基于中西医临床病症特点的角膜炎动物模型分析.pdf

2023 年 9 月第 33 卷 第 9 期中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINESeptember,2023Vol.33 No.9南硕,宫欢欢,李秀敏,等.基于中西医临床病症特点的角膜炎动物模型分析 J.中国比较医学杂志,2023,33(9):113-120.Nan S,Gong HH,Li XM,et al.Analysis of animal models of keratitis based on the characteristics of clinical conditions of traditional Chinese and Western medicines J.Chin J Comp Med,2023,33(9):113-120.doi:10.3969/j.issn.1671-7856.2023.09.013基金项目国家自然科学基金(82274119);岐黄学者(国中医药人教函 2022-6);河南省重大公益专项(201300310100)。作者简介南硕(1999),女,硕士研究生,研究方向:中药学。E-mail:1462155133 通信作者苗明三(1965),男,教授,研究方向:中药学。E-mail:miaomingsan 基于中西医临床病症特点的角膜炎动物模型分析南 硕,宫欢欢,李秀敏,苗明三(河南中医药大学药学院,郑州 450046)【摘要】角膜炎是眼科常见疾病,且具有较高的致盲率。本文查阅大量角膜炎动物模型的相关文献,总结和分析目前已有的角膜炎动物模型的机制,并结合已制定的中西医临床诊断标准,对模型进行中西医临床吻合度的评价,并对其优点和不足进行分析,并提出一些建议。发现现存模型大多是以西医理论为基础的造模方法,缺少中医诊断标准;模型多以单个因素造模,不能很好地模拟出疾病真实的病变过程;模型的诊断缺少表观指标;建议对动物采用病证结合的方式进行造模。制备具有较高临床吻合度的角膜炎动物模型,并建立完善的评价标准是非常重要的,在现代医学实验中能帮助我们更好地认识角膜炎的发生发展规律,并对其进行有效预防及治疗。【关键词】角膜炎;动物模型;病症结合;中西医;诊断标准【中图分类号】R-33 【文献标识码】A 【文章编号】1671-7856(2023)09-0113-08Analysis of animal models of keratitis based on the characteristics of clinical conditions of traditional Chinese and Western medicines NAN Shuo,GONG Huanhuan,LI Xiumin,MIAO Mingsan(School of Pharmacy Henan University of Chinese Medicine,Zhengzhou 450046,China)【Abstract】Keratitis is a common ophthalmic disease with a high rate of blindness.This article reviews the relevant literature on animal models of keratitis,summarizes and analyzes the mechanisms of existing animal models of keratitis,and evaluates the clinical anastomosis degree of traditional Chinese and Western medicines in combination with the established clinical diagnostic standards of traditional Chinese and Western medicines,analyzes their advantages and disadvantages,and provides suggestions.Most existing models are based on Western medical theories and lack the diagnostic standards of traditional Chinese medicine.The model is mostly established by a single factor that cannot simulate the actual lesion process of the disease.Diagnosis of the model lacks apparent indicators.It is recommended that animals are modeled by combining disease evidence.It is very important to prepare animal models of keratitis with high clinical compatibility and establish efficient evaluation standards to better understand the occurrence and development of keratitis in modern medical experiments and effectively prevent and treat the disease.