DB37∕T 3990—2020 食品中四氯虫酰胺残留量的测定 液相色谱-质谱∕质谱法(山东省).pdf

TCS 67.050 X 04 DB37 山东省山巳ET且，万标准DB37/T 3990-2020 食品中四氯虫酷肢残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of tetrachlorantraniliprole residue in foods-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2020-06-08发布2020-07-08实施山东省市场监督管理局发布目IJ1=1 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由青岛海关提出、归口并组织实施。本标准起草单位:青岛海关技术中心、黄岛海关。DB37/T 3990-2020 本标准主要起草人:崔淑华、郭庆龙、张谦、王宁、刘宏玉、刘成帅、崔伟佳、逢昔莎、裴萍。DB37/T 3990-2020 食品中四氯虫酷肢残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1 范围本标准规定了食品中四氯虫酌肢残留量的液相色谱一质谱/质谱检测方法。本标准适用于大米、玉米、甘蓝、番茄、苹果、干辣椒、猪肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋中澳氨虫酷肢残留量的测定，其它食品可参照执行。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的号|用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的号|用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理i式样经乙腊提取，分散固相萃取净化(油脂含量高的样品须先用乙睛饱和正己院去月旨和冷冻去脂后，用液相色谱质谱/质谱仪测定，外标法定量。4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1 试剂4.1.1 乙睛(CH3CN，7.5-05-8)色谱纯。4.1.2 甲醇(CH30H，67-56-1)色谱纯。4.1.3 正己皖(CoH11110-54-3)色谱纯。4.1.4 乙酸按(CN02，631-61-8)色谱纯。4.1.5 氧化铀(NaCl，7647-14-5)用前在450C灼烧4h，冷却后密封备用。4.1.6 无水硫酸馍(MgS047487-88-9)用前在650C灼烧4h，贮藏干燥器中，冷却后各用。4.2容;夜自己制4.2.1 乙睛饱和正己炕溶液:取适量乙月的口入正己炕中，剧烈振摇，静置至出现明显分层，弃去乙睛层备用。4.2.2 乙酸按溶液(5mmol/U称取0.385g乙酸接用水溶解并定容至1L。4.3 标准品四氯虫团先肢(Tetrachlorantraniliprole，C1HloBrC14Ns02 CAS号1101384-14-6)，纯度二三95.5%。DB37/T 3990-2020 4.4 标准j容i夜自己市IJ4.4.1 标准储备溶液准确称取适量的标准品(精确至O.lmg)，用乙睛溶解，配制成浓度为1000g/mL的标准储备溶液，该储备溶液18oc保存，保存期为一年。4.4.2 标准中间溶液准确吸取适量标准储备溶液，用甲醇配制成浓度为10J g/mL的标准中间溶液，该溶液4oc保存，保存期为一个月。4.4.3 基质标准工作溶液根据需要准确吸取适量标准中间溶液，用样品空白基质溶液配制成0.0005、0.001、0.002、0.005、0.01、0.02mg/L的系列标准工作溶液。该溶液应现用现配。4.5 材料4.5.1 N一丙基乙二肢CPrimarysecondary amine,PSA)粒度4060J mo 4.5.2 十八炕基硅炕键合相CC1H)粒度4060J mo 4.5.3 有机滤膜O.22mo 5 仪器和设备5.1 液相色谱一三重四级杆质谱仪:配备电喷雾离子源CESI)。5.2 高速组织捣醉机。5.3 高速粉碎机。5.4 匀浆机。5.5 天平:感量0.01mg和0.01g。5.6 振荡器。5.7 超声波仪。5.8 离心机，转速不低于8000 r/mino 5.9 涡旋混合器。5.10 具塞离心管50mL,10 mL。6 试样制备与保存6.1 大米、玉米、干辣椒取500g代表性样品，用高速粉碎机处理至粉状，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封井做好标识。