超声辅助复合酶法对冬枣多糖的影响研究_陶艳阳.pdf

208 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期收稿日期：2022-10-29基金项目：国家自然科学基金项目(82074034)；河南省高等教育教学改革研究与实践项目(2021SJGLX787)；鹤壁市工程技术研究中心项目(鹤科2021年45号14)。作者简介：陶艳阳(1989)，女，河南新乡人，硕士研究生，讲师，研究方向为微生物与生化药学。陶艳阳1，吴 凯2，赵生文3(1.鹤壁职业技术学院，河南 鹤壁 458000；2.广西中医药大学，广西 南宁 530000；3.海南医学院第一附属医院，海南 海口 570102)摘要：为得到超声辅助复合酶法提取冬枣多糖的最佳提取工艺，并研究其对冬枣多糖的影响，文章以山东沾化冬枣为研究对象，在单因素试验的基础上，采用响应面法进行工艺优化，并对超声辅助复合酶法与传统热水法所提冬枣多糖进行理化性质与抗氧化活性的对比。结果显示：超声辅助复合酶法提取冬枣多糖的最佳条件为酶添加量2.4%、提取时间42 min、提取温度69，在此条件下多糖提取率为(7.210.13)%。与传统热水法所提多糖相比，超声辅助复合酶法提取的冬枣多糖总糖含量(67.562.02)%)与糖醛酸含量(7.250.31)%)较高，蛋白含量(1.330.18)%)较低，粒径(307.56 nm)较低，热稳定性较差，表现出较强的DPPH自由基清除能力；2种方法所提多糖均表现出良好的抗氧化能力，且均未形成稳定的晶体结构。该研究结果将为冬枣多糖的提取利用及其产品开发提供理论依据。关键词：冬枣；多糖；理化性质；提取工艺；抗氧化活性中图分类号：R 284.2 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2023)04-0208-08Effect of Ultrasonic Assisted Compound Enzyme Method onZizyphus Jujube Cv.Dongzao PloysaccharidesTAO Yanyang1,WU Kai2,ZHAO Shengwen3(1.Hebi Vocational and Technical College,Hebi 458000,China;2.Guangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanning 530000,China;3.The First Affiliated Hospital of Hainan Medical University,Haikou 570102,China)Abstract:In order to obtain the optimal extraction process of Zizyphus jujube cv.Dongzao polysaccharides using ultrasound assisted composite enzyme method and study its impact on jujube polysaccharides,this article takes Shandong Zhanhua Zizyphus jujube cv.Dongzao as the research object.Based on single factor experiments,response surface methodology was used to optimize the extraction process,and the physicochemical properties and antioxidant activity of jujube polysaccharides extracted using ultrasound assisted composite enzyme method and traditional hot water method were compared.The results showed that the optimal conditions for ultrasonic assisted compound enzyme 超声辅助复合酶法对冬枣多糖的影响研究DOI:10.13684/ki.spkj.2023.04.045 209 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期0 引言冬枣(Zizyphus jujube cv.Dongzao)是鼠李科枣属植物，其果肉鲜美，酥脆多汁，是品质优良的鲜食晚熟枣品种，其早果丰产，经济效益显著1，在东亚、南亚等地区分布较为广泛2。枣类因富含多种功能性成分，与李子、杏子、桃子、栗子共称为我国“五种水果”之一，在我国主产于黄河流域与西北地区3。