食品酶制剂.ppt

第第 10 章章 食品食品酶酶制制剂剂食品添加食品添加剂剂1.本章主要内容l酶酶制制剂剂在食品工在食品工业业中的巨大作用中的巨大作用l工工业业酶酶的来源的来源l酶酶的安全性的安全性问题问题与管理与管理l食品工食品工业业常用常用酶酶制制剂剂22.什么是什么是酶酶制制剂剂？GB2760-2007食品添加食品添加剂剂使用使用卫卫生生标标准准l术语与定义 酶制剂是指动物或植物的可食或非可食部分直接提取，或由传统或通过基因修饰的微生物（包括但不限于细菌、放线菌，真菌菌种）发酵、提取制得，用于食品加工，具有特殊催化功能的生物制品。l食品添加剂功能类别 从生物中提取的具有生物催化能力的物质，辅以其他成分，用于加速食品加工过程和提高食品质量的物质。3.8.1食品食品酶酶制制剂剂 8.1.1食品食品酶酶制制剂剂与食品加工制造与食品加工制造 44.55.66.77.8.1.2酶酶制制剂剂的特点的特点 来源：来源：食品酶制剂多数源于动物的脏脏器和腺体器和腺体以及高等植物的种子、果种子、果实实等。微生物微生物 环境微生物和工程微生物。88.l制造干酪的凝乳酶是从小牛第四胃中提取的皱胃酶。这些来源于动植物的酶制剂，多受季节、地区、数量及经济成本的严格制约，与酶制剂的广泛应用不相适应。9.(1)微生物的种类繁多，酶种丰富，存在于动植物体的一切酶类，几乎都存在于微生物体内。(2)微生物繁殖迅速，几天内即可收获，产量丰富。(3)可以进行大规模生产，在生产中可以精确控制各种条件，如pH、营养、维生素、通气量、培养时间等。使酶制剂的产量质量稳定。(4)微生物的培养基简单、价格便宜，酶的生产成本较低。(5)可以方便、迅速地应用各种现代科学成就如现代生物技术来选育优良性质的品种和提高酶的产量。10.8.1.3 食品食品酶酶制制剂剂安全性安全性联合国食品添加剂专家联合委员会(1)凡是在动植物可食部分可食部分的组织，或用食品加工传传统统使用使用菌种生产的酶制剂，可作为食品对待不需要进行毒理试验，只需建立有关酶化学和微生物学的规格即可。(2)凡是非致病微生物非致病微生物生产的酶，除制定化学规格以外，需要做短期毒理试验，以确保无害，并分别评价，制定ADI。(3)对于非常非常见见微生物微生物制取的酶，不仅要有规格，还要做广泛的 毒理试验。1111.8.1.4 食品食品酶酶制制剂剂管理管理 在食品添加剂使用卫生标准中：96版酶制剂设为11.000类。07版取消取消编编号号，采用列表制。共有44支酶制剂，来源：来源：104种动物、植物或微生物；或利用19个供体（提供基因片段的动物、植物或微生物），经过生物技术获得。即基因修饰微生物的比例为18%。1212.8.2 食品工食品工业应业应用用酶酶制制剂剂 8.2.1 淀粉淀粉酶酶 淀粉酶(amylase)是水解淀粉、糖元和它们的降解中间产物的酶类。作用特点：作用特点：按酶的水解方式分为-淀粉酶、-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、环糊精葡萄糖基转移酶、切枝酶以及 其他淀粉酶等。1313.（1）-淀粉淀粉酶酶(-amylase)l液化型淀粉酶，亦称细菌-淀粉酶、退浆淀粉酶、糊精化淀粉酶和高温淀粉酶等。l作用特点：A.可越过-1,6键 水解-1,4-糖苷键1414.B.作用开始阶段，迅速地将淀粉分子切断成短链的寡糖，使淀粉液的黏度迅速下降，碘反应由蓝变紫，再转变成红色、棕色以至无色，这种作用称为液化作用，故又称之为液化型淀粉酶。l水解产物：麦芽糖、葡萄糖和糊精麦芽糖、葡萄糖和糊精l热稳定性(因为有一个Ca2+)-淀粉酶 细菌谷物酶曲霉酶 1515.表 不同来源不同来源-淀粉淀粉酶酶的最适的最适pH值值 来源 最适pH 来源 最适pH人类唾液 6.07.0 嗜热脂肪芽孢杆菌 3.0左右 小麦 4.5左右（超过5活性缓慢下降）高粱芽 4.8（5.0以上时失活速度较低）枯草杆菌 5.07.0 大麦芽 4.85.4 猪胰 6.07.0 16高高浓浓度淀粉度淀粉提高耐热性，在适量的钙盐钙盐和食和食盐盐，pH值为5.37.0时，9395仍保持足够高的活性。为便于保藏，常加入适量的碳酸钙等作为抗结剂防止结块 16.