含氨基甲酸酯结构的阿维菌素B_%282a%29衍生物的合成、杀虫活性及分子对接.pdf

研究论文doi:10.16801/j.issn.1008-7303.2023.0050含氨基甲酸酯结构的阿维菌素 B2a衍生物的合成、杀虫活性及分子对接张宇,高门杰,张添珍,祝冠彬,李庆山*,李娇*(南开大学化学学院元素有机化学国家重点实验室农药国家工程研究中心（天津），天津300071)摘 要：对阿维菌素 B2a进行结构优化，在阿维菌素 B2a的 C4位引入氨基甲酸酯片段，设计合成 21 个新型 C4-氨基甲酸酯阿维菌素 B2a衍生物。利用高分辨质谱(HRMS)、核磁共振(NMR)等对新化合物的结构进行表征，并测试其对小菜蛾、东方黏虫、玉米螟虫、草地贪夜蛾及棉铃虫的杀虫活性。结果表明，大部分化合物对东方黏虫、玉米螟虫、草地贪夜蛾及棉铃虫的杀虫活性均有不同程度的提高，其中化合物 Z5 对黏虫和草地贪夜蛾表现出优异的活性，LC50值分别为 1.02 和 2.44mg/L，均优于对照药阿维菌素 B1a，比阿维菌素 B2a提升了 20 多倍。构效关系分析表明，增加化合物的亲脂性有助于提升目标化合物的杀虫活性。分子对接研究表明，在阿维菌素 B2a的 C4位引入氨基甲酸酯片段后，氨基甲酸酯片段的苯环与受体蛋白残基中的芳香环之间形成了-相互作用，杀虫活性得到提高。关键词:阿维菌素 B2a；氨基甲酸酯；杀虫活性；构效关系；分子对接中图分类号：TQ450.6文献标志码：ASynthesis,insecticidal activity and molecular docking ofavermectin B2a carbamate derivativesZHANGYu,GAOMenjie,ZHANGTianzhen,ZHUGuanbin,LIQingshan*,LIJiao*(National Pesticide Engineering Research Center(Tianjin),State Key Laborator of Elemento-organic Chemistry,College of Chemistry,Nankai University,Tianjin 300071,China)Abstract:ToimprovetheinsecticidalactivitiesofavermectinB2a,thefunctionalcarbamatefragmentwasintroducedintotheC4positionofavermectinB2a,and21novelavermectinB2aC4-carbamatederivativesweredesigned,synthesized,andtheirstructureswerecharacterizedbyhigh-resolutionmassspectrometry(HRMS)andnuclearmagneticresonance(NMR).TheinsecticidalactivityagainstPlutellaxylostella,Mythimna separata,Spodoptera frugiperda,Ostrinia furnacalisandHelicoverpa armigerawastested.TheresultsshowedthattheinsecticidalactivitiesofmostcompoundsagainstM.separata,S.frugiperda,O.furnacalisandH.armigerawereimprovedtosomedegrees.Amongthem,compoundZ5收稿日期：2023-03-23；录用日期：2023-05-04；网络首发日期：2023-06-07.Received:March23,2023;Accepted:May4,2023;Published online:June7,2023.URL:https:/doi.org/10.16801/j.issn.1008-7303.2023.0050http:/ Journal of Pesticide ScienceE-mail:showedexcellentinsecticidalactivityagainstM.separataandS.frugiperda,withLC50valuesof1.02and2.44mg/L,respectively.ItsinsecticidalactivityisbetterthanthatofthecontrolavermectinB1a,andmorethan20timeshigherthanthatofavermectinB2a.Thestructure-activityrelationshipanalysisshowedthatmorelipophilicityofthecompoundcanhelptoimprovetheactivityofthetargetcompound.MoleculardockingstudiesshowedthatwiththeintroductionofthefunctionalcarbamatefragmentintotheC4positionofavermectinB2a,-interactionwasformedbetweenthebenzeneringofthecarbamatefragmentandthearomaticringinthereceptorproteinresidue,whichwasbelievedtocontributetheinsecticidalactivityofthenewcompounds.Keywords:avermectinB2a;carbamate;insecticidalactivity;structure-activityrelationship;moleculardocking阿维菌素是一类具有广谱杀虫、杀螨以及杀线虫活性的微生物源农药，是目前全球生产量和使用量最大的生物化学农药，在农业和畜牧业的病虫害防治方面做出了巨大贡献1-7。