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第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备
一、A1
1、细胞克隆化的常用技术为
A、加饲养细胞
B、HAT培养基培养
C、有限稀释法
D、软琼脂培养法
E、显微操作技术
2、HAT培养基中，阻断细胞DNA合成主要途径的成分是
A、H
B、A
C、T
D、H+A
E、T+A
3、能够在HAT培养基长期存活的细胞是
A、脾-瘤融合细胞
B、脾细胞
C、骨髓瘤细胞
D、脾-脾融合细胞
E、瘤-瘤融合细胞
4、制备单克隆抗体最常用的细胞融合剂为
A、HAT
B、8-AG
C、PEG
D、PHA
E、BSA
5、各种单克隆抗体分子都有的特性是
A、分子量在10000以下
B、具有两个完全相同的抗原结合部位
C、H链与L链借非共价键相连
D、能结合补体
E、能产生沉淀反应
6、多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项
A、稳定和易培养
B、自身无分泌功能
C、改变细胞恶性变化
D、融合度高
E、HGPRT缺陷
7、阳性杂交瘤细胞克隆化培养时，多少细胞数才能进行克隆化培养
A、单个
B、多个
C、双个
D、混合
E、没有数目限制
8、杂交瘤细胞保存最好在
A、室温
B、-4℃
C、-20℃
D、-70℃
E、-196℃
9、B细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基是
A、HAT培养基
B、次黄嘌呤培养基
C、甲氨蝶呤培养基
D、嘧啶核苷培养基
E、胸腺嘧啶核苷培养基
10、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体
A、经过免疫的B淋巴细胞
B、经过免疫的T淋巴细胞
C、未经过免疫的B淋巴细胞
D、未经过免疫的T淋巴细胞
E、以上均不对
11、关于杂交瘤细胞特点的错误描述
A、具备了双亲细胞的特点
B、分泌人源性单克隆抗体
C、分泌鼠源性单克隆抗体
D、体外繁殖快速
E、能分泌抗体
12、杂交瘤细胞保存最好在
A、室温
B、-4℃
C、-20℃
D、-70℃
E、液氮
13、双特异性抗体分子的应用不包括
A、免疫学诊断
B、肿瘤放射显像
C、介导药物杀伤
D、介导细胞杀伤
E、介导补体的生物学活性
14、HAT培养基中三种关键成分为
A、次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
B、黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
C、氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
D、腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
E、鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷
15、多发性骨髓瘤细胞是制备B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其特点不包括
A、稳定和易培养
B、自身无分泌功能
C、改变细胞恶性变化
D、融合度高
E、亲缘较近
16、人－鼠嵌合抗体是
A、人IgV区与鼠IgC区连接
B、人IgC区与鼠IgV区连接
C、人Ig与鼠Ig重组
D、鼠IgV与人IgV区重组
E、以上都是
17、生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为
A、液体培养
B、半固体培养
C、固体培养
D、鸡胚培养
E、动物接种
18、双特异性抗体分子的构建是
A、特异性不同的两个小分子抗体连接
B、特异性相同的两个小分子抗体连接
C、在小分子抗体的氨基端设计半胱氨酸残基
D、提高抗体的特异性
E、只能从Fab组建
19、制备单克隆抗体，选择培养基要选择融合的
A、脾细胞与骨髓瘤细胞
B、骨髓瘤细胞与淋巴瘤细胞
C、脾细胞与脾细胞
D、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞
E、淋巴瘤细胞与淋巴瘤细胞
20、可以得到完全人源化抗体，在肿瘤的诊断与治疗中具有独特优越性的是
A、嵌合抗体
B、小分子抗体
C、双特异性抗体
D、单克隆抗体
E、噬菌体抗体库技术
二、B
1、A.次黄嘌呤
B.胸腺嘧啶核苷
C.HGPRT
D.甲氨蝶呤
E.叶酸
<1> 、次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶是
A B C D E
<2> 、是叶酸的拮抗药
A B C D E
答案部分
一、A1
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 有限稀释法不需特殊设备，克隆出现率高，为实验室最常用的方法。
【答疑编号100917288,点击提问】
2、
【正确答案】 B
【答案解析】 杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的，其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤（A）阻断。
【答疑编号100917287,点击提问】
3、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞有骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的，其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤阻断，但由于与脾细胞融合，可获得其HGPRT，利用次黄嘌呤合成为嘌呤碱，最终与嘧啶一起合成DNA。因此，杂交瘤细胞在选择性得以生存，故能够在HAT培养基长期存活。
【答疑编号100917286,点击提问】
4、
【正确答案】 C
【答案解析】 杂交瘤技术的原理是利用聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体，在HAT选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得既能产生所需单克隆抗体，又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。
