泌阳县肉牛饲料原料霉菌毒素污染状况调查分析.pdf

中国牛业科学2 0 2 3,49（5）：8 1-8 6China Cattle Science调查研究泌阳县肉牛饲料原料霉菌毒素污染状况调查分析李静，柏中林”，倪萌柯”，石先华”，张成峰，李明”，许会芬3*（1.泌阳县农业综合行政执法大队，河南泌阳46 37 0 0;2.泌阳县动物疫病预防控制中心，河南泌阳46 37 0 0；3河南农业大学动物科技学院，河南郑州450 0 46)摘要：目的 为了解掌握我省肉牛饲料中霉菌毒素污染情况，有针对性的指导养殖场户及饲料加工企业开展霉菌毒素防控，避免霉菌毒素污染对饲料品质和肉牛健康的危害，降低经济损失。方法 本研究对来自河南省泌阳县8 个养殖场户的2 2 份肉牛饲料原料进行分析，采用ELISA方法测定了饲料原料中黄曲霉毒素B1（A FB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素A（O T A）、呕吐毒素（DON）及 T-2毒素（T-2）的含量。结果 结果表明，在所检测的2 2 份饲料原料中都存在不同程度的霉菌毒素污染情况，其中，7 2.7 3%的饲料原料受到2 种及以上霉菌毒素污染。AFB1是污染最为严重的毒素，检出率高达90.91%，超标率达59.1%，尤其是在麦秸、花生秧和玉米中的污染表现得更为突出。其次是T-2毒素，检出率为7 7.2 7%，在麦秸和青贮玉米中污染严重。DON、ZEN及OTA毒素检出率为36.36%、2 7.2 7%及2 7.2 7%，其中，DON毒素的最大检测值为58 30.3g/kg。【结论以上结果表明，泌阳县肉牛饲料原料中霉菌毒素污染现象普遍存在，霉菌毒素共存现象也较为严重。关键词：肉牛；饲料原料；霉菌毒素；污染中图分类号：S823.9饲料霉变是制约饲料工业发展的严重问题之一，由饲料霉变引起的霉菌毒素中毒也是影响我国畜禽业健康发展的重要中毒性疾病之一，针对畜禽霉菌毒素中毒问题尚无特效的治疗药物 。然而，霉菌毒素在饲料原料中广泛存在，尤其是在南方地区气候湿润潮湿，霉变情况更为严重，造成巨大的经济损失。目前，饲料中常见的霉菌毒素有黄曲霉毒素B1（A FB1）、呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素A（O T A）及T-2毒素（T-2）等 2 。饲料霉变后主要产生三个严重后果：第一，霉菌毒素引起饲料变质，降低饲料品质；第二，饲料霉变后产生的霉菌毒素可直接导致畜禽中毒、畜禽生产性能下降甚至出现死亡，给养殖场户带来严重的经济损失；第三，采食霉变饲料的畜禽所生产的畜禽产品（肉、蛋、奶）中的毒性残留最文献标识码：A文章编号：10 0 1-9111(2 0 2 3)0 5-0 0 8 1-0 6终影响到人类健康。河南省是畜牧业大省，也是全国肉牛生产大省，肉牛饲养量、牛肉产量等主要经济指标均居全国前列。河南省在肉牛养殖方面具有巨大优势：一是河南省的秸秆资源优势；二是河南省拥有南阳牛、郏县红牛等地方品种及我国第一个自主培育的肉牛品种夏南牛，具有种质资源优势；三是河南省气候适宜肉牛生长和育肥，具有地理位置优势 3。然而，对于河南省肉牛饲料原料中的饲料霉变情况，目前报道较少。为进一步了解河南省内各类饲料原料中的饲料霉变情况，本研究收集了来自河南省泌阳县的8 个养牛场59的2 2 份肉牛饲料原料，并委托河南省种畜禽产业研究院有限公司对饲料原料中的霉菌毒素含量进行分析,以期为河南省肉牛养殖和饲料生产收稿日期：2 0 2 3-0 6-0 1修回日期：2 0 2 3-0 6-2 8基金项目：河南省现代农业产业技术体系建设专项资金资助（HARS-22-13-G1，H A R S-2 2-13-Z2）作者简介：李静（197 5一），女，本科，高级兽医师，研究方向：动物医学。*通讯作者：许会芬（198 7 一），女，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：动物遗传育种与繁殖。82提供参考和指导。1材料和方法1.1样品来源本次试验采集的饲料原料样品来自泌阳县境内的旺盛夏南牛牧业有限公司、定盈养殖场、鑫硕牧业有限公司、夏南牛科技开发有限公司、袁朝保养殖场、兴成养殖场、青华养牛场及绿野养殖场。采样时间为2 0 2 2 年12 月12 日至15日。主要采集麦秸、花生秧、青贮玉米、黄贮玉米及玉米共2 2 个样品。