在阿维菌素工业生产过程中，通常会产生 20%30%的废渣，一般将废渣溶解在甲苯或二甲苯中得到阿维菌素油膏，用于生产乳油制剂8-9。但是阿维菌素油膏中除含有阿维菌素的有效成分外，还含有大量有害物质10。我国从 2012 年开始禁止将阿维菌素油膏用于乳油制剂生产11。对阿维菌素油膏进行分离、纯化、分析后得知，阿维菌素油膏的主要成分是阿维菌素 B2a，其杀害虫活性低于阿维菌素B1a12-14。阿维菌素 B1a和 B2a的结构式见图式 1。氨基甲酸酯衍生物是被广泛应用的杀虫剂、杀菌剂和除草剂。氨基甲酸酯在药物化学中被广泛用作肽键替代物，这主要是由于它的化学稳定性和细胞膜渗透能力15-17。此外，氨基甲酸酯片段可以通过甲酸酯基或氨基参与活性位点间氢键的形成。因此，氨基甲酸酯片段的引入为调节药物的理化性质、改善药物稳定性和药代动力学特性提供了机会18。如图式 1 所示，阿维菌素 B2a与阿维菌素 B1a主要的差别在 C23 位处，前者的 C23位是一个羟基，使其亲脂性较差，降低了化合物被动扩散穿透生物膜的能力，导致阿维菌素 B2a活性低于阿维菌素 B1a。为了充分利用阿维菌素油膏资源，减少环境污染，张建军研究团队对B2a的结构进行了修饰，发现了杀虫活性显著提高的先导结构3,8,说明阿维菌素 B2a具有较大的结构修饰潜力。鉴于此，本研究通过在阿维菌素B2a中引入亲酯性片段，改善化合物的理化性质，以进一步提高阿维菌素 B2a的杀虫活性。伊维菌素与阿维菌素作用的靶标均为谷氨酸门控氯离子通道，而 Hibbs 等19研究了伊维菌素的 C5 位与 C7 位羟基对化合物与受体蛋白的结合发挥了重要的作用。其次，C23 位羟基位于螺醇OOHHOOOOOHOOOOHOHHHOHOHHOOHHOOOOOHOOOOHOHHHOHOHHOH阿维菌素 B2a阿维菌素 B1a4423avermectin B1aavermectin B2a图式 1 阿维菌素 B1a与 B2a的化学结构Scheme 1 Chemical structures of avermectin B1a and B2a1032农药学学报Vol.25缩酮中，受环张力的影响，该处空间自由度较低，而 C4羟基则可以通过糖苷键进行旋转，为活性片段与受体蛋白形成相互作用提供了更多的可能性。从阿维菌素 B1a衍生物的研发经验中可以看出20-23，在 C4位引入含氮官能团(如：甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、乙酰氨基阿维菌素等)通常会提高阿维菌素 B1a系列化合物的活性，而氨基甲酸酯作为一种农药常见的含氮官能团(如：丁硫克百威(化学结构见图式 2)等)，在引入氮原子的同时，还可以改善化合物的亲脂性。因此，本研究采用活性亚结构拼接策略24-25，在阿维菌素B2a的 C4位引入芳香族氨基甲酸酯基团，从而达到利用阿维菌素 B2a开发更加绿色、高效的新农药的目的。目标分子的设计思路见图式 2，目标化合物的合成路线见图式 3。1 实验部分 1.1 仪器与试剂BrukerAvance400MHz型核磁共振仪(以CDCl3为溶剂，TMS为内标，Bruker)；X-6显微熔点测试仪(河南予华仪器厂，温度未校正)；Varian7.0TFTMS傅里叶变换高分辨质谱仪(Varian)；PE-2000旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-D()循环水式真空泵(河南佰年仪器有限责任公司)。柱层层析硅胶(筛孔径 75150m，100200目，青岛海洋化工分厂)；GF254薄层层析硅胶(青岛海洋化工有限公司)；所用试剂及原料均为市售分析纯。1.2 目标化合物的合成1.2.1化合物 2 的合成将阿维菌素 B2a(20.00g,22.46mmol)与干燥的二氯甲烷(200mL)置于 500mL四口瓶中，降温至15。加入四甲基乙二胺(10.00g,86.05mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液，搅拌 5min。控温在15，缓慢滴加氯甲酸烯丙酯(4.06g,33.69mmol)，在15 温度下反应 1h。用薄层色谱(TLC，V(石油醚):V(乙酸乙酯)=1:1）监测反应至无原料点。加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)淬灭反应。用 3100mL 的二氯甲烷萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，过滤，最后减压浓缩脱除溶剂得到 27.61g 粗产物。