酚磺乙胺操作规程.doc

文件名称:注射用酚磺乙胺检验
标准操作规程
文件编号: ZJ-OS—087—01
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审 核 人：
批 准 人：
起草部门：质检部
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审核日期:
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颁发部门：办公室
分发部门（岗位）:档案室［ ] 办公室 ［ ］ 质保部[ ］ 生产部[ ] 质检部 ［ ］ 采供部[ ] 销售部［ ］ 用药安全部［ ］ 岗位［ ］
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变更记载和变更原因及目的见附录
注射用酚磺乙胺检验标准操作规程
1、 适用范围
本标准适用于注射用酚磺乙胺的检测。
2、 职责
质保部经理、原辅料检测人员、理化检测人员、仪器分析人员、生物检测人员、微生物检测人员、仪器分析人员
3、 引用标准
国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH05992004
4、 内容
4.1 仪器与用具
4.1.1 pH计、全封闭无菌检测系统、水浴锅、水分测定仪、高效液相色谱仪
4.1.2 十八烷基硅烷键合硅胶柱、比浊管、全封闭集菌培养器、灯检台、移液管、烧瓶、容量瓶
4.2 试药与试液
4.2.1 磷酸二氢钾、磷酸、三乙胺、甲醇、费休氏试液
4.2.2 灵敏度为0。25EU/ml鲎试剂、细菌内毒素工作标准品
4.2.3 酚磺乙胺对照品、氢醌对照品
4.3 操作方法
4.3.1 性状
取本品5瓶，用肉眼观察，结果：为白色或类白色的疏松块状物。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-＊＊)。
4.3.2 鉴别
4.3.2.1 取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺0。1g)，置一小试管中，加水2ml溶解后，加三氯化铁试液1~3滴，即显蓝色；放置后渐退成较浅的蓝紫色。
4.3.2.2 取本品内容物适量(约相当于酚磺乙胺0。1g），置一小试管中，加氢氧化钠试液5ml，加热即发生二乙胺的臭气,能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色.
4.3.2.3 取含量测定项下的供试品溶液及对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液的保留时间相一致.
实验完毕及时做好原始记录（见记录ZJ—R—213-＊＊）。
4.3.3 酸度
取本品2瓶，分别加水5ml使溶解,依法测定（附录Ⅵ　H），pH值应为5.0～7。0。实验完毕及时做好原始记录（见记录ZJ-R-213-**）。
4.3.4 溶液的澄清度与颜色
取本品5瓶,分别加水5ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊,与1号浊度标准液（附录Ⅸ B）比较,不得更浓;如显色，与黄色1号标准比色液（附录Ⅸ A第一法）比较，不得更深。实验完毕及时做好原始记录（见记录ZJ-R—213—＊*）。
4.3.5 有关物质
取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺30mg）,精密称定,置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取上述溶液1ml,置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（1）；另取氢醌对照品约30mg,置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,得到含氢醌1。2mg/ml的溶液；再精密量取0。1ml于100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度,摇匀，得到含氢醌1。2μg/ml的溶液，作为对照溶液（2)。照含量测定项下色谱条件，精密量取对照溶液（1）20μl注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分的峰高为满量程的15％~20%，再精密量取供试品溶液及对照溶液（2）各20μl，分别注入液相色谱仪,记录色谱图至供试品溶液主成分峰的保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中出现与对照溶液（2）相应的氢醌峰，按外标法以峰面积计算，含氢醌不得过酚磺乙胺标示量的0。02％；如出现其它杂质峰，量取除氢醌峰外的各杂质峰面积之和与对照溶液主峰面积比较，应不得过0。1%,实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213-＊*）。
4.3.6 干燥失重
取本品约1.0g，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过2。0％(附录Ⅷ　L)。实验完毕及时做好原始记录（见记录ZJ—R—213—＊*）。
4.3.7 细菌内毒素
取本品内容物适量（约相当于酚磺乙胺62.5mg),精密称定，用1ml无热原水溶解,得到含酚磺乙胺为62.5 mg/ml的溶液，用无热原水稀释100倍（稀释方法：0。1ml→0。9ml→0。1ml→0。9ml），依法检验（附录Ⅺ　E），结果：每1mg酚磺乙胺中含内毒素的量应小于0.40EU。实验完毕及时做好原始记录（见记录ZJ-R-213—＊*）。
4.3.8 无菌取本品20瓶，分别加入20ml灭菌注射用水中使溶解，用薄膜过滤法处理后，依法检验(附录Ⅺ　H），应符合规定。实验完毕及时做好原始记录（见记录ZJ-R—213—*＊)。
4.3.9 装量差异
取本品5瓶，依法检查(附录X　F)，应符合规定.实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R—213—*＊)。
4.3.10 可见异物
取本品5瓶，依法检查(附录IX　H)，应符合规定.实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ—R—213-**).
4.3.11 不溶性微粒　
取本品4瓶，按光阻法检查 (附录Ⅸ C）,应符合规定。实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R—213-*＊）。
4.3.12 含量测定 照高效液相色谱法（附录VD），依法测定。
4.3.12.1 色谱条件与系统适用性试验　 用氨基键合硅胶为填充剂，以0。2%磷酸二氢钾溶液－甲醇(900：100)为流动相，检测波长为223nm.理论板数按酚磺乙胺峰计算应不低于2000。
4.3.12.2 测定法 取装量差异项下的内容物适量（约相当于酚磺乙胺25mg），精密称定，置25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0.1mg/ml的溶液作为供试品溶液；另取酚磺乙胺对照品约25mg，加流动相溶解并稀释至25ml，摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中,加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0.1mg/ml的溶液作为对照品溶液，分别量取上述溶液各20μl，注入液相色谱仪中，记录色谱图,色谱图见反面,按外标法以峰面积计算,实验完毕及时做好原始记录(见记录ZJ-R-213—＊＊)。
5、 相关记录
《批检验记录审核通知单》
《成品检验报告单》
《外观（性状）检验原始记录》
《鉴别检验原始记录》
《pH(酸碱度）原始记录》
《溶液的澄清度与颜色检验原始记录》
《有关物质（高效液相色谱法）检验原始记录》
《干燥失重检验原始记录》
《细菌内毒素（鲎试剂法）检验原始记录》
《无菌试验（滤膜过滤法）检验原始记录》
《装量差异检验原始记录》
《可见异物检验原始记录》
《不溶性微粒（光阻法)检验原始记录》
《含量（高效液相色谱法）检验原始记录》
附录：
变更记载：
版本号 批准日期 执行日期
变更原因及目的
01