【答疑编号100917285,点击提问】
5、
【正确答案】 B
【答案解析】 单克隆抗体来源于一个（克隆）B细胞，因此具有两个完全相同的抗原结合部位。其他都不是单克隆抗体分子都有的特性。
【答疑编号100917284,点击提问】
6、
【正确答案】 C
【答案解析】 多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，细胞有恶性变化。
【答疑编号100783362,点击提问】
7、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞形成后的初期很不稳定，为确保单克隆抗体的专一性及避免其他阴性细胞对其生长的影响，必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养，产生单克隆杂交瘤细胞，经2～3次检测均为阳性的杂交瘤单个细胞，才能进行克隆化培养。
【答疑编号100783361,点击提问】
8、
【正确答案】 E
【答案解析】 杂交瘤细胞保存最好在-196℃的液氮中。
【答疑编号100783360,点击提问】
9、
【正确答案】 A
【答案解析】 细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基含有三种关键成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T），缩写为HAT培养基。
【答疑编号100783359,点击提问】
10、
【正确答案】 A
【答案解析】 制备单克隆抗体的方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与经免疫的小鼠脾脏的B细胞融合。
【答疑编号100783358,点击提问】
11、
【正确答案】 B
【答案解析】 杂交瘤细胞是两个不同特性的细胞融合成一个异型核细胞，这两种细胞分别是小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞，分泌鼠源性单克隆抗体。
【答疑编号100783357,点击提问】
12、
【正确答案】 E
【答案解析】 杂交瘤细胞应及时冻存，以保证细胞不会因污染或过多传代变异丢失染色体而丧失功能。目前均采用液氮保存细胞。
【答疑编号100783356,点击提问】
13、
【正确答案】 E
【答案解析】 双特异性抗体分子可介导标记物与靶抗原结合或某些效应因子定位于靶细胞，在免疫学检测中可简化操作步骤，提高检验质量。应用双特异性抗体介导的药物杀伤效应可用于肿瘤等的治疗。
【答疑编号100783355,点击提问】
14、
【正确答案】 A
【答案解析】 HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶昤(aminopterin)和胸腺嘧啶核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列，HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。
【答疑编号100783351,点击提问】
15、
【正确答案】 C
【答案解析】 多发性骨髓瘤是B细胞系恶性肿瘤，其特点是稳定易培养、自身不分泌免疫球蛋白及细胞因子、融合率高，是次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶的缺陷株，为理想的脾细胞融合对象。
【答疑编号100783350,点击提问】
16、
【正确答案】 B
【答案解析】 人－鼠嵌合抗体是将人IgC区与鼠IgV区连接，导入细胞内表达制备而成的抗体。
【答疑编号100783349,点击提问】
17、
【正确答案】 A
【答案解析】 生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法是：①动物体内诱生方法：先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不完全佐剂，一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔，1～2周后，无菌抽取腹水，离心取上清液即可。②体外培养法：是实验室制备的方法。将杂交瘤细胞置培养瓶中培养，待培养液颜色改变或细胞过多开始死亡时，收集上清液，离心去掉碎片及细胞即可。综上，生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为液体培养。
【答疑编号100783348,点击提问】
18、
【正确答案】 A
【答案解析】 双特异性抗体（BsAb）又称双功能抗体（BFA），它的两个抗原结合位点具有不同的特异性，应用于结合两种不同的抗原分子，在生物医学中有着重要的意义。
【答疑编号100783347,点击提问】
19、
【正确答案】 A
【答案解析】 选择培养基的作用下，只有B细胞（脾细胞）与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才能具有持续培养的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。
【答疑编号100783346,点击提问】
20、
【正确答案】 E
【答案解析】 噬菌体抗体库技术是将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体，转染工程细胞进行表达，然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆睡菌体抗体。利用这一技术可以得到完全人源性的抗体，在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。
【答疑编号100783345,点击提问】
二、B
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 次黄噤呤磷酸核酸核糖转化酶是HGPRT。
【答疑编号100783353,点击提问】
【正确答案】 D
【答案解析】 甲氨蝶呤是叶酸的拮抗药。
【答疑编号100783354,点击提问】
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