柱层析(V(石油醚):V(乙酸乙酯)=2:1)分离，最终得到19.52g 白色固体，产率为 89%，熔点为 154156。1.2.2中间体 Y1Y21 的合成以化合物 Y1 的合成为例：将化合物 2(1.00g,1.12mmol)加入 100mL单口瓶中，加入四氢呋喃(10mL)，搅拌溶解，依次加入 4-二甲氨基吡啶(DMAP)(0.27g，2.24mmol)和对氯苯异氰酸酯(0.34g，2.24mmol)，常温下反应 8h，TLC(V(石油醚):V(乙酸乙酯)=2:1)监OOONSNcarbosulfan丁硫克百威OOHHNOOOOHOOOOHOHHHOHOHHHO4OOHOOOOOHOOOOHOHHHOHOHH4OHHNOR活性亚结构拼接甲维盐emamectin benzoateActive substructure splices图式 2 目标分子的设计思路Scheme 2 Design ideas for target moleculesNo.5张宇等:含氨基甲酸酯结构的阿维菌素 B2a衍生物的合成、杀虫活性及分子对接1033测至反应完成。加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭反应，再用 315mL 的二氯甲烷萃取。合并有机相，用无水硫酸镁干燥，最后减压浓缩脱除溶剂得到 0.86g 粗产物(Y1)。该产物未经纯化直接用于下一步反应。用类似的方法合成中间体 Y2Y21。1.2.3目标化合物 Z1Z21 的合成以化合物Z1 的合成为例：将中间体 Y1 溶于 20mLV(醋酸异丙酯):V(乙醇)=7:3 的混合溶剂中，常温下加入四(三苯基膦)钯(0.01g，0.01mmol)，搅拌溶解。缓慢加入 NaBH4(0.07g，2.24mmol)，反应20min。用 TLC(V(石油醚):V(乙酸乙酯)=1:1)监测反应至无原料点。加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭反应，再用 315mL 的二氯甲烷萃取。合并有机相，用无水硫酸镁进行干燥，最后减压浓缩脱除溶剂得到 0.86g 粗产物。经柱层析(V(石油醚):V(乙酸乙酯)=2:1)分离，得到 0.62g白色固体，产率为 53%。熔点为 152154。用类似的方法合成目标化合物 Z2Z21。1.3 生物活性测试供试害虫：小菜蛾 Plutella xylostella、玉米螟虫 Ostrinia furnacalis、草地贪夜蛾 Spodopterafrugiperda、黏虫 Mythimna separata 和棉铃虫Helicoverpa armigera，由南开大学农药国家工程研究中心提供。采用杀虫剂抗性行动委员会(IRAC)提出的浸叶法测定26。用玉米叶片剪为 5cm 叶段，浸渍药液 10s，自然晾干后置于玻璃培养皿(直径 75mm)中。选取发育整齐的 3龄幼虫接入处理后的叶片，以丙酮溶剂为对照。每次处理幼虫10头，重复 3次。处理后 72h 检查害虫存活状态，以毛刷轻触幼虫体表，无反应判定为死亡，记录死亡数、存活数。P1P2分别按公式(1)和(2)计算死亡率()和校正死亡率()。OOHHOOOOOHOOOOHOHHHOHOHHOHOOHHOOOOOHOOOOHOHHOHOHHOHClCOOCH2CH=CH2,OOOOHOOOOOHOOOOHOHHOHOHHOHOOOHNROOHOOOOOHOOOOHOHHHOHOHHOHOHNRPdP(C6H5)34,NaBH4,IPAC:EtOH=7:3,r.t.,20 min21Y1-Y21Z1-Z21R=Z1ClZ2ClZ3CF3CF3ClZ4Z7Z5Z6Z8Z9FZ10Z11Z12ClFOCH3Z13Z14Z15ClCNF3CClZ16Z17Z18FClZ19Z20Z21OCF3H3COTMEDA/DCM,15,1 hRNCO,THF,DMAP,r.t.,8 h图式 3 目标化合物 Z1Z21 的合成路线Scheme 3 Synthetic routes of target compounds Z1-Z211034农药学学报Vol.25P1/%=KN100(1)P2/%=P1P01P0100(2)NP0式中：K 为死亡虫数；为处理总虫数；为空白对照组的死亡率，%。1.4 分子对接Hibbs19报道了阿维菌素的衍生物伊维菌素与秀丽隐杆线虫的谷氨酸门控氯离子通道结合的单晶结构(PDBID:3RHW)，并对其变构激活和调节的机制进行了详细的研究。但是，玉米螟虫的谷氨酸门控氯离子通道缺乏晶体结构。因此，使用Schrdinger2021 的 homologymodeling 模块的Multipletemplates 方法以 3RHW 为同源建模所用模板蛋白，在NCBI数据库中获取了玉米螟虫谷氨酸门控氯离子通道的蛋白序列进行同源建模，构建保留伊维菌素配体的同源五聚体模型。预测所需受体蛋白的三维结构发现，二者之间的蛋白序列同源性为 35.51%。