其中：麦秸8 个样品、花生秧2 个样品、青贮玉米5个样品、黄贮玉米1个样品、玉米6 个样品。1.2采样要求饲料原料样品的采集方法按照饲料采样（CB/T14699.1-2005）的要求进行 4，分多次、多点在养殖场原料库中随机抽取采集。其中，青贮玉米及黄贮玉米在每个存储池中分上、中、下个3个区域、每个区域各布设3个采样点，从9个点中分别采集后装入一次性自封袋内。麦秸和花生秧样品从每个储存库（垛）中选取至少6 个点进行采集后装人一次性自封袋内。每份样品不少于50 0 g，样品带回实验室粉碎后置于-2 0 冰箱中保存待测。项目总样品数/份阳性样品数/份检出率/%最高值/(gkg-)阳性样品平均值/（gkg）阳性样品中值/(gkgl)超标率/%注：国标黄曲霉毒素B1（A FB1）允许量：10 g/kg（引自GB13078-2001）；国标玉米赤霉烯酮（ZEN）允许量：500g/kg（引自GB13078.2-2006）；国标呕吐毒素（0 TA）允许量：10 0 0 g/kg（引自GB13078.3-2007）；国标赭曲霉毒素（D0N）的允许量10 0 g/kg（引自GB13078.2-2006）；国标T-2毒素（T-2）的允许量：10 0 0 g/kg（引自GB21693-2008）。下表同。2.2五种饲料样品中霉菌毒素阳性率检测结果见由表2 可知，在所检测的5种饲料样品中，玉米样品中AFB1毒素污染严重，阳性率为10 0%，其次是T-2及DON毒素的阳性率分别为50%及16.67%。麦秸样品中的霉菌毒素交叉污染情况较为严重,其中 AFB1 及T2 毒素污染率均为100%，其次是DON及0 TA分别为7 5%和37.5%，ZEN的污染率最低为2 5%。青贮玉米及黄贮玉米中国牛业科学1.3采样器材采样器械主要有：一次性自封袋、便携式真空包装机、电子秤、真空密封袋、乳胶手套、一次性口罩、消毒液、一次性防护服等。1.4检测指标采集的饲料样品委托河南省种畜禽产业研究院有限公司负责检测，采用酶联免疫吸附测定技术（ELISA）对饲料样品中的黄曲霉毒素B1（A FB1）、呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭8 0曲霉毒素A（O T A）及T-2毒素（T-2）的含量进行检测。2结果与分析2.1月所有饲料样品中霉菌毒素检测结果（见表1）由表1可知，被检测的2 2 种饲料原料中，AFB1的检出率高达9 0.9 1%，超标率达59.0 9%，最高值为7 5g/kg。T-2 毒素及OTA毒素的检出率分别为7 7.2 6%和2 7.2 7%，最高值分别为316g/kg和7.6 g/kg，且所有检测样品中的毒素含量都在国标允许范围内。DON的检出率为36.36%，超标率为13.6 4%，含量最高的样品中高达58 30.3g/kg。ZEN检出率为2 7.2 7%，超标率为9.0 9%，最高值为96 3.1g/kg。表1所有饲料样品种霉菌毒素检测结果AFB1ZEN222220690.9127.2775.0963.115.19310.2011.5594.6559.099.09样品中的霉菌毒素污染情况较为严重，T-2毒素在两种样品中的检出率均为10 0%，AFB1及ZEN毒素在青贮玉米及黄贮玉米中的检出率分别为60%及10 0%，0 TA毒素在青贮玉米中的检出率为60%，D 0 N毒素在黄贮玉米中的检出率为10 0%。花生秧样品中的毒素污染情况较轻，未检测到ZEN、O T A、D O N及 T-2毒素，但 AFB1毒素检出率为 10 0%。第49卷OTADON22226827.2736.367.65830.34.971164.744.65383.35013.64T-2221777.27316.074.1229.800第5期饲料原料玉米麦秸青贮玉米黄贮玉米花生2.3三玉米样品中霉菌毒素检测结果（见表3)由表3可知，被检玉米样品中AFB1的污染率最高，达到10 0%，最高含量为7 5g/kg，超标率为10 333.33%。其次是T2 毒素，污染率为项目总样品数/份阳性样品数/份检出率/%最高值/(g kgl)阳性样品平均值/（gkg）阳性样品中值/（gkgl）超标率/%注：“一”代表未检出。下表同。2.4麦秸样品中霉菌毒素检测结果（见表4)由表4可知，被检的8 个麦秸样品中均有不同程度的霉菌毒素污染情况，其中AFB1 毒素污染情况最为严重，检出率及超标率均为10 0%，最高值为2 7 g/kg。