品溶液的制备称取杯苋留酮对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。（3）对照药材溶液的制备称取川牛膝对照药材2 g，按照“2.5.1”项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。（4）阴性对照品溶液的制备称取除川牛膝皮外的处方量药材按照颗粒剂制备方法制成阴性颗粒，粉碎过筛，按照照“2.5.1”J项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。(5）鉴别方法照薄层色谱法（通则0 50 2）试验，吸取供试品溶液5-10 L、对照药材溶液和对照品溶液各5L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸-水（7:5:0.5:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在10 5加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（36 5nm）下检视 5。(6)结果供试品色谱中，在与对照品色谱相32中药与临床PharmacyChineseMateriaMedica2023;14(5)ana应的位置上，显相同颜色的斑点，结果如图2-E所示。2.5.2 耐用性考察考察了三青岛海浪硅胶干燥剂有限公司、南京全隆生物技术有限公司和青岛海湾精细化工有限公司个不同厂家的薄层G板，0、15和35C三个不同的温度，以及2 0%和7 5%两个不同的湿度，样品与对照品和对照药材在相应的位置出现颜色相同的斑点，阴性无干扰。2.6牡丹皮薄层鉴别2.6.1专属性考察（1）供试品溶液的制备称取颗粒剂粉末3g，加乙醚10 mL，密塞，振摇2 0 min，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮2 ml使溶解，作为供试品溶液。（2）对照品溶液的制备精密称取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1mL含2 mg的溶液，作为对照品溶液。（3）阴性对照品溶液的制备称取除牡丹皮外的处方量药材按照颗粒剂制备方法制成阴性颗粒，粉碎过筛，按照“2.6.1”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。（4）鉴别方法照薄层色谱法（通则0 50 2）试验，吸取上述两种溶液各10 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-乙酸乙酯-冰醋酸（4:1:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸乙醇溶液（110），在10 5加热至斑点显色清晰。(5)结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果如图2-F所示。2.6.2耐用性考察冬考察了三青岛海浪硅胶干燥剂有限公司、南京全隆生物技术有限公司和青岛海湾精细化工有限公司个不同厂家的薄层G板，0、15和35C三个不同的温度，以及2 0%和7 5%两个不同的湿度，样品与对照品在相应的位置出现颜色相同的斑点，阴性无干扰。12345612345 612345DEFD.木瓜薄层色谱图（TLCofpapaya），1.熊果酸（Ursolicacid），2.木瓜对照药材（Referenceherbalsolutionofpapaya），3-5.木瓜供试品(testsolutionofpapaya），6.木瓜阴性对照（Negativecontrolsolutionof-papaya）；E.川牛膝薄层色谱图（TLCofachyranthessinensis），1.杯苋留酮（Cupamarando），2.川牛膝对照药材（Referenceherbalsolu-tionofachyranthessinensis），3-5.川牛膝供试品（testsolutionofachyran-thessinensis），6.川牛膝阴性对照（Negativecontrolsolutionofachyran-thessinensis）；F.牡丹皮薄层色谱图（TLCofmoutanbark），1.丹皮酚(paeonol），2.牡丹皮对照药材（Referenceherbalsolutionofmoutan-bark），3-5.牡丹皮供试品（testsolutionofmoutanbark），6.牡丹皮阴性对照（Negativecontrolsolutionofimoutanbark）；图2 薄层色谱图Fig2 Chromatogram of HPLC3讨论由于颗粒剂制备相对繁琐，煎煮后复方成分复杂，对其质量影响难以预测，为了有效控制和保证其质量，因此需要选择合理的简便的质量评价方法6，结合药典及相关文献，通过实验一系列考察，最终确定了颗粒中黄柏、野菊花、紫花地丁、木瓜、川牛膝和牡丹皮七味药材的定性鉴定方法，考察了不同厂家及温湿度，其形成的斑点清晰，重现性好，特征性强，结果准确可靠，操作方法简单易行，为本颗粒剂的定性鉴别提供科学依据 7 。参考文献1国家药典委员会.中华人民共和国药典 S.一部.北京：中国医药科技出版社,2 0 2 0:6.2夏小健,刘雨珍.气血舒颗粒质量控制研究 J.广州化工,2 0 2 2,50(14):8 9-9 5.3吴安.经典名方枇杷清肺饮物质基准研究 D.广东药科大学,2 0 2 1.D0I:10.27690/ki.ggdyk.2021.000013.4】李浩文.不同产地野菊花品质评价 D.南京农业大学,2 0 2 0.DOI:10.27244/ki.gnjnu.2020.001695.5施崇精.川牛膝炮制工艺与质量标准研究 D.成都中医药大学,2 0 19.DO1:10.26988/ki.gcdzu.2019.000104.6李学涛,王为,符敏,等.扶正固本颗粒质量标准研究 J.辽宁中医药大学学报,2 0 19,2 1(12)：17-2 0.D0I:10.13194/j.issn.1673-842x.2019.12.004.7袁清照,胥骞，杨莹，等.名老中医仇湘中验方补肝健腰方的制剂研究 J.湖南中医杂志,2 0 2 2,38(0 3)：17 5-17 9.DOI:10.16808/ki.issn1003-7705.2022.03.042.（责任编辑：傅舒）