（2）糖化糖化酶酶(amyloglucosidase)l亦称糖化淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖淀粉酶(glucoamylase)和糖化型淀粉酶。（TAKA淀粉酶）l水解特点：水解特点：A.非还原性末端-1,4-糖苷键（速度快）B.分支点-1,6-糖苷键（速度慢）l水解水解产产物：物：葡萄糖17食品添加食品添加食品添加食品添加剂剂剂剂使用使用使用使用卫卫卫卫生生生生标标标标准中无糖化准中无糖化准中无糖化准中无糖化酶酶酶酶，为为为为淀粉葡萄糖苷淀粉葡萄糖苷淀粉葡萄糖苷淀粉葡萄糖苷酶酶酶酶、葡萄糖淀粉、葡萄糖淀粉、葡萄糖淀粉、葡萄糖淀粉酶酶酶酶17.l转糖基（缩合）特点：葡萄糖基的可逆转移反应，将一个葡葡糖分子转移到另一葡萄糖分子的-1,4-糖苷键或-1,6-糖苷键上，l缩合产物：麦芽糖、异麦芽糖、低聚糖等多种寡糖l最适条件：最适条件：黑曲霉 pH4.04.5，60 根霉 pH4.05，551818.(3)-淀粉淀粉酶酶(-amylase)l又称淀粉-1,4麦芽糖苷酶 l作用特点：作用特点：从非还原性末端水解相隔的-1,4糖苷键，但不能越过分支点的-1,6-糖苷键，在达到分支点前23个葡萄糖残基时就停止。l水解水解产产物：物：麦芽糖，大分子糊精l最适条件：最适条件：pH57，50 60 1919.-淀粉淀粉酶酶(-amylase)水解特点水解特点2020.表 不同来源-淀粉酶的最适条件 l-淀粉酶的活性中心都含有巯巯基基(-SH)，重金属、巯基试剂能使之失活，半胱氨酸可使之复活。最适pH值 最适温度 植物-淀粉酶 5.06.0 5060 细菌-淀粉酶 67 50 2121.（4）切枝）切枝酶酶(debranching enzyme)l又称普鲁兰酶、支链淀粉酶、异淀粉异淀粉酶酶l作用特点：作用特点：专一性地水解支链淀粉分枝点-1,6-糖苷糖苷键键，将整个侧链切下。l产产物特点：物特点：大小不同的直链淀粉 l最适条件：最适条件：pH4.55.5，60 2222.（5）环环麦芽糊精葡萄糖基麦芽糊精葡萄糖基转转移移酶酶 环糊精结构2323.作用机理：作用机理：l分子内转葡萄糖基反应可转化淀粉成为环糊精(CD)l在淀粉与蔗糖共存时，通过葡萄糖基转移反应将分子内葡萄糖基从-1,4-葡聚糖或CD转移到受体分子上(偶联反应或歧化反应)l水解-1,4-葡聚糖成CD l产产物物：环糊精与偶联糖 2424.8.2.2 果胶果胶酶酶(pectinase)25-(14)-D-吡喃半乳糖吡喃半乳糖醛醛酸酸单单位位组组成的聚合物成的聚合物OCH325.果胶果胶酶酶种种类类与作用特点与作用特点l果胶裂解酶、果胶酯酶和聚半乳糖醛酸酶、原果胶酶2626.（1）果胶）果胶酯酯酶酶l也称为果胶甲酯酶（pectin esterase）,果胶酶(pectase),脱甲氧基果胶酶(pectin demethoxylase)2727.（2）聚半乳糖）聚半乳糖醛醛酸酸酶酶l水解果胶物质分子中脱水半乳糖醛酸单位的-1,4-糖苷键。l外切型是从聚合物的末端糖苷键开始水解，而内切型是作用于分子内部 2828.（3）果胶酸裂解）果胶酸裂解酶酶 l在无水条件下能裂解果胶和果胶酸之间的糖苷键 l存在于微生物中，而在高等植物中没有发现l有内切酶和外切酶。及作用于果胶或果胶酸的果胶裂解酶。2929.（4）原果胶酶（Protopectinase）l第4种类型的果胶降解酶，仅存在于少数几种微生物中。l原果胶酶水解原果胶生成果胶。l植物中原果胶酶的活力是来源于果胶甲酯酶和聚半乳糖醛酸酶二者共同作用的结果，是否是真实的原果胶酶作用，尚不清楚。l我国果胶酶中无此酶。3030.8.2.3葡萄糖异构葡萄糖异构酶酶(glucose isomerase)l亦称木糖异构酶 l使D-葡萄糖转化为D-果糖，使木糖转化为木酮糖 l放线菌葡萄糖异构酶，Mg2+和Co2+激活和稳定，最适pH7.58.5。最适温度4065。l乳酸短杆菌葡萄糖异构酶，Mn2+、K+保护热活性，最适pH67。有Mn2+时最适温度为60，无Mn2+时为45。3131.8.2.4 乳糖乳糖酶酶(lactase)-半乳糖苷半乳糖苷酶酶(-plactosidase)l乳糖分子中-1,4-半乳糖苷半乳糖苷键键而水解成为半乳糖和葡萄糖的可逆反应 l在高浓度乳糖存在下，可催化半乳糖分子的转移反应，生成杂低聚乳糖l大肠杆菌酶最适pH7.07.5，酵母菌酶6.07.0，霉菌酶5.0左右。