02

03

编号：ZJ—R —XXX-01 起草人： 审核人： 日期：
江苏金丝利药业有限公司
鉴别检验原始记录

样品背景:
样品名称： 批 号： 规 格：
取样日期: 检验日期： 检验依据：

检验记录:
（1)取本品内容物（约相当于酚磺乙胺0.1g） g，置一小试管中,加水2ml溶解后，加三氯化铁试液1~3滴,结果 　　　　　
　　 。
（2）取本品内容物(约相当于酚磺乙胺0.1g） g，置一小试管中，加氢氧化钠试液5ml，加热后，结果
.
(3）精密称定本品内容物（约相当于酚磺乙胺25mg） 　 mg,用流动相溶解并稀释至25ml,摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0。1mg/ml的溶液作为供试品溶液；另取酚磺乙胺对照品 　 mg，加流动相溶解并稀释至25ml，摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中,加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺0。1mg/ml的溶液作为对照品溶液，分别量取上述溶液各20μl,注入液相色谱仪中，记录色谱图，色谱图见含量测定原始记录,结果
　　　　　.

结论：

检验人： 复核人： 报告日期:

编号：ZJ—R —XXX—01 起草人： 审核人： 日期:
江苏金丝利药业有限公司
有关物质(高效液相色谱法）检验原始记录

样品背景:
样品名称： 批 号： 规 格：
取样日期： 检验日期： 检验依据：

检验记录：
填充剂：氨基键合硅胶　　　检测波长：223nm
流动相：0.2%的磷酸二氢钾溶液/甲醇＝900/100
上样体积：20μl 采样时间:30min 　流速：0。8 ml/min
供试品溶液配制：取样品内容物（约相当于酚磺乙胺30mg)，精密称定，W样 　　 mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得到含酚磺乙胺0.6mg/ml的溶液.
对照溶液（1）：精密量取供试品溶液1.0ml,置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到含酚磺乙胺0。006mg/ml的溶液。
对照溶液（2):精密称取氢醌对照品W对　　　mg,置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀,得到含氢醌1。2mg/ml的溶液；再精密量取0.1ml于100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度,摇匀，得到含氢醌1。2μg/ml的溶液。
分别精密量取供试品溶液、对照溶液（1），对照溶液（2)各20μl，注入液相色谱仪中,量取峰面积后，用外标法计算供试品中氢醌和其它杂质的含量。

检测结果：
氢醌百分含量＝W对×A样(氢醌）×50×平均装量（g）
　　　　　　　　　　　　×100％
　　　　A对2（氢醌）×25×1000×W样×标示量（g）

其它杂质百分含量＝　　A样（杂质）×0.006
　　　　　 ×100％
　　　　　　　　A对1（主峰）×0.6

结论：

检验人： 复核人： 报告日期：

编号:ZJ—R —XXX—01 起草人： 审核人： 日期：
江苏金丝利药业有限公司
含量（高效液相色谱法）检验原始记录
样品背景：
样品名称： 批 号: 规 格：
取样日期: 检验日期： 检验依据：

检验记录：
填充剂：氨基键合硅胶 柱编号
流动相：以0.2%磷酸二氢钾溶液-甲醇（900：100)为流动相，配制方法为取磷酸二氢钾 mg,加水溶解至 ml，取甲醇 ml,与上述溶液混匀，抽滤，脱气即得。
检测波长 　 　 流速 上样体积 　 采样时间 　 　　
对照品溶液的制备：取酚磺乙胺对照品（约相当于酚磺乙胺25mg）2份，加流动相溶解并稀释至25ml，摇匀;精密量取5 ml，置50 ml量瓶中,加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺 的溶液作为对照品溶液，
供试品溶液的制备：精密称定装量差异项下的内容物(约相当于酚磺乙胺25mg）
2份，用流动相溶解并稀释至25ml，摇匀；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得到约含酚磺乙胺 的溶液作为供试品溶液；
分别精密量取上述溶液各20µl,对照品溶液1、2分别连续进样3次、2次，供试品溶液1、2各进样1次，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，称量和检测数据见下表。
检验结果：
根据外标法得：C对：A对=C样：A样
按平均装量计，样品中含酚磺乙胺为标示量的百分比为:
(A样）平均×（C对/ A对）平均×25×50×平均装量
＝ ×100％ =
(W样）平均×5×标示量
名 称
称样量
浓度（C对)
主峰面积（A对）
C对/ A对
(C对/ A对）平均
RSD
对照-1—1

对照—1—2

对照—1—3

对照-2-1

对照—2—2

名 称
W样
主峰面积（A样）
含量（％)
平均值
供试-1

供试—2

结论：

检验人: 复核人: 报告日期：