于18oc以下保存。6.2 甘蓝、番茄、苹果取500g代表性样品，用匀浆机制成匀浆，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于18oc以下保存。6.3 猪肉、鸡肝2 DB37/T 3990-2020 取500g代表性样品，用高速组织捣醉机制成糊状，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于18oc以下保存。6.4 牛奶、鸡蛋取500g代表性样品，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于18 oc以下保存。7 分析步骤7.1:t1)l 7.1.1 大米、玉米称职4g试样(精确至0.01g)于50mL具塞离心管中，加5mL水泪匀，放置30mino准确力Q入20.0mL乙睛振荡提取30min.超声提取5min后加入3g无水硫酸展和2g氧化呐，涡旋振荡1mi口.8000 r/min 离心5min后，待净化。7.1.2 甘蓝、番茄、丰果称取10g试样(精确至0.01g)于50mL具塞离心管中。准确加入20mL乙睛振荡提取30min.超声提取5min后加入3g无水硫酸模和2g氧化纳，涡旋振荡1min.8 000 r/min离心5min后，待净化。7.1.3 干辣椒称职4g试样(精确至O.Olg)于50mL具塞离心管中，加15mL水混匀，放置30min。准确加入20.0 mL乙腊振荡提取30min.超声提取5min后加入3g无水硫酸镇和2g氧化主内，涡旋振荡1mi口.8000 r/min 离心5min后，持净化。7.1.4猪肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋称职4g-t式样(精确至0.01g)于.50mL具塞离心管中，加5mL水;昆匀(检测牛奶时，不需加水)放置30mino 准确加入20.0mL乙睛振荡提取30min.超声提取5min后加入3g无水硫酸镇和2g氧化主内，涡旋振荡1min.8 000 r/min离心.5min后，待净化。将10mL上洁液转移至.50mL具塞离心管中，加入10 mL乙睛饱和正己炕，涡旋振荡2min.静置分层，弃去正己炕层，再加入10mL乙睛饱和正己炕重复操作一次，然后将离心管置于一18oc冷冻30min后，迅速取出2mL提取液，持净化。7.2 净化称取O.15 g无水硫酸馍.O.10 g PSAfQO.10 g C1R置于10mL离心管，吸取2mL上述提取液至此离心管中，涡旋1min.8 000 r/min离心5mino取上清液过0.22m有机做孔滤膜后，供液相色谱一质谱/质谱测定。7.3 测定7.3.1 液相色谱参考条件条件如下:a)色谱柱Cj柱，柱长150mm.内径2.1mm.粒径3m.或等效柱;b)流速O.25 mL/min;3 c)进样量5L;d)柱温30OC;e)流动相及梯度洗脱条件见表1。表1流动相及梯度洗脱条件时间ffiln。O.5 2.5 6.0 6.1 10 7.3.2 质谱参考条件条件如下:a)电离方式:电喷雾电离(ESI);b)毛细管电压3.5kV;c)干燥气温度350OC;d)辅助气(革自气)温度350OC;甲醇%25 25 90 90 25 25 DB37/T 3990-2020 乙酸接溶液%75 75 10 10 75 75 e)雾化气、干燥气、辅助气(革肖气均为自纯氮气，使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求:f)扫描方式:负离于扫描:g)检测方式:多反应监测，参数见表2;h)多反应监测条件。表2多反应监测条件中文名称英文名称母肖子子筒子驻留时间裂解电压碰撞能量m/z m/z/s/V/eV 499.7 O.2 120 3 四氯虫国先肢tetrachlorantraniliprole 535.8 201.9且O.2 120 4 几为定星子岗子7.3.3 标准曲线的制作按浓度由小到大的)11员序，依次分析基质标准溶液，得到相应的峰面积。以基质标准溶液的浓度为横坐标，以相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。7.3.4 试样溶液的测定将试样溶液注入液相色谱质谱仪中，得到相应的峰面积，由标准曲线得到试样溶液中四氯且酌肢的浓度。如果试样溶液浓度超过标准由线的上限，须用乙睛稀释试样溶液至线性范围后再进行测定。