【Keywords】keratitis;animal model;combination of disease and symptom;traditional Chinese and Western medicines;diagnostic criteriaConflicts of Interest:The authors declare no conflict of interest.角膜类疾病是目前致盲的重要原因,其危害程度仅低于白内障。角膜炎有较高的致盲率,为临床最常见的眼科疾病,是导致视力损伤和失明的重要原因1。临床症状主要有灼热、异物感、刺痛、怕光、流眼泪、视觉减退及分泌物增加等,且疾病持续时间较长2-3。西医以抗病毒或抗生素等药物为主进行治疗,但易产生耐药性4。中医认为角膜炎常见病因有饮食不当、外感六淫、劳倦、七情内伤等;病机为五脏功能失调,主要责于心、肝、胆、肺,病久不愈多为肾虚5。在用药上,重视全身与眼部的辨证关系,在用清热解毒药时配合使用吴茱萸、炮姜等温热之品可以增加疗效6。本文根据角膜炎的中西医临床特点,对现有常用角膜炎动物模型的制备方法进行归纳并分析,为相关角膜炎动物模型的进一步完善,以及为动物实验研究提供一定的参考。1 角膜炎的病因病机1.1 现代医学病因病机 角膜炎病因可能为外伤导致的细菌、真菌、病毒、原生生物等病原体感染或机体的免疫功能低等因素,反复发作,可单眼或双眼发病,对视力产生严重威胁7。其病机主要是角膜上皮出现不同程度的缺损,炎症细胞浸润,角膜基质纤维出现不同程度的水肿8,还可能导致前房积脓,角膜穿孔,可能引起眼球萎缩或眼内炎9。1.2 中医学病因病机 角膜炎中医上称其为“聚星障”是因为外感风邪、挟热化火,导致黑睛生翳似细小星点状,且会伴有怕光、涩疼、流泪的症状10。角膜炎常见病因主要有饮食不当、外感六淫、劳倦、七情内伤、瘀血内阻、痰湿内停六个方面,其中与本病发病关系最为密切的为湿、热、风、痰、瘀。病机多标实为主,或虚实夹杂11。2 角膜炎的临床特点分析 2.1 西医诊断标准及特点 西医主要通过临床症状、实验室诊断、显微镜检查及组织病理学特征等方式,结合患者的病史等对角膜炎做出临床诊断。本文参照 2013 年出版的眼科学和国家中医药管理局 1994 年发布的中医病证诊断疗效标准12及文献13-16的标准,拟定以下角膜炎西医诊断标准 5 条,参考模型评价新方法17,给以下诊断标准赋值:临床症状较为明显,赋值为 30%,实验室诊断较为准确,赋值为 30%,组织病理学赋值 20%,其余各项各赋值为 10%,合计100%,详见表 1。2.2 中医诊断标准及特点 角膜炎的中医诊断标准根据 2019 年发布的中医内科病证诊断疗效标准18和 2000 年发布的中医眼科学及相关文献19所制定。中医临床证型分为风寒犯目、风热上犯、湿热蕴蒸、肝火炽盛、阴虚邪恋等。总结以下中医诊断标准,主症归纳为:(1)视觉模糊,(2)睫状体充血,(3)怕光流泪,(4)体温升高,(5)头痛小便短赤,(6)睫状体充血,(7)反复发作,(8)怕冷;次症归纳为:(1)热重寒轻,(2)喉咙痛,(3)寒重热轻,(4)头重胸闷。根据文献17,主症赋值 10%,次症赋值核心指标赋值5%,合计 100%,详见表 2。3 角膜炎动物模型分析 3.1 模型动物的选择 角膜炎动物模型常用的动物有兔、鼠、猴、树鼩等20。猴子的价格昂贵,不能进行大规模的实验;树鼩的研究历史较短,获得的实验结果可靠性不高21,因此使用频率较高的是兔和鼠。3.2 动物模型与临床吻合度 由于角膜炎发病率和致盲率的增加,严重威胁人类的眼部健康,为了更好地研究角膜炎的发病机制,建立贴合临床疾病发生发展的动物模型对于角膜炎的研究非常重要。根据文献17,将综合吻合度高于或等于 70%的模型确定为高吻合度模型,50%70%的模型确定为一般吻合度模型,低于或等于50%的模型确定为低吻合度模型。具体模型特点与吻合度见表 3。3.3 吻合度分析 对以上模型吻合度进行分析可得:基质内注射法制备的真菌性角膜炎模型和损伤眼浅层角膜法制备的细菌性角膜炎模型西医临床吻合度为 70%属于高吻合度模型;角膜表面镜片术法和前眼房注射法为 60.7%属于一般吻合度模型;角膜表面划痕法模型的临床吻合度为 38.2%;角膜表面镜法制作的棘阿米巴感染模型吻合度为 25.7%;二者属于低吻合度模型。而通过对中医临床吻合度分析得:损伤眼浅层角膜法和角膜接触镜法吻合度为 65%属于一般吻合度模型,其他吻合度都较低属于低吻合度模型。基质内注射法操作方便,有很好的重复性,411中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9 表 1 角膜炎西医诊断标准Table 1 Western diagnostic criteria for keratitis分类 Classification表现 Presentation(1)临床症状、病史(1)Clinical symptoms,medical history角膜外伤史;发病急,有疼痛、怕光、流泪、分泌物增加等。History of corneal trauma;Acute onset,pain,photophobia,tearing,increased discharge,etc.(2)实验室诊断(2)Laboratory diagnosis病灶刮片检查:病原体阳性。血常规检查:中性粒细胞增多。PCR 检测:阳性。Lesion scraping examination:positive for pathogens.Blood routine examination:neutrophilia.PCR test:positive.(3)裂隙灯显微镜检查(3)Microscopic examination of slit lamps真菌性可见菌丝苔被、浸润病灶或脓包,病变区灰白色隆起。细菌性浸润区上皮水肿,有基质和脓性分泌物渗出。病毒性见浸润,前房积脓,中央区脓包,角膜模糊,部分可见云翳。棘阿米巴性角膜前基质层浸润,周围基质水肿,大量血管细微结构,白色浸润灶。