随后，使用 pymol4.6软件保留其中的两条相连的单链以及其中的伊维菌素配体作为模型蛋白；使用 Schrdinger2021 的ProteinPreparationWizard 模块对模型蛋白进行补全不完整残基、结构和能量优化等操作；使用LigPrep 模块对配体进行进行加氢、加电荷(赋以OPLS-2005 立场)等操作；利用 ReceptorGridGeneration 模块以伊维菌素所在位置为中心构建分子对接所需的受体口袋；使用 Liganddocking 模块对受体蛋白和配体进行对接；最后使用 PrimeMM-GBSA 模块计算配体-受体复合物的结合能。2 结果与讨论 2.1 目标化合物的理化性质与结构表征根据上述合成方法，合成了 1 个中间体 2 和21 个含氨基甲酸酯结构的阿维菌素 B2a衍生物（Z1Z21)，其结构表征数据如下。化合物 2(5-烯丙氧基甲酰氧基-阿维菌素 B2a)：白色固体，收率 89%，熔点为 154156。1HNMR(400MHz,CDCl3)5.95(ddt,J=16.2,10.6,5.7Hz,1H),5.84(d,J=10.3Hz,1H),5.795.67(m,2H),5.57(s,1H),5.415.25(m,5H),4.98(t,J=7.3Hz,1H),4.76(d,J=3.3Hz,1H),4.714.58(m,4H),4.12(d,J=6.1Hz,1H),3.95(s,1H),3.873.73(m,4H),3.663.55(m,2H),3.48(dd,J=10.0,5.6Hz,1H),3.463.37(m,6H),3.37(d,J=2.3Hz,1H),3.24(t,J=9.0Hz,1H),3.17(t,J=9.1Hz,1H),2.572.47(m,1H),2.382.30(m,3H),2.22(dd,J=13.1,4.3Hz,1H),2.041.93(m,2H),1.851.74(m,4H),1.691.47(m,10H),1.461.40(m,1H),1.281.26(m,6H),1.17(d,J=6.9Hz,3H),0.97(t,J=7.2Hz,3H),0.91(d,J=6.9Hz,3H),0.88(d,J=6.5Hz,3H),0.84(d,J=11.8Hz,1H).13CNMR(151MHz,CDCl3)173.2,154.8,139.3,138.0,135.7,133.0,131.5,124.8,121.5,120.4,118.7,117.5,99.6,98.5,94.8,81.6,80.9,80.4,79.3,78.2,77.5,76.0,73.5,70.8,69.9,68.8,68.4,68.3,68.1,67.8,67.3,56.5,56.5,45.7,41.1,40.7,39.7,36.4,35.7,35.1,34.5,34.2,34.1,27.3,20.2,19.6,18.4,17.7,15.1,13.8,12.5,11.8.化合物 Z1(4-(4-氯苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素B2a)：白色固体，收率 53%，熔点为 152154。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.37(d,J=8.8Hz,2H),7.28(d,J=3.7Hz,2H),6.70(s,1H),5.935.82(m,1H),5.805.71(m,2H),5.43(s,2H),5.405.31(m,1H),4.99(t,J=7.3Hz,1H),4.77(d,J=3.4Hz,1H),4.724.66(m,2H),4.62(t,J=9.4Hz,1H),4.30(d,J=6.0Hz,1H),3.993.95(m,2H),3.923.83(m,2H),3.823.74(m,2H),3.693.61(m,2H),3.58(d,J=11.3Hz,1H),3.44(s,3H),3.39(s,3H),3.30(dd,J=4.4,2.1Hz,1H),3.26(t,J=9.0Hz,1H),2.602.49(m,1H),2.382.30(m,3H),2.24(dd,J=12.8,4.6Hz,1H),2.041.95(m,2H),1.88(s,3H),1.821.75(m,1H),1.711.45(m,10H),1.42(d,J=11.7Hz,1H),1.281.26(m,3H),1.23(d,J=6.3Hz,3H),1.18(d,J=6.9Hz,3H),0.97(t,J=7.2Hz,3H),0.92(d,J=6.8Hz,3H),0.88(d,J=6.4Hz,3H),0.860.82(m,1H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.5,152.7,139.7,137.8,136.5,135.6,128.9,128.3,124.8,120.3,119.8,117.9,117.5,99.6,98.2,94.9,81.8,80.4,80.4,79.2,75.6,70.8,69.9,68.2,67.6,67.6,67.1,66.60,60.5,56.7,56.5,45.6,41.2,40.7,39.7,36.4,35.7,35.1,34.9,34.5,34.2,27.3,20.2,20.0,18.4,17.5,15.2,14.2,13.8,12.5,11.8.HRMS(MALDI):C56H77ClF3NO16NaM+Na+,测量值 1066.4907,计算值