T-2 毒素的检出率也是10 0%，最高值为316 g/kg，各样品中的T-2毒素含量均在国项目总样品数/份阳性样品数/份检出率/%最高值/(g kgl)阳性样品平均值/（gkg-l）阳性样品中值/（gkg=）超标率/%2.5青玉米样品中霉菌毒素检测结果（见表5）由表5可知，被检测的青贮玉米样品中T-2毒素污染比较严重，检出率为10 0%，最高值为102 g/kg，含量均在国标允许范围内。被检测的青李静，等：泌阳县肉牛饲料原料霉菌毒素污染状况调查分析表2 五种饲料样品中霉菌毒素阳性率检测结果样本数/份AFB1/%6100810056011002100表3玉米样品中霉菌毒素检测结果AFB1ZEN6660100075.021.24.033.3表4麦秸样品中霉菌毒素检测结果AFB1ZEN88821002527.0567.614.0320.412.3320.410012.5贮玉米样品中AFB1、ZEN及OTA毒素的检出率均为6 0%，最高值分别为11.3g/kg、111.7 g/kg及7.6 g/kg，A FB1毒素超标率为2 0%，ZEN及OTA毒素的含量均在国标允许范围内。83ZEN/%OTA/%002537.5606010000050%，最高值为17 9.0 g/kg，超标率为0。DON毒素污染较轻，检出率为16.6 7%，最高值为317.9g/kg，超标率16.6 7%。另外，在所检测的玉米样品中无ZEN及OTA毒素污染情况。OTA60000标允许的范围内。DON毒素的检出率为7 5%，最高值为10 95.5g/kg，超标率为12.5%。0 TA毒素的检出率为37.5%，最高值为5.3g/kg，在国标允许的范围内。ZEN毒素污染程度较低，检出率为2 5%，最高值为56 7.6 g/kg，超标率为12.5%。OTA8337.55.34.34.30DON/%16.677501000DON6116.7317.9317.9317.916.7DON86751095.5528.3383.412.5T-2/%501001001000T2635017988.580.30T-288100316.089.740.1084阳性样品平均值/（ugkg）阳性样品中值/(gkgl)超标率/%2.6黄贮玉米样品中霉菌毒素检测结果（见表6)本次调查共收集到1个黄贮玉米样品，分析结果表明，该样品检测到了AFB1、ZEN、D O N及T-2毒素，未检测到OTA毒素。其中，ZEN及DON项目总样品数/份阳性样品数/份检出率/%最高值/(gkgl)阳性样品平均值/（gkg）阳性样品中值/（gkgl）超标率/%2.7花生秧样品中霉菌毒素检测结果（见表7）由表7 可知，本次检测的花生秧样品中的霉菌毒素污染情况较轻，AFB1毒素检出率及超标率均项目总样品数/份阳性样品数/份检出率/%最高值/(g kgl)阳性样品平均值/（gkg）阳性样品中值/（gkg=l)超标率/%3小结与讨论泌阳县是我国肉牛养殖大县，畜牧业尤其是肉牛养殖业在河南省农业经济中占有重要的地位。肉牛产业的发展及牛肉的品质与养殖所用的饲料原料的品质密切相关，直接影响到肉牛产业的经济收益 5。本研究对泌阳县境内8 个养牛场的2 2 份肉牛饲料原料中的霉菌毒素含量进行了检测，以此对肉牛饲养提供参考和基础数据。霉菌毒素是真菌的中国牛业科学表5青贮玉米样品中霉菌毒素检测结果项目AFB1总样品数/份5阳性样品数/份3检出率/%60最高值/(g kgl)11.36.14.420表6 黄贮玉米样品中霉菌毒素检测结果AFB1ZEN11111001007.6963.17.69 63.17.6963.10100为10 0%，但ZEN、O T A、D O N及T-2毒素均未检测到。表7 花生秧样品中霉菌毒素检测结果AFB1ZEN2220100020.019.3519.35100第49卷ZENOTA55336060111.77.685.85.677.64.800毒素含量超标严重，分别高达96 3.1g/kg及58 30g/kg，而AFB1及T-2毒素含量在国标允许范围内(表6)。OTA100OTA20000次生代谢产物，污染食物和饲料，对人和动物的健康，包括动物的生产力有重大的负面影响。曲霉菌属（Aspergillus）、镰刀菌属（Fusarium）和青霉菌属（Penillium）是产生真菌毒素的主要真菌 6 。