Fungal mycelial lichen,infiltrating lesions or pustules,and gray-white bulges in the lesion area.Epithelial edema in the bacterial infiltrate zone,with stromal and purulent discharge exudation.Viral see infiltration,anterior chamber empyema,central pustules,corneal blurredness,and some clouds.Acanthamoebic anterior stroma layer infiltration,surrounding stromal edema,a large number of fine structures of blood vessels,white infiltrates.(4)角膜激光共聚焦显微镜(4)Corneal laser confocal microscopy真菌性病变区有真菌菌丝或孢子,基质纤维增生,炎症细胞浸润,菌丝杂乱。细菌性病变区有大量炎症与树突状细胞,边缘组织水肿,病灶区结构不清。病毒性有大量树突状细胞在基底膜下,神经纤维主干的分支、直径和密度减少。棘阿米巴性包囊有厚壁结构,杂乱无章,部分存在基质内空腔。Fungal lesions have fungal hyphae or spores,matrix fiber hyperplasia,inflammatory cell infiltration,and hyphae mess.There are a large number of inflammation and dendritic cells in the bacterial lesion area,edema of marginal tissue,and unclear structure of the lesion area.Virus has a large number of dendritic cells under the basement membrane,and the branches,diameter and density of the main stem of nerve fibers are reduced.Acanthamoebic cysts have a thick-walled structure,are disorganized,and some of them have intrastromal cavities.(5)组织病理学特征(5)Histopathological features充血;角膜有溃疡,黄色或灰白色浸润点,黄分泌物,荧光素染色阳性;前房积脓,严重者角膜穿孔或化脓性眼内炎。Hyperemia;Cornea has ulcers,yellow or gray-white infiltrates,yellow secretions,fluorescein staining positive;Hypopyon,severe corneal perforation or purulent endophthalmitis.也有较高的感染率;但此方法在一定程度上破坏了鼠角膜的正常结构,与人角膜自然感染过程存在不同,所以此基质内注射法感染角膜炎更多是用来判断其药物疗效和探究诊断方法21。角膜接触镜法将感染角膜的过程进行了更好地还原,不但使感染率提高,而且还能研究其发病机制和过程;但该方法操作较为困难,花费时间较长,对实验动物的麻醉时间和操作人员有较高的要求。前眼房注射法所使用的病毒少、对角膜损伤小。但该操作对研究人员的技术要求高。4 讨论 角膜是一种无血管的透明组织,对视觉功能至关重要39。角膜炎为眼科常见多发病,治疗角膜炎现代医学多采用药物治疗,如更昔洛韦联合糖皮质激素治疗单纯疱疹病毒性角膜炎40,纳他霉素配合伏立康唑治疗真菌性角膜炎41,左氧氟沙星滴眼液治疗细菌性角膜炎42等。中医称角膜炎为聚星障,511中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9 表 2 角膜炎中医诊断标准Table 2 TCM diagnostic criteria for keratitis辩证分型Syndrome differentiation of TCM主要症状Cardinal symptom次要症状Secondary symptom舌脉Tongue and pulse风热上犯Wind and heat offend视觉突然模糊,睫状体充血赤红,体温升高,怕冷怕光。Vision is suddenly blurred,the ciliary body is hyperemic and red,the body temperature rises,fear of cold,fear of light.热重寒轻,喉咙痛。Heat is heavy and cold,and the throat is sore.舌苔薄黄,脉浮数。Tongue is thin and yellow,and the veins are floating.风寒犯目Wind chill is invigorating视觉模糊,睫状体充血微红,体温升高,怕冷,流泪,怕光。Blurred vision,hyperemia and redness of the ciliary body,increased body temperature,fear of cold,tearing,fear of light.寒重热轻。Cold heavy and hot light.舌苔薄白,脉浮紧。