在上述仪器条件下，J氯虫田先肢的参考保留时间为.5.0mino标准品的MRM总离子流图和选择离子流图参见附录A中图A.1、图A.204 DB37/T 3990-2020 7.3.5 定性如果样品的质量色谱峰保留时间与基质标准溶液一致，定性离于对的相对丰度与浓度相当的基质标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表3的规定，则可判断样品中存在相应的被测物。表3定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度允许的相对偏差7.4 空白试验50%士20%除不称取试样外，均按上述步骤进行。8 分析结果的表述试样中四氯虫田先肢的含量按式(1)计算:20%50%士25%10%20%士30%运10%士50%xV X二一一一一x1000.(1)mx1000 式中:X一一试样中四氯虫自克服的含量，单位为毫克每千克Cmg/kg)一一从基质标准曲线得到的试样测定液中四氯虫酷肢的浓度，单位为微克每毫升(g/mL)V 试样测定液的最终走容体积，单位为毫升(mL)m一一最终样液所代表的试样质量，单位为克(g)0 注:计算结果应扣除空白值，保留两位有效数字。9 精密度9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比恒(百分率)，应符合附录C的要求。9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值(百分率)，应符合附录D的要求。10 定量限和回收率10.1 定量限大米、玉米、干辣椒、猪肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋中四氯虫酌肢定量限为0.00.5mg/kg，甘蓝、番茄、苹果中四氯虫酌肢定量限为0.002mg/kgo 10.2 回收率不同样品中四氯虫目相安添加水平及回收率参见附录Bo5 DB37/T 3990-2020 附录(资料性附录)四氯虫H安标准品谱图A qL AA 图见图流子高采于斗叶J边AA 图见捆-VE3四mHEZ回回MU1MMMEET-于离凸山MM nR MM 口口HH 准标LFLu 门口H酌虫氯四5.04 EM回回唱团团司8 9 tfmin 7 E 5 4 3 2 四氯虫H安标准品MRM总离子流图535且1499.7当049 tfmin E 7 6 5 4 3 z mru4甜甜刮目3团团且EEU四M四tMMMU唱z 图A.1 国U目帽-M回国司535.8 12019 504 x103 1_4 Ql 1_3 昌1_2帽唱回回国国,.Q.:r:0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 32ZU EEE-m Egm fp 4t s E E 5 4 3 2 回6 四氯虫!t肢标准晶MRM选择离子流图图A.2 DB37/T 3990-2020 附录B(资料性附录)样品的添加浓度及回收率的实验数据样品的添加浓度及回收率的实验数据见表B.1。表B.1 样品的添加浓度及回收率的实验数据样品名称添加浓度/Cmg/kg)回收率范围/%O.005 83.4103.1 大米O.04 87.6106.4 O.2 78.991.3 O.005 84.7lO1.4 玉米O.01 81.297.9 O.02 86.8108.5 O.002 90.7113.9 甘蓝O.2 88.2104.3 2 95.5户112.8O.002 88.5107.3 番茄O.2 82.497.6 2 79.990.4 O.002 92.1 113.2 苹果O.8 89.4108.2 2 93.6户106.9 O.005 87.3户112.8干辣椒5 79.6户103.5 7 81.798.9 O.005 85.9产116.4猪肉O.2 83.296.。2 80.3 104.1 O.005 85.6116.8 鸡肝O.01 81.4户100.5 O.15 78.396.2 O.005 84.Or 111.1 牛奶O.05 92.5户106.3 O.6 80.9107.0 O.005 78.1 115.7 鸡蛋O.15 82.4102.2 O.2 84.6107.1 7 DB37/T 3990-2020 附录c(规范性附录)实验室内重复性要求实验室内重复性要求见表C.1o表C.1 实验室内重复性要求被测组分含量精密度mg/kg%乏O.001 36 0.0010.01 32 0.01运O.1 22 0.1运l18 1 14 8 DB37/T 3990-2020 附录D(规范性附录)实验室间再现性要求实验室问再现性要求见表D.1o表D.1 实验室间再现性要求被测组分含量精密度mg/kg%乏O.001 54 0.001O.01 46 0.01运O.1 34 0.1运l25 1 19 9