传统中医认为枣是极具价值的水果之一，可通过滋养气血、提高睡眠质量和改善消化系统来延长预期寿命4。现代药理学研究表明，枣具有抗氧化、抗疲劳、免疫调节、抗过敏、镇静、保肝、抗癌、抗炎、抗衰老、抗高血糖、抗高脂等多种药理作用5。沾化区有“先有冬枣树，后有沾化城”之说，枣树种植历史悠久，冬枣已成为沾化区的支柱产业6。冬枣富含十余种化学物质，如多糖、蛋白质、碳水化合物、脂肪、维生素、有机酸以及多种微量元素，并具有较强抗氧化功能，其中多糖是冬枣中含量最丰富的生物聚合物，可调节机体的免疫功能，且对正常细胞无毒副作用，是理想的免疫增强剂7。作为枣类的重要生物活性物质，多糖由于其抗氧化、保湿、抑菌和美白等多种生物功能，被广泛用于食品和护肤添加剂中8。据研究，枣多糖表现出抗氧化、调节免疫力和肠道代谢、保护肝脏、抗疲劳、抗癌、滋养气血、促进血液凝固等多种生物活性9。如枣多糖可促进小鼠脾细胞的自发增殖和混合淋巴细胞培养10；在乙硫氨酸和对乙酰氨基酚诱导的肝损伤模型中，有效抑制模型引起的血清丙氨酸氨基转移酶水平的升高，显著改变肝脏的组织病理学变化11；白冰瑶等12在体外模拟酵解过程中发现，枣多糖能够被肠道微生物分解利用，从而提高肠道的益生功能。目前多糖有多种提取方法，其中超声辅助与酶辅助法被认为是环保的提取方法13。本文以我国山东沾化冬枣为研究对象，以单因素试验结果为基础进行响应面设计，完成对超声辅助复合酶法提取冬枣多糖的工艺优化，并进一步与传统热水法所提多糖在化学成分、结晶状态、热稳定性、多糖粒径、形貌特征以及抗氧化活性等方面进行测定比较，为冬枣多糖的提取与冬枣精深加工提供理论依据。1 材料和方法1.1 材料、试剂与仪器冬枣样品：采集自山东沾化，去核后进行真空冷冻干燥，经超微粉碎机粉碎后过60目筛，密封包装备用。无水乙醇、浓硫酸、考马斯亮蓝、磷酸、咔唑、四硼酸钠：国产分析纯，天津市致远化学试剂有限公司；纤维素酶(500 U/mg)、木瓜蛋白酶(500 U/mg)：上海源叶生物科技有限公司。J6紫外可见分光光度计：上海菁华仪器有限公司；DX-2700 X射线衍射仪：浩元仪器有限公司；TGA102热重分析仪：上海安亭科学仪器厂；3000E激光粒度分析仪：上海博迅有限公司医疗设备厂；JSM-7100F扫描电子显微镜：日本电子JEOL公司。1.2 冬枣多糖的制备1.2.1 传统热水提取 参考卢琪等14的提取方法。取冬枣样品粉末10 g，加入200 mL蒸馏水，于90 水浴提取30 min。5000 r/min离心后收集提取液，将沉淀进行二次提取后合并提取液，减压浓缩后除去蛋白(Sevage法)，将除蛋白后的样液中加入95%乙醇使提取液中的乙醇终浓度高于80%，extraction were enzyme addition 2.4%,extraction time 42 min,extraction temperature 69,the yield of polysaccharide was(7.210.13)%.Compared with the polysaccharides extracted by the traditional hot water method,the total sugar content(67.562.02)%)and uronic acid content(7.250.31)%)were higher,the protein content(1.330.18)%)was lower,the particle size(307.56 nm)was lower,and the thermal stability was poor.It showed strong scavenging ability of DPPH free radical;The polysaccharides obtained by the two methods showed good antioxidant ability and did not form stable crystal structure.The results of this study could provide a theoretical basis for the extraction and utilization of polysaccharides from Zizyphus jujube cv.Dongzao and the development of its products.Key words:Zizyphus jujube cv.Dongzao;polysaccharide;physical and chemical properties;extraction process;antioxidant activity 210 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期冷藏静置16 h后收集沉淀，冷冻干燥后即为冬枣粗多糖。1.2.2 超声辅助复合酶提取 参考高清雅等15的提取方法。