巴比妥类药物的分析.doc

(完整word)巴比妥类药物的分析第五章 巴比妥类药物的分析第五章 巴比妥类药物的分析基本要求 1、掌握本类药物的结构与理化性质. 2、掌握典型药物苯巴比妥、司可巴比妥钠、硫喷妥钠的法定鉴别和含量测定方法(包括原理、方法和计算）。 3、熟悉本类药物的特殊杂质检查和其他定量分析方法。 4、了解生物样品中本类药物的测定方法。 学习要点 一、典型药物的鉴别、检查和含量测定 典型药物化学鉴别特殊杂质检查含量测定苯巴比妥银盐反应(白色）、铜盐反应(紫色或紫色)、NaNO2-H2SO4反应(橙黄色）、甲醛-硫酸反应（玫瑰红色环)酸度、溶液的澄清度、中性或碱性物质原料:银量法制剂：银量法司可巴比妥钠银盐、铜盐反应（同上）、烯丙基反应（使碘褪色)、测定衍生物熔点、Na+反应溶液的澄清度、中性或碱性物质原料:溴量法胶囊：溴量法硫喷妥钠银盐、铜盐反应(同上）、硫元素反应(碱性下与铅生成白色，加热，产生黑色PbS）、测定衍生物熔点、Na+反应紫外法注: (1）银盐反应和铜盐反应为含丙二酰脲结构药物的反应,巴比妥类药物与硝酸银反应产生白色，与硫酸铜吡啶反应，产生紫色(区别：硫喷妥钠的铜盐反应结果为绿色）。 （2)制备衍生物测定熔点:是利用巴比妥类药物的钠盐易溶于水,而其游离酸难溶于水的性质.在钠盐中加酸使巴比妥类游离析出，过滤、干燥后测定熔点。 （3）苯巴比妥的银量法-在碳酸钠溶液中用硝酸银滴定，以电位滴定法指示终点。硝酸银与苯巴比妥的摩尔比为1：1。 （4)司可巴比妥钠的溴量法司可巴比妥钠分子中含有一个双键，可与溴（或碘)发生加成反应，1个双键消耗1分子Br2（或I2），所以滴定剂与被测物的摩尔比为1:1。 二、巴比妥类药物的紫外性质 巴比妥类药物具弱酸性，在不同碱性条件下可发生不同程度的电离,具有不同的紫外吸收特征.在酸性条件下不电离,无紫外吸收。而含硫巴比妥在酸性、碱性条件下均有紫外吸收，据此可以区别。 内容 第一节 基本结构与特征代表性药物：1、苯巴比妥 （Phenobarbital ） 2、司可巴比妥钠 （Secobarbital sodium) 3、硫喷妥钠(Thiopental sodium)4、巴比妥、异戊巴比妥、戊巴比妥（barbital，Amobarbital，pento barbital）一、弱酸性与强碱成盐二、水解反应-与碱液共沸NH3三、与重金属离子反应与钴、铜 有色，与银、汞白色 四、紫外吸收光谱特征（一）、硫代巴比妥的紫外吸收 （二）、5,5取代巴比妥的紫外吸收特征 五、显微结晶（一)、药物本身的晶形 1、巴比妥长方形结晶 2、苯巴比妥球形-花瓣状结晶 （二)、反应产物的晶形 1、巴比妥与铜吡啶形成十字形紫色结晶 2、苯巴比妥形成浅紫色不规则或菱形结晶 其他巴比妥类与铜吡啶不形成结晶，可区别. 第二节 鉴别试验 一、丙二酰脲试验：(一）、巴比妥类 + Na2CO3TS+ 过量AgNO3 白色 (二)、巴比妥类 + 吡啶溶液 + Cu2+ 紫色（） （含硫巴比妥类为绿色,可与之区别) 二、钠盐的鉴别试验： （钠离子的焰色反应）(一）、在无色火焰中燃烧，呈现黄色火焰。 三、取代基试验（一)、苯环取代基反应： 1、硝化反应 2、亚硝酸钠-硫酸反应 3、硫酸甲醛反应 苯巴比妥 + KNO3+H2SO4 黄色苯巴比妥 + NaNO2+H2SO4 橙黄色苯巴比妥 + 甲醛+ H2SO4 玫瑰红色4、硫元素反应：(1)、硫喷妥钠+NaOH+Pb2+ 白色(2）、加热PbS（黑色）5、与香草醛反应：（二）、不饱和取代基（烯丙基）反应： 1、司可巴比妥钠 + I2( Br2)碘（溴)褪色 2、或在碱性溶液中与高锰酸钾反应，使后者褪色 第三节 特殊杂质检查一、苯巴比妥的特殊杂质(一)、酸度 （二)、溶液的澄清度 (三)、中性或碱性物质 控制酸性杂质苯丙二酰脲，利用其酸性较苯巴比妥强,能使甲基橙显红色，规定一定量供试品溶液加甲基橙后不得显红色。 利用杂质苯巴比妥酸在醇中溶解度小，观察苯巴比妥乙醇溶液的澄清度。要求溶液澄清。司可巴比妥钠也作此项检查，但溶剂为水 控制合成副产物或分解产物.利用这类杂质不溶于氢氧化钠试液而溶于醚，而苯巴比妥溶于氢氧化钠试液的性质差别，将他们分离提取,挥干乙醚,称重残渣重量,确定是否超过限量。（司可巴比妥钠也有此检查）第四节 含量测定一、银量法(一）、原理：在碳酸钠溶液中巴比妥类与硝酸银首先生成可溶性一银盐，继续滴定,稍过量的银离子就和巴比妥类的一银盐形成难溶性二银盐沉淀,使溶液变浑浊而指示终点。 （二)、方法的改进1、以甲醇替代水丙酮为溶剂， 2、电位法替代目视法指示终点，克服了温度变化影响和目视法的主观性倾向 (三）、注意事项1、无水碳酸钠需新鲜配制，银电极使用前用硝酸浸洗,再用水洗净。（四)、应用：苯巴比妥、异戊巴比妥等采用该法。二、溴量法(一)、原理:司可巴比妥钠含有不饱和双键，可与溴定量发生加成反应，中国药典采用剩余溴量法测定原料和其胶囊的含量. (二）、方法：KBrO3 + 5KBr + HCl3Br2（标准液1）(三)、巴比妥类+Br2（定量过量) 加成物 (四）、Br2 (剩余）+KI （过量) I2 （五）、I2 +2Na2S2O3（标准液2)2NaI+Na2S4O6 (六)、同时做空白试验 (七)、计算： (1)、1molBr相当于M/2司可巴比妥钠 (2)、M=260。27 (3）、所以 T=M样品/2 mol / L标准液=13。01 （(V空白V样品）FT)/（W（mg）)100%F=C实际/C理论三、紫外分光光度法（一)、直接紫外分光光度法（注射用硫喷妥钠 (1）、取相当于硫喷妥钠0。25g，用水稀释至500ml，再用0。4氢氧化钠溶液稀释至5ug/ml.另取硫喷妥为对照品，用0.4%氢氧化钠溶液稀释至约5ug/ml.分别测定吸收度，计算含量。 （2)、取样量中硫喷妥钠的mg数=(A样/A对)C对1.09150 (3)、1。091=硫喷妥钠分子量/硫喷妥分子量 (4）、50=（500 100）/1000 （二)、提取分离后紫外分光光度法（苯巴比妥钠） （1）、酸化：苯巴比妥钠加水使溶解 + HCl 析出沉淀 (2）、提取:沉淀+ 氯仿苯巴比妥，蒸发至近干 残渣 （3)、碱化:残渣+醇+ pH10溶液测定溶液(发生一级电离） （4）、测定：240nm处测定吸收度，以苯巴比妥为对照。 四、差示分光光度法(一）、原理：利用被测物在两种不同溶液中吸收光谱发生了特征性变化,而共存干扰物在该两种溶液中未引起光谱变化，测定两种溶液的吸收度差值（A值），根据A与被测物浓度C的线性关系进行定量测定。（二）、特点:简便、直观，具备一般分光光度法直接读数的优点,无需事先分离，又能消除干扰；提供一个近似理想的参比溶液.（三）、方法：(1)、取供试品一定量，做成溶液，分成2等分 （2）、1份+酸 一定体积 (测定） A测 (3）、另1份+碱 同样体积 （参比) A参 (4）、A测A参=A样 （5）、干扰物在两种溶液中吸收光谱无变化，即A杂=0, (6)、 A样只与样品浓度C呈线性关系. (7)、另取对照品同法操作，得A对，按标准对照法计算含量.(四）、巴比妥类药物的差示光谱1、A240= A pH10 酸性， 2、A260=A pH13- A pH10 3、方法： (1）、样品、对照-同样操作,A样、A标（2）、计算：（A样/A标) C标 = C样 （3）、注意:不同pH溶液中被测物的浓度必须相等4、作业: （1)、根据巴比妥类药物在不同pH条件下的光谱图，设计差示光谱的几种组合。(2）、差示光谱的目的?应用范围？（3）、举例见教材：复方苯巴比妥散、血清中巴比妥类药物的测定五、酸碱滴定法(一）、醇水混合溶剂中，用氢氧化钠溶液滴定，以麝香草酚酞为指示剂 （增加溶解度，防止滴定过程中产生的弱酸盐水解而影响终点观察） （二)、在胶束水溶液中，用氢氧化钠溶液滴定，以麝香草酚酞为指示剂 （在表面活性剂的胶束水溶液中巴比妥类药物酸性增强,使终点明显） (三）、非水溶液滴定：在非水溶剂“二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿等”中，用甲醇钠甲醇溶液等滴定(非水酸量法） (四）、非水碱量法-在酸性溶剂中用高氯酸滴定剂滴定弱碱性药物。1、常用溶剂-冰醋酸； 2、滴定剂高氯酸滴定液； 3、指示剂结晶紫； （五）、非水酸量法-在碱性溶剂中用甲醇钠滴定剂滴定弱酸性药物。1、常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺； 2、滴定剂：甲醇钠滴定液. （六)、非水碱量法1、原理：BH+A +HClO4 BH+ ClO4+HA2、滴定剂： HClO4-冰HAc溶液 3、非水溶剂：根据被测物的碱性强弱，常用的非水溶剂有冰醋酸、醋酐、两者混合物。 4、温度影响: (1)、标准液须注明标定时温度， (2)、标定与测定温度不一致，须校正（温差10）或重新标定(温差10) . （3)、N测=N标/1+0.0011（t测t标）5、指示剂终点颜色由电位法确定V（ml）E(mv)01507.002367。102477.20；2637。252787。303057.353807。40408