这些产毒真菌可分为两类：一类是在田间污染农作物并产生毒素的田间真菌（Field fungi），如镰刀菌属；另一类是储藏真菌（Storage fungi），如曲霉属和青霉菌属，它们在储藏过程中产生毒素。霉菌毒素的产生与环境条件、对植物的胁迫、啮齿动物和DON5000DON111005 830.35830.35830.3100DON2000T-255100102.945.829.20T-21110047.847.847.80T-22000第5期害虫对谷物的损害以及饲料原料的pH值和水分含量等非生物因素有关 7 。泌阳县处在北半球中纬度地区，属大陆性季风气候，多湿热天气，再加上部分饲料原料储存不良，这些因素可能促进了饲料原料中真菌生长和霉菌毒素的产生 8 。从表1可以看出，被检测的2 2 种饲料原料中，AFB1在所有饲料样品中的检出率最高，达9 0.91%；部分饲料原料中DON和ZEN的含量均超出国家标准。而T-2及OTA 的毒素含量都在国标允许范围内。其中，由表2 和表3可知，在所检测的5种饲料样品中，玉米样品中AFB1毒素严重，阳性率为10 0%，其次是T-2及DON毒素。麦秸样品中的霉菌毒素交叉污染情况较为严重，主要是AFB1和T-2污染（表4）。青贮玉米中T-2毒素污染比较严重（表5），黄贮玉米中ZEN及DON的含量超标严重（表6）。花生秧霉菌毒素污染情况较轻，主要是AFB1污染（表7）。综合上述研究结果发现，在饲料中常见的霉菌毒素污染中，AFB1污染最严重。黄曲霉毒素是一组次生真菌代谢产物，由曲霉属真菌（尤其是曲霉菌）产生，主要有四种化合物：黄曲霉毒素B1（AFB1）、黄曲霉毒素 B2（A FB2）、黄曲霉毒素G1（A FG 1）和黄曲霉毒素C2（A FG 2）9。其中AFB1的毒性最强，严重中毒时可残留于肌肉组织中进一步危害人类的健康 10 。有研究表明，各地区的玉米样品中AFB1的含量变化波动较大，但是AFB1 污染玉米的情况十分普遍 1-13。霉菌毒素一般是较稳定的化合物，可以从谷物生产到产品加工过程中持续存在 14，加工方法可能会影响霉菌毒素的含量：在饲料原料研磨过程中，霉菌毒素不会分解，只会重新分布或浓缩在某些研磨部分中 15，但是高温可以减少霉菌毒素的含量 16 。其余四种毒素在这些种饲料原料中广泛存在，但是超标率较低，表明霉菌毒素在植物性饲料原料中污染普遍，这与黄志伟等人的研究结果一致 17 由以上对泌阳县境内饲料原料中霉菌毒素的调查结果中可以看出，霉菌毒素在饲料原料中是普遍存在的，而且往往是多种霉菌毒素污染并存。在动物实际生产过程中，高毒性的单一的霉菌毒素在发生频率较高时往往会引起相关人员的重视，然而不能忽略多种霉菌毒素的联合毒性作用对动物生产和人类健康的影响 18 。有研究指出，当饲料温度高于27.0、湿度高于6 2.0%且饲料中水分含量高于14.0%时,适宜曲霉菌属、镰刀菌属和青霉菌属生长，这些真菌代谢物的合成会增加，共同污染饲料原料 19。在本研究中，麦秸样品中的霉菌毒素交李静，等：泌阳县肉牛饲料原料霉菌毒素污染状况调查分析Science,1987,11(2):115-151.9WANG J,MUKHTAR H,MA L,et al.VHH Antibodies:Rea-gents for Mycotoxin Detection in Food Products J.Sensors(Ba-sel,Switzerland),2018,18(2):485.10 芦春莲，崔捷，曹玉凤，等。霉菌毒素降解酶对肉牛生长性能及毒素组织残留的影响 J畜牧与兽医，2 0 13,45（11）：60-62.11 雷元培，周建川，郑文革，等2 0 19-2 0 2 0 年中国饲料原料和饲料中霉菌毒素污染调查报告J饲料工业，2 0 2 2，43(20):59-64.85叉污染情况较为严重。因此，妥善保存并减少麦秸的使用可以减少霉菌毒素的交叉污染。值得注意的是，在所检测的粗饲料原料中，黄贮、青贮玉米中AFB1的污染情况较轻，这可能与青贮、黄贮玉米发酵方式和肉牛养殖企业、青贮专业合作社重视收储质量有关，表明实施全株玉米青贮、玉米秸秆黄贮是目前获得优质粗饲料的最佳途径之二 2 0 。O此外，花生秧中的霉菌毒素污染较轻，可以适当提高饲料原料中花生秧的占比来减少霉菌毒素的污染。综上，泌阳县肉牛饲料原料中霉菌毒素污染现象普遍存在，霉菌毒素共存现象也较为严重，应该重点关注所有饲料原料中的AFB1污染以及玉米和麦秸样品的AFB1、T-2 交叉污染情况。