取冬枣样品粉末10 g，加入0.1 g复合酶(纤维素酶:木瓜蛋白酶=1:1)后再加入200 mL蒸馏水，于50 超声提取30 min(固定功率180 W)，沸水灭酶活10 min，后续处理参考1.2.1。1.2.3 多糖提取率 多糖提取率(Y，%)通过以下公式计算：Y(%)=(X1/X2)100(1)式中：X1为干燥后多糖的质量，g；X2为取样质量，g。1.3 单因素试验设计参照1.2.2的提取方法。在固定超声功率(180 W)、固定料液比(1:20)、固定提取液pH值(pH5)的条件下，选取酶添加量、提取时间以及提取温度为影响因素进行单因素试验设计，每种因素5个水平条件，如表1所示。表1 单因素试验因素水平表水平因素酶添加量/%提取时间/min提取温度/10.5104021205031.5306042407052.550801.4 响应面试验设计以单因素试验结果为基础，确定各因素自变量范围，并对各自变量进行编码，以多糖提取率为响应值，根据Box-Behnken中心组合试验进行设计，采用 Design Expert 12软件进行分析。1.5 理化指标测定总糖含量测定：采用苯酚-硫酸法16；糖醛酸含量测定：采用间羟基联苯法17；蛋白质含量测定：采用考马斯亮蓝法18。1.6 热重分析参照王艺等19的方法：称取2 mg样品于氧化铝坩埚中，在动态氮气环境(50 mL/min)中以10/min的升温速率，由30 加热至800。1.7 粒径分析参照杨东达20的方法采用马尔文激光粒度仪测定多糖粒径(样液浓度1 mg/mL，25)。1.8 X射线衍射分析采用X射线衍射仪测定多糖的结晶状态21(管压为40 kV；数据的记录范围为580 ；5 /min)。1.9 微观结构分析通过扫描电子显微镜测定多糖的微观结构(高真空条件，10 kV加速电压放大成像)。1.10 抗氧化活性分析1.10.1 羟基自由基清除能力 参照龚频等22的方法稍作修改：在不同浓度的样品溶液(2 mL)中加入浓度相等的FeSO4和水杨酸-乙醇溶液(2 mL，9 mmol/L)，混匀后加入H2O2溶液，37 反应50 min后测定其吸光度(510 nm)。按下列公式计算OH自由基清除率。OH自由基清除率(%)=1(A1A2)/A0100(2)式中：A0为空白样(蒸馏水代替样品)的吸光值；A1为显色体系与样品的吸光值；A2为蒸馏水代替双氧水溶液的吸光值。1.10.2 DPPH自由基清除能力 参照安星亮等23的方法稍作修改：在不同浓度样品溶液(2 mL)中加入DPPH溶液(2 mL，0.05 mg/mL)，避光25 min，以蒸馏水为对照测定其吸光度(517 nm)，按照下列公式计算DPPH自由基清除率。DPPH自由基清除率(%)=1(A1A2)/A0100(3)式中：A0为蒸馏水代替样品(空白)的吸光值；A1为样液与DPPH溶液混合后的吸光值；A2为无水乙醇代替DPPH溶液的吸光值。2 结果与讨论传统热水法提取冬枣多糖的提取率为3.89%，超声辅助复合酶法提取冬枣多糖的提取率为4.51%，有效提高了多糖的提取率。2.1 单因素试验结果如图1所示，当控制其他影响因素不变时，多糖提取率随着酶添加量的增加而有所提升；当酶添加量达到2%时多糖提取率为5.51%；随着酶添加量继续增加，多糖提取率反而有所降低，可能是过多的酶导致多糖发生了降解。因此后续将选择酶添加量2%为中心值。211 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期如图2所示，当控制其他影响因素不变时，多糖得率随着提取时间的延长而增高；当提取时间为40 min时多糖提取率为5.92%；随着提取时间继续延长，多糖可能发生了降解，提取率有所下降。因此后续将选择提取时间为40 min作为中心值。Box-Behnken design(BBD)设计优化各参数，变量的范围和中心值如表2所示。表2 各因素编码及试验水平水平因素酶添加量/%A提取时间/min B提取温度/C11.53060024070+12.55080BBD共设计17组试验，结果如表3所示。表3 Box-Behnken设计方案及试验结果试验号因素多糖提取率/%YABC10007.4620007.3731106.9341106.1550116.6160007.2171106.6280116.5991105.89100116.08111016.55121016.28130116.11140007.43151016.32160007.35171016.37运用Design-Expert软件对试验数据进行分析，可拟合得到多元二阶回归方程：Y=7.36+0.0213A+0.315B0.0112C0.1425AB0.08AC0.0025BC0.467A20.4995B20.517C2对所建立的模型进行方差分析，结果如表4所示。