Tongue is thin and white,and the veins are tight.肝火炽盛Liver is blazing视觉模糊较严重,眼睑红肿头痛,小便短赤,怕光流泪。Vision blur is more serious,eyelids are red,swollen and headache,urine is short and red,and tears are afraid of light.白晶上血色鲜红。Blood on the white crystal is bright red.口苦苔黄,脉弦数。Bitter moss in the mouth,pulse number.湿热蕴蒸Moist heat and steaming视觉模糊,发作反复,小便短赤,病程长。Blurred vision,recurrent seizures,short urine,long course of disease.头 重 胸 闷,大 便 不 成 形,口粘。Heavy head and chest tightness,unformed stool,sticky mouth.舌苔红或黄腻,脉濡。Tongue is red or yellow,and the pulse is wet.阴虚邪恋Yin and evil love病程长,长时间不痊愈,怕光,睫状体充血,微红。Course of the disease is long,it does not heal for a long time,photophobia,ciliary hyperemia,reddish.眼内干涩。Dryness in the eyes.舌红少津,脉细或数。Tongue is red and less jin,and the pulse is thin or counting.该病多由风邪犯目,风热相搏,肝火内炽,上攻于目,热病后损耗津液,复感风邪或阴虚致病43。中医通过疏风清热、平肝泻火等方式进行治疗,根据病程可使用新制柴连汤加减,龙胆泻肝汤加减或银翘散等,临床疗效显著,能起到疏散风热,退翳明目的功效44。但经研究表明,仅使用西药治疗角膜炎有不良反应多和复发率高的缺点,仅使用中药又有患者依从性差、疗程长的缺点45,而中西医结合治疗更符合治疗需求,对治疗更有针对性,且预后效果好。因此建立具有中西医临床病证特点的角膜炎动 物 模 型 是 中 西 医 结 合 治 疗、药 物 选 择 的关键46。本文对现有角膜炎动物模型通过对中西医临床诊断标准进行赋值,并评价其吻合度,得到与西医诊断标准吻合度较高的模型有基质内注射法制备的真菌性角膜炎模型,角膜接触镜法制备的细菌性角膜炎模型,其次为角膜表面镜片术法,角膜表面划痕法,前眼房注射法。现有模型与中医诊断标准的吻合度都比较低,主要是由于对模型动物的症状进行评价时缺少对中医证型的分析。一个良好的动物模型,不但需要对西医临床症状进行诊断,还要结合中医证型进行混合分析评价,例如增加观察动物的舌苔、辨别寒热等来分析角膜炎的中医证型。采用中医相关指标的动物模型可以弥补仅有西医造模方法的不足,充分发挥中西医优势,利于临床治疗和药物研发47。理想的动物模型应符合预测、结构、表观 3 个效度标准进行全面分析48。角膜炎较明显的表观临床症状有怕光、流泪、分泌物增多等,但已有动物模型实验并未提到这几种症状,大多进行指标检测、解剖观察和显微镜观察,造成动物的浪费和耗材的增加。故角膜炎动物模型实验中可通过观察模型动物的是否有分泌物、流泪及畏光等表观指标作为参考。表观指标可作为造模成功标准的重要参考,用多个指标体系对动物模型进行综合评价可提高其造模方法的准确度49。疾病一般是由多个因素引起的,而目前所采用611中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9表 3 基于中西医临床病症特点的角膜炎动物模型分析Table 3 Analysis of animal models of keratitis based on the characteristics of clinical conditions of traditional Chinese and Western medicine分类Classification模型Model造模方法Molding method动物Animal模型特征Model character与 临 床 症 状 的 吻 合 度Consistency with clinical symptoms真菌性角膜炎Fungal keratitis茄病镰刀菌感染 模 型22-23 Fusarium nightshade infection model角膜基质内接种孢子悬液Inoculate the spore suspension in the corneal stroma雄 性 豚Male guinea pigs机制:茄病镰刀菌的生物膜形成能力是致病的关键因素。Mechanism:Fusarium nightshade s biofilm-forming capacity is a key factor in pathogenesis.优点:操作方便,有良好的重复性和感染率。Advantages:Easy to operate,good repeatability and infection rate.缺点:破坏了角膜的正常结构,与自然感染有差异。Disadvantages:Destruction of the normal structure of the cornea,differing from natural infection.