肉牛摄人霉菌毒素会增加疾病和死亡率以及生殖问题的发生率，导致重大经济损失，即使是小剂量的霉菌毒素在肌肉组织中积累也可能对其消费者造成严重的健康威胁。因此，控制饲料原料的收获和储藏至关重要。参考文献：1尹清强，常娟，王平，等。饲料中多种霉菌毒素的危害与生物防控 J.饲料工业，2 0 2 1，42(2 1：9-14.2胡绍科：饲料霉菌毒素的危害以及控制措施 J：畜牧兽医科技信息，2 0 2 3（3）：18 3-18 5.3许瑾，徐美芳，张小玲，等。河南省肉牛产业发展现状及对策建议 J：中国牛业科学，2 0 2 2，48（2）：55-57.4中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB/T14699.1-2005中华人民共和国国家标准-饲料采样S.北京：中国标准出版社，2 0 0 5-0 6-0 1.5李静，王之保，李明，等。泌阳县肉牛养殖常用饲料原料中微量元素及重金属含量分析 J中国牛业科学2 0 2 2，48（1）：10-13.6Dc K,G A,Pe O,et al.A Review of the Impact of Mycotoxins onDairy Cattle Health:Challenges for Food Safety and Dairy Produc-tion in Sub-Saharan Africa J.Toxins,2020,12(4):222.7BHAT R,RAI R V,KARIM A A.Mycotoxins in Food and Feed:Present Status and Future Concerns J.Comprehensive Reviews inFood Science and Food Safety,2010,9(1):57-81.8BONDI A,ALUMOT E.Anti-nutritive factors in animal feedstuffsand their effects on livestock J.Progress in Food&Nutrition8612朱风华，朱连勤2 0 19年山东省饲料原料及配合饲料主要霉菌毒素污染状况调查J中国畜牧杂志，2 0 2 0，56（11：189-194.13陈红霞，何琨玉，江青艳.2 0 18 年广东省饲料原料及配合饲料中霉菌毒素污染状况调查 J.广东饲料,2 0 19，2 8（7)：33-35.14史莹华，王成章，孙宇，等。饲料中霉菌毒素的危害及其控制 J.河南农业大学学报，2 0 0 6，40（6)：6 8 3-6 8 6.15DUARTE S C,PENA A,LINO C M.A review on ochratoxin Aoccurrence and effects of processing of cereal and cereal derivedfood productsJ.Food Microbiology,2010,27(2):187-198.16 Bullerman L B,Bianchini A.Stability of mycotoxins during foodprocessing J.International Journal of Food Microbiology,中国牛业科学2007,119(1-2):140-146.17黄志伟，刘利晓，李洪波，等.16 种植物性饲料原料中黄曲霉毒素B1，T-2 毒素，赭曲霉毒素A，伏马毒素（B1+B2）污染调查检测及控制建议J。畜牧与饲料科学，2 0 2 1，42(1):19-23.18黄玮玮霉菌毒素降解剂对仔猪生长和肠道微生物区系影响及肝脏解毒的分子机制D郑州：河南农业大学，202.2019.19王继彤，王有月，卢春香，等。饲料中霉菌和霉菌毒素的预防和去除方法 J中国畜牧兽医，2 0 0 4，31（10）：12-13.20 李鸿，蒋志成，冯定明，等。玉米青贮、黄贮研究进展及展望 J南方农业，2 0 2 1，15(1)：7 9-8 1.