其中模型的P值0.0001，具有极显著性；B、AB、A2、B2、C2的P0.05，说明其对结果影响显著；失拟项P值为0.3235(P0.05)，表明失拟项不显著；信噪比为17.3686(大于4)说明信号充足；模型的确定系数R2(0.9815)可解释模型98.15%的变化，调整确定系数R2Adj为0.9576，与R2较接近，且均接近1，回归方程的拟合程度和可信度较高，说明预测值与试验结果具有高度相关性。图1 酶添加量对多糖提取率的影响图2 提取时间对多糖提取率的影响图3 提取温度对多糖提取率的影响0.51.01.52.02.5234567多糖提取率/%酶添加量/%10203040502345678提取时间/min多糖提取率/%40506070802345678提取温度/多糖提取率/%如图3所示，当控制其他影响因素不变时，多糖提取率随着提取温度的升高而提高；当提取温度为70 时多糖提取率为6.19%；随着提取温度继续升高，多糖可能发生了降解，提取率有所下降。因此后续将选择提取温度为70 作为中心值。2.2 响应面优化试验2.2.1 模型拟合 在单因素试验的基础上，采用 212 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期表4 方差分析结果来源平方和自由度均值F值P值模型4.3690.484741.180.0001A-酶添加量0.003610.00360.30690.5968B-提取时间0.793810.793867.440.0001C-提取温度0.00110.0010.0860.7778AB0.081210.08126.90.0341AC0.025610.02562.170.1838BC0100.00210.9645A20.918310.918378.010.0001B21.0511.0589.250.0001C21.1311.1395.610.0001残差0.082470.0118失拟项0.044930.0151.590.3235纯误差0.037540.0094总和4.4516R20.9815R2Adj0.9576Adeq Precision17.3686C.V%1.632.2.2 交互作用分析 由图4可知，三维曲线在酶添加量方向上表现更加陡峭，提取时间方向上表现较为平缓，说明酶添加量较提取时间对冬枣多糖的提取率影响更大。结合表4与等高线图可知，酶添加量与提取时间交互作用显著。图4 酶添加量与提取时间交互作用对多糖提取率影响的响应面及等高线图图5 酶添加量与提取温度交互作用对多糖提取率影响的响应面及等高线图-1 -0.5 0 0.5 1 -1 -0.5 0 0.5 15.5 6 6.5 7 7.5 多糖提取率/%A:酶添加量B:提取时间-1-0.500.51-1-0.500.51多糖提取率/%A:酶添加量B:提取时间66.575-1 -0.5 0 0.5 1 -1 -0.5 0 0.5 15.5 6 6.5 7 7.5 多糖提取率/%A:酶添加量C:提取温度-1-0.500.51-1-0.500.51多糖提取率/%A:酶添加量C:提取温度6.46.66.877.25由图5可知，三维曲线在酶添加量方向与提取温度方向均表现出陡峭的曲线，二者对冬枣多糖提取率影响差异较小。结合表4与等高线图可知，酶添加量与提取温度交互作用不显著。由图6可知，三维曲线在提取温度方向表现出陡峭的曲线，提取时间方向上的曲线则相对平缓，说明提取温度较提取时间对冬枣多糖的提取率影响更大。结合表4与等高线图可知，提取时间与提取温度交互作用不显著。2.2.3 验证模型 该模型预测的最佳提取条件为酶添加量2.37%、提取时间42.07 min、提取温度69.29，在此条件下多糖的预估提取率为7.15%。为提高试验的可操作性，将提取条件调整为酶添加量2.4%、提取时间42 min、提取温度69，在此条件下对冬枣多糖进行3次平行提取试 213 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期验，最终多糖得率为(7.210.13)%，接近预测结果，该模型可用于预测超声辅助复合酶法提取冬枣多糖的研究。2.3 多糖的化学成分对比由表5可知，超声辅助复合酶法提取的冬枣多糖中总糖含量为67.56%，较传统热水法提高了8.38%。蛋白质含量为1.33%，较传统热水法降低了4.34%；说明复合酶中的木瓜蛋白酶有效地分解了多糖中的蛋白质；糖醛酸含量为7.25%，较传统热水法提高了4.12%，这与CHEN S L等24的研究结果一致，超声辅助提取或酶辅助提取的多糖中均含有较高的糖醛酸，本文的研究结果显示，超声辅助与酶辅助相结合可能会产生协同作用。