符合西医指标:(1)、(2)、(3)、(4)、(5);中医:(1)Meet the indicators of Western medicine:(1),(2),(3),(4),(5);traditional Chinese medicine:(1)白色念珠菌感染模型24Model of Candida albicans infection角膜表层镜片法Corneal superficial lens method小鼠Mouse机制:念珠菌通过胞吞作用侵入角膜上皮,入侵蛋白介导,并通过蛋白水解酶破坏角膜上皮细胞的紧密连接。Mechanism:Candida invades the corneal epithelium through endocytosis,mediated by invading proteins,and disrupts the tight junctions of corneal epithelial cells by proteolytic enzymes.优点:操作方便,有良好的重复性和感染率。Advantages:Easy to operate,good repeatability and infection rate.缺点:感染过程破坏了角膜的正常结构,与人角膜自然感染过程存在差异。Disadvantages:Infection process destroys the normal structure of the cornea,which is different from the natural infection process of the human cornea.符合西医指标:(1)、(2)、(3)、(5);中医:(1)Meet the indicators of Western medicine:(1),(2),(3),(5);traditional Chinese medicine:(1)病毒性角膜炎Viral keratitis巨 细 胞 病 毒(cytomegalovirus,CMV)感 染 模型25-27 Cytomegalovirus infection model前 眼 房 注 射CMV CMV is injected into the anterior atrium大鼠Rats机制:CMV 在离开宿主细胞感染邻近细胞之前伪 G1 期复制和组装现象已被证明与角膜炎有关。Mechanism:Phenomenon of pseudo-G1 phase replication and assembly of CMV before it leaves the host cell to infect neighboring cells has been shown to be associated with keratitis.优点:病毒用量少、对角膜损伤小。Advantages:Less virus dosage,less damage to the cornea.缺点:对研究人员的技术要求高。Disadvantages:High technical requirements for researchers.符合西医指标:(1)、(2)、(4)、(5);中医:(1)、(2)Meet the indicators of Western medicine:(1),(2),(4),(5);traditional Chinese medicine:(1),(2)单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus,HSV-1)感染模型28-30 Herpes simplex virus infection model 角膜划痕接种法 接 种 HSV-1 Corneal scratch inoculation with HSV-1小鼠Mouse机制:HSV-1 使细胞坏死,并释放病毒粒子感染角膜。Mechanism:HSV-1 causes cell necrosis and releases virions to infect the cornea.优点:操作比较简单。Advantages:Operation is relatively simple.缺点:破坏了角膜的正常结构,与自然感染有差异。Disadvantages:Destruction of the normal structure of the cornea,differing from natural infection.符合西医指标:(2)、(3)、(5);中医:(1)、(2)Meet the indicators of Western medicine:(2),(3),(5);traditional Chinese medicine:(1),(2)711中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9续表3分类Classification模型Model造模方法Molding method动物Animal模型特征Model character与 临 床 症 状 的 吻 合 度Consistency with clinical symptoms细菌性角膜炎Bacterial keratitis铜绿假单胞菌感染(Pseudomonasaeruginosa,PA)模型31-34 Model of Pseudomonas aeruginosa infection 角膜接触镜法:给小鼠佩戴事先接触过 PA 的隐形眼镜Contact corneal method:mice are given contact lenses that have been exposed to PA beforehand小鼠Mouse机制:PA 分泌的一些蛋白酶能破坏角膜基质的胶原蛋白。Mechanism:Some proteases secreted by PA can destroy collagen in the corneal stroma.优点:将感染角膜的过程尽可能进行模拟和还原。