第49卷Investigation and Analysis of Pollution Status of Mycotoxinin Beef Cattle Feed RawLI Jing,BAI Zhong-lin”,NI Meng-ke,SHI Xian-hua”,ZHANG Cheng-feng,LI Ming,XU Hui-fen*(1.Agricultural Comprehensive Administrative Law Enforcement Brigade of Biyang County,Biyang 4637004;2.Biyang Center for Animal Disease Control and Prevention,Biyang 4637005,Henan,China;3.College of Animal Science and Technology,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450046)Abstract:Objective The present study aimed to investigate the mycotoxin contamination status in beef cattlefeed raw materials in Henan province,so as to guide and help livestock and poultry breeding enterprises and feedprocessing enterprises to carry out mycotoxin prevention and control,to avoid the harm of mycotoxin contaminationto feed quality and beef cattle health and to reduce economic losses.Methods In this study,a total of 22 beefcattle feed material samples from 8 beef cattle breeding enterprises in Biyang county of Henan province were collect-ed.ELISA technology was used to measure the content of aflatoxin B1(AFB1),zearalenone(ZEN),ochratoxin A(OTA),vomitoxin(DON)and T-2 toxin in these beef cattle feed material samples.Results The resultsshowed that mycotoxin contamination was found in all the 22 feed materials,among which 72.73%were contamina-ted by 2 or more kinds of mycotoxins.AFB1 was the most serious polluted torate of 90.91 and over-standard rateof 59.09%,especially in wheat straw,groundnut and maize.The second 39 serious polluted toxin was T-2 toxinwith a pollution rate of 77.27%,which was seriously polluted in wheat straw 40 and silage corn.The overall pollu-tion rates of DON,ZEN and OTA toxin in all the measured feed materials were 41 36.36%,27.27%and 27.27%,respectively.For DON toxin pollution,the maximum value was 5830.3 g/kg.Conclusions The aboveresults indicated that mycotoxin contamination was common in beef cattle feed materials in Biyang county,and thecoexistence of mycotoxin was also serious.Key words:beef cattle;feed material;mycotoxin;pollution