l最适温度为3750 3232.8.2.5葡萄糖氧化葡萄糖氧化酶酶(glucose oxidase，COD)l主要作用：将-D-葡萄糖氧化为葡萄糖内酯 l最适条件：pH4.57.5。温度3060 l应用：用于食品中控制葡萄糖参与美拉德反应引起的风味恶化、除氧、解决半纤维素酶导致的面团变软 3333.8.2.6 纤维纤维素素酶酶(cellulase)l将纤维素多糖中的-1,4-葡聚糖水解为-糊精。l最适条件：pH 4.55.5，温度5060。3434.主要主要应应用：用：l果蔬汁加工中却常利用纤维素酶改善其品质（将纤维素转化为可溶性葡萄糖）l提高果酒的出酒率（能破坏果肉细胞壁和分离果胶质，还能增加原酒的溶解物）l提高植物成分提取率 注意：注意：l植物在成熟和后熟时质地的变化则是由果胶物质发生变化引起的。l蔬菜、水果和谷物中的不可消化的碳水化合物是重要的营养成分（膳食膳食纤维纤维）3535.8.2.7 蛋白蛋白酶酶(protease)l水解肽键的一类酶。l将蛋白质依次被水解成胨、多肽、肽，最后成为蛋白质的组成单位氨基酸。l有些蛋白酶还可水解多肽及氨基酸的酯键或酰胺键。l在有机溶剂中有些蛋白酶具有合成肽类和转移肽类的作用。l用于肉类嫩化、植物蛋白质改性、蛋白质水解、烘焙食品生产等。3636.蛋白蛋白酶酶分分类类 按其作用方式分为：l内肽酶（氨肽酶）从蛋白质或多肽的内部切开肽键生成分子质量较小的胨和多肽，是真正的蛋白酶。l外肽酶（羧肽酶）只能从蛋白质或多肽分子的氨基或羧基末端水解肽键而游离出氨基酸。3737.蛋白蛋白酶酶分分类类按酶的来源分类：l动物脏器 胃蛋白酶、胰蛋白酶l植物果实 木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶l微生物 细菌或霉菌蛋白酶等。3838.39.(1)凝乳凝乳酶酶(rennin)l亦称皱胃酶，哺乳期小牛第四胃中分泌l凝乳酶使牛乳形成凝块或凝胶结构的过程：第一阶段是酶作用增加含氮组分 第二阶段包括经酶作用而改变的酪蛋白胶粒聚集成凝胶结构lpH 5.36.3间最稳定 l提高温度和增加钙离子浓度可加快凝胶形成的速度 4040.(2)木瓜蛋白木瓜蛋白酶酶(papain)活性特点活性特点l最适条件：pH57，65l酶的活力被抑制氧化剂或重金属离子影响作用特点作用特点l水解蛋白质l对酯和酰胺类底物也表现 出很高的活力l具有从蛋白质水解物再 合成蛋白质类物质的能力 4141.8.2.8 脂脂酶酶(lipase)和脂肪氧合和脂肪氧合酶酶 l脂酶也称甘油酯水解酶，脂肪酶l作用特点：作用特点：水解位：-位（1位）、-位（3位）的速度快，-位（2位）的速度较慢l胰脂酶水解特点：仅水解1,3位的酯键4242.l最适条件：最适条件：pH 79，一般脂肪酸的链越长则pH值越高。增香作用最适温度为20。l工业产酶菌有酵母、曲霉等l应应用：用：脂肪改性，奶酪、焙烤食品生产，l 奶油香精的生产l脂肪氧合脂肪氧合酶酶4343.应用举例l在面包生在面包生产产中使用，增中使用，增加体加体积积，提，提高白度，改高白度，改善香气。善香气。44脂肪酶和脂肪氧合酶的混合物44.8.2.9 谷氨谷氨酰酰胺胺转转胺胺酶酶TG l作用机理：利用肽链上的谷氨酰胺残基的-甲酰胺基为乙酰基供体，受体可以是蛋白质上的或游离氨基酸上的胺基、伯胺基、水，形成的共价健在一般的非酶催化条件下很难断裂。l最适条件：pH 6.0（5.08.0）52（4257）45Gln-CO-NH2 +RNH2Gln-CO-NHR +NH3Gln-CO-NH2 +NH2-LysGln-CO-NH-Lys +NH3Gln-CO-NH2 +H2OGln-CO-OH +NH3-(-glutanyl)lys共价共价键键45.安全性l因为广泛存在于动物组织中，人们一直都在食用含有TG催化形成的-谷氨酰赖氨酸异肽键的食物，所以对人体是安全的。46.表表 TG在食品中的在食品中的应应用用 4747.l(1)调节食品质构、提高品质、改善口感l(2)保持蛋白质的营养价值 l(3)形成耐热、耐水性的膜 l(4)用于包埋脂类或脂溶性物质，l(5)催化蛋白质分子去酰胺，从而改变蛋白质功能性质。4848.本章学本章学习习要求要求l掌握常用食品酶制剂的特性、使用和注意事项。l熟悉食品酶制剂管理。49.