表5 不同方法制备的冬枣多糖主要化学成分对比%提取方法总糖蛋白质糖醛酸传统热水法59.181.375.670.293.130.23超声辅助复合酶法67.562.021.330.187.250.312.4 热稳定性分析图7 传统热水提取多糖热重图图8 超声辅助复合酶提取多糖热重图图6 提取时间与提取温度交互作用对多糖提取率影响的响应面图以及对应的等高线图-1 -0.5 0 0.5 1 -1 -0.5 0 0.5 15.5 6 6.5 7 7.5 多糖提取率/%B:提取时间C:提取温度-1-0.500.51-1-0.500.51多糖提取率/%B:提取时间C:提取温度6.26.46.66.877.27.450 100200300400500600700800900102030405060708090100TG/%温度/-6-5-4-3-2-101 DTG/(%/min)TG DTG0 100200300400500600700800900102030405060708090100温度/TG/%-6-5-4-3-2-101 DTG/(%/min)TG DTG如图7、图8所示，2种冬枣多糖具有相似的热重曲线，均发生2次明显的失重过程：第一阶段为水分的损失，第二阶段为多糖的降解反应。其中传统热水提取多糖在第一阶段的最大降解速率为1.15%，发生在71.25，质量共损失6.71%；第二阶段最大降解速率为4.73%，发生在341.57，最终的残留质量为32.15%。超声辅助复合酶提取的多糖在第一阶段最大降解速率为1.21%，发生在67.59，质量共损失8.23%；第二阶段最大降解速率为5.15%，发生在335.19，最终的残留质量为22.35%。超声辅助复合酶所提多糖在第一阶段质量损失较多，说明其更易吸收水分；第二阶段降解速率较高，发生时间较早，最终残留质量较少，说明其热稳定性能低于传统热水所提多糖。CHEN X H等25对比不同提取方法对姜茎叶多糖的影响，结果显示复合酶法所提多糖热稳定性优于传统热水法，但超声辅助法所提多糖热稳定性较差，并猜测多糖在热稳定性和降解行为上的差异可能是不同提取方法所提多糖的单糖组成不同所致。因此超声波辅助可能是本次试验结果显示超声辅助复合酶法所提冬枣多糖热稳定性较差的原因。214 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期表6 不同方法制备多糖热重稳定性提取方法第一阶段第二阶段最大降解速率/(%/min)Tmax/质量损失/%最大降解速率/(%/min)Tmax/终残留质量/%传统热水提取1.1571.256.714.73341.57 32.15超声辅助复合酶提取1.2167.598.235.15335.19 22.352.5 粒径分析2.7 形貌特征分析图9 多糖粒径图10 多糖X射线衍射图谱图11 传统热水提取冬枣多糖微观结构图12 超声辅助复合酶提取冬枣多糖微观结构01020304050607080峰高2/传统热水法超声辅助复合酶法0100 200 300 400 500 600 70001020304050分布/%粒径/nm307.56 nm359.73 nm超声辅助复合酶提取传统热水提取如图9所示，传统热水法提取的冬枣多糖粒径为359.73 nm，超声辅助复合酶法提取的冬枣多糖粒径仅为307.56 nm。这与陈光静26的研究结果一致，与传统热水提取法相比较，超声辅助或复合酶法能够有效降低多糖的平均粒径。这可能是超声波的空化作用加速细胞壁破裂，促进了细胞内物质的扩散和溶解，或是酶的催化效果有效将植物组织分解，加速植物细胞破裂，而超声处理与复合酶相结合产生的协同作用增强了这一效果，有效降低了多糖的平均粒径。2.6 X射线衍射分析由图10可知，2种方法提取的冬枣多糖均表现出较出强度较低的圆钝峰形，说明2种多糖结晶程度较低，多个峰说明2种多糖均为混合多糖。提取方法的改变未对冬枣多糖的结晶状态造成改变。由图11、图12可知，2种方法提取的冬枣多糖具有不同的形貌特征，其中传统热水提取的冬枣多糖结构较为紧凑，说明提取过程较为温和。超声辅助复合酶提取的冬枣多糖则表现出较为松散的结构，这可能是超声波的空化作用导致，同时纤维素酶能够有效地破坏细胞壁，使多糖更易溶出，有效提高多糖的提取率。2种多糖的微观结构与粒径测定结果较为一致。2.8 抗氧化活性分析通过抗氧化活性测定结果可知，不同方法提取的冬枣多糖抗氧化活性有所差异。如图13所示，冬枣多糖表现出良好的羟基自由基清除能力，当样液浓度达到1 mg/mL时，2种方法提取的冬枣多糖对羟基自由基清除率均达到了90%以上，传统热水提取的冬枣多糖对羟基清除能力稍强。由图14所示，超声辅助复合酶法提取的冬枣多糖对DPPH自由基的清除能力强于传统热水提取，当样液浓度达到5 mg/mL时，超声辅助复合酶法提取的冬枣多糖对DPPH自由基的清除率为96.62%，而传统热水提取的多糖对DPPH自由基的清除率仅为86.47%。杨燕敏等27对超声波提取红枣多糖的抗氧化活性进行研究，发现当多糖样液质量浓度达到1 mg/mL时，其DPPH自由基清除率 215 食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY提取物与应用2023年 第48卷 第04期可达89%，ABTS+自由基清除率可达99%。上述研究结果说明枣类多糖具有良好的抗氧化活性。3 结论本文采用响应面法对超声辅助复合酶法提取山东沾化冬枣多糖进行了工艺优化，在最佳提取条件下(酶添加量2.4%、提取时间42 min、提取温度69)，冬枣多糖的得率为(7.210.13)%。