聚维酮碘口服液万金水对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌作用研究应用.doc

聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌体外抑菌作用研究

实验单位（盖章）：南京农业大学
地 址：江苏省南京市卫岗1号
委托单位及地址：深圳市安多福动物药业有限公司；
深圳市盐田区盐田北山工业区
首席专家（签名）：江善祥
实验负责人（签名）：季辉
实验参加人（签名）：张冠军
实验日期：3月
联系人：季辉
联系电话：
原始资料保存地点：南京农业大学动物医学院药理组

聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌
体外抑菌作用研究

一、目意义
本实验目是研究聚维酮碘口服液（万金水）在体外条件下，对大肠杆菌和沙门氏菌抑菌作用，为其在兽医生产中合理使用提供理论根据。
二、实验时间与地点
3月，南京农业大学动物医学院药理实验室。
三、实验人员
实验负责人：季辉，南京农业大学动物医学院基本兽医系，邮箱。
实验设计人：季辉。
参加者：张冠军，南京农业大学动物医学院基本兽医系。
四、实验菌株
猪大肠杆菌2株： ED115、ED117，南京农业大学动物医学院药理组保存；
禽沙门氏菌2株： F3、F5，安徽农业大学动物科技学院馈赠。
五、实验药物：
兽药名称：聚维酮碘口服液（万金水）
生产厂家：深圳市安多福动物药业有限公司提供
规格：0.5%，500 mL/瓶
生产日期：-01-10
生产批号：13011004
六、实验试剂
MH培养基：上海盛思生化科技有限公司，130101；
LB肉汤培养基：上海盛思生化科技有限公司，130801；
LB琼脂培养基：上海盛思生化科技有限公司，130901。
七、实验方案
本实验应用试管稀释法进行聚维酮合碘口服液（万金水）实验室微生物杀灭实验，测定聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌杀灭作用。
7.1细菌繁殖体悬液制备：
以无菌操作方式启动菌种管，用毛细吸管加入适量营养肉汤培养基，轻柔吹吸多次，使菌种融化分散。取含 5.0mL～10.0mL 营养肉汤培养基试管，滴入少量菌种悬液，置 37℃ 培养18h～24h。用接种环取第1代培养菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，置 37℃ 培养 18h～24h。挑取上述第 2 代培养物中典型菌落，接种于营养营养肉汤，置 37℃ 培养 18h～24h，即为第 3 代培养物。
7.2 聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌杀灭作用测定
实验采用试管稀释法测定( 3 重复)。实验时，取对数生长期细菌（109cfu/mL）用生理盐水稀释到106cfu/mL供实验用，取10支灭菌试管编号，每管加入1mL稀释后菌液，然后取浓度为80、40、20mg/L聚维酮碘溶液1mL各加入三支试管中混匀，则实验浓度分别为40、20、10mg/L，另一只试管中加入1mL生理盐水作为阳性对照。作用10min后，每管分别取0.1mL用生理盐水按10倍比稀释，再取稀释后样品0.1mL进行平板计数，计算聚维酮碘口服液（万金水）杀菌率。
八 成果
体外抗菌活性
通过实验分别测定了聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌、沙门氏菌杀菌作用，详细成果见表1、2。由表可见，聚维酮碘口服液（万金水）三个浓度（40、20、10mg/L）分别与大肠杆菌、沙门氏菌作用10min后即可将细菌所有杀灭，细菌计数成果为0。
表1 聚维酮碘口服液（万金水）与大肠杆菌作用10min后细菌数（cfu/mL）
浓度（mg/L）
菌株号
ED115
ED117
40
0
0
20
0
0
10
0
0
阳性对照
2.64×106
7.7×105

表2聚维酮碘口服液（万金水）与沙门氏菌作用10min后细菌数（cfu/mL）
浓度（mg/L）
菌株号
F3
F5
40
0
0
20
0
0
10
0
0
阳性对照
2.4×106
1.2×106
九 讨论
聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌抗菌活性
本实验采用试管稀释法，每管加入1mL稀释后菌液，然后分别加入不同浓度聚维酮碘溶液1mL，混匀后作用10min进行细菌计数，测定聚维酮碘口服液（万金水）杀菌性能。成果显示分别在40、20、10mg/L浓度下聚维酮碘与大肠杆菌和沙门氏菌作用10min，可将其所有杀灭。
文献报道各种碘制剂（碘伏、聚维酮碘等）杀菌效果差别较大，分析因素重要为实验办法上差别。不同实验办法得到聚维酮碘MIC或MBC为4.69mg/L~625mg/L。可见本实验成果与文献基本一致。
十 实验综合评估
综合上述实验成果与文献，实验办法对该药体外抗菌活性影响较大。在本实验办法条件下，聚维酮碘口服液（万金水）在40、20、10mg/L时对临床常用细菌（大肠杆菌、沙门氏菌、）可以迅速杀灭。
重要参照文献
[1] 李继昌，鲁成武，符春燕，等.聚维酮碘消毒剂抑菌作用研究[J].黑龙江畜牧兽医，1998，（4）：27
[2] 刘全离.聚维酮碘体外抑菌效果实验观测[J].中华人民共和国消毒学杂志，，25（1）：28-29
[3] 王玲，徐燕，陈越英，等.一种聚维酮碘消毒液对微生物杀灭效果实验研究[J].中华人民共和国消毒学杂志，，24（2）：135-137
[4] 陈祖毅，林立旺，环游，等.聚维酮碘杀菌性能及影响因素实验研究[J].中华人民共和国卫生检查杂志，，20（2）：309-311

附：某些实验照片

图1 样品配制

图2 万金水与细菌作用10min后倒平板

图3 万金水与大肠杆菌作用10min后细菌计数平板（0为阳性对照、1为10mg/L、2为20mg/L、4为40mg/L）

图4 万金水与大肠杆菌作用10min后细菌计数平板（阳性对照与10mg/L实验组）

图5 万金水与沙门氏菌作用10min后细菌计数平板（0为阳性对照、1为10mg/L、2为20mg/L、4为40mg/L）

图6 万金水与沙门氏菌作用10min后细菌计数平板（阳性对照与10mg/L实验组）