Advantage:Process of infection of the cornea is simulated and restored as much as possible.缺点:操作具有难度,实验动物的麻醉时间及实验操作人员有较高要求。Disadvantages:Operation is difficult,the anesthesia time of the experimental animal and the experimental operator have high requirements.符合西医指标:(1)、(2)、(3)、(5);中医:(1)、(2)Meet the indicators of Western medicine:(1),(2),(3),(5);traditional Chinese medicine:(1),(2)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染 模型35 Model of Staphylococcus aureus infection损伤兔眼浅层角膜后感染金黄色葡萄球菌Damage to the superficial cornea of the rabbit eye is followed by infection with Staphylococcus aureus新西兰大白兔 New Zealand white rabbit机制:葡萄球菌蛋白酶增加了角膜细胞的粘附和侵袭。Mechanism:Staphylococcal protease increases corneal cell adhesion and invasion.优点:细菌性角膜炎是目前眼科最常见和严重的,具有典型性和代表性。Advantages:Bacterial keratitis is currently the most common and serious in ophthalmology,typical and representative.缺点:局部感染后,症状难以维持;泪液所含抗菌物质使含菌量减少。Disadvantages:After local infection,symptoms are difficult to maintain;Antibacterial substances contained in the tears reduce the amount of bacteria.符合西医指标:(1)(2)、(3)、(4)、(5);中医:(1)、(2)Meet the indicators of Western medicine:(1)(2),(3),(4),(5);traditional Chinese medicine:(1),(2)致病性原虫Pathogenic protozoa棘阿米巴(acanthamoeba)感染模型36-38 Acanthamoeba infection model角膜表面镜片术法Corneal surface lensing新西兰大白兔 New Zealand white rabbit机制:棘阿米巴与角膜发生粘附后,产生各种蛋白酶入侵角膜基质层。Mechanism:After the adhesion of Acanthamoeba to the cornea,various proteases are produced to invade the corneal stromal layer.优点:感染时间短,发病率高。Advantages:Short duration of infection,high incidence.缺点:操作具有难度,对实验动物的麻醉时间与操作人员有较高要求。Disadvantages:Operation is difficult,and the anesthesia time and operator of the experimental animal have high requirements.符合西医指标:(2)、(3)、(4)(5);中医:主证(1)Meet the indicators of Western medicine:(2),(3),(4)(5);traditional Chinese medicine:(1)的仅用单个因素造模不能很好的模拟出疾病真实的病变过程。多因素复合造模方法不但可以提高造模的效率与质量,而且能缩短造模的时间50。相关文献记载的动物模型大多是通过不同方法感染微生物这一单因素引起的角膜炎,这些模型缺少中医特色,应结合中医病因建立多因素复合模型。中医认为角膜炎的病位在黑睛,属于风轮,风轮内应肝胆,与五脏中之肝胆关系密切,且发病多由风热犯目、肝胆火炽、湿热犯目,阴虚内热这几个病因引起,可以采用生物、物理、化学等因素引起的以上几个致病因素施予动物,结合以上因素,从而建立角膜炎的复合模型50。中医理论认为眼与气血、津液、经络、脏腑关系密切,眼部疾病是机体失调的局部反应,诊断方面强调辨病与辨证相结合51,因此建议造模时采用病证结合的方式。病证结合的造模思路一般分为两种:一是病因和病理两种因素相复合造模,就是中医病因因素“证”和西医病理因素所导致的“病”结合,如上述角膜炎复合模型,将二者同时或先后施于实验动物;二是对疾病动物模型进行辨证造模,811中国比较医学杂志 2023 年 9 月第 33 卷第 9 期 Chin J Comp Med,September 2023,Vol.33,No.9也就是不用和“证”相关的致病因素,而是由正向思维进行评价或逆向思维进行反证,从疾病模型中找出中医证候的属性52。该造模方法使“病”与“证”两者相互依存,是现代动物模型研究的发展趋势53。有学者提出,证候与疾病不可以完全分裂看待,中医证候的变化原本就存在于疾病发展过程中。在建立西医角膜炎动物模型的基础上,观察其建立后中医证型的表现及形成过程中证的演变,从而确定该角膜炎病证结合模型54。动