通过与传统热水所提多糖进行理化性质的对比，发现超声辅助复合酶法有效提高了总糖与糖醛酸含量，其中复合酶中的木瓜蛋白酶有效降低了多糖中的蛋白质含量。结合粒径分析与扫描电镜结果，发现超声与复合酶协同能够有效使多糖结构松散，从而降低多糖的粒径。X射线衍射结果显示2种方法提取的冬枣多糖均为形成晶型。抗氧化活性测定结果显示，2种方法提取的冬枣多糖均具有良好的自由基清除能力，其中2种多糖的羟基自由基清除能力差异较小，超声辅助复合酶法提取的冬枣多糖DPPH自由基清除能力较强。参考文献：1陈红玉,马光跃,侯艳霞,等.不同栽培模式下冬枣果实品质主成分分析与评价J.北方园艺,2022,(10):41-48.2GAO Q H,WU C S,WANG M.The jujube(Ziziphus jujuba Mill.)fruit:A review of current knowledge of fruit composition and health benefitsJ.Journal of Agricultural and Food Chemistry,2013,61(14):51-63.3JI X L,PENG Q,YUAN Y P,et al.Isolation,structures and bioactivities of the polysaccharides from jujube fruit(Ziziphus jujuba Mill.):A reviewJ.Food Chemistry,2017,227:49-57.4CHEN J P,TSIM K W K.A review of edible jujube,the Ziziphus jujuba fruit:a heath food supplement for anemia prevalenceJ.Frontiers in Pharmacology,2020,26:593655.5LU Y,BAO T,MO J L,et al.Research advances in bioactive components and health benefits of jujube(Ziziphus jujuba Mill.)fruitJ.Journal of 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基金项目：广西自然科学基金项目(2021GXNSFAA220100)；北部湾大学人才引进项目(2021KYQD05)。作者简介：牛鹏(1996)，男，硕士，研究方向为天然产物活性成分的开发与利用。牛 鹏1,2，孟 勤1,2，何 肖2，汪双双2，尹艳镇2，张艳军2*(1.广西大学化学化工学院，广西 南宁 530004；2.北部湾大学石油与化工学院，广西绿色化工新材料与安全技术重点实验室，广西 钦州 535011)摘要：选取药食两用植物牛大力，超声辅助提取，探究其总生物碱的工艺，并分析总生物碱的抗氧化活性。以总生物碱提取率为指标，通过单因素和正交试验确定最佳工艺条件为：料液比1 g:100 mL，提取液pH值为1，超声功率300 W，超声时间20 min。在此条件下，总生物碱提取率为2.894 mg/g；所提取得到的总生物碱对DPPH、OH、ABTS+3种自由基均有较强的清除能力，IC50分别为63.89、39.75、94.48 g/mL，且总生物碱对三价铁的还原能力与浓度成正相关，结果表明总生物碱提取物具有良好的抗氧化活性。该研究结果将为牛大力中总生物碱进一步在食品中作为潜在的天然抗氧化剂提供理论依据。关键词：牛大力；总生物碱；提取工艺；抗氧化活性中图分类号：R 284.2 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2023)04-0216-07Optimization of Ultrasonic-Assisted Extraction Process of Total Alkaloids from Millettia Speciosa Champ and Its Antioxidant Activity NIU Peng1,2,MENG Qin1,2,HE Xiao2,WANG Shuangshuang2,YIN Yanzhen2,ZHANG Yanjun2*超声辅助提取牛大力中总生物碱的工艺及抗氧化活性研究理性质研究J.食品与机械,2015,31(5):206-209.22龚频,王佩佩,同美霖,等.红枣多糖的提取工艺及药理活性研究J.食品工业科技,2022,43(13):198-207.23安星亮,赵永亮,王欢,等.银耳多糖提取工艺的响应面法优化及抗氧化和保湿性研究J.食品研究与开发,2022,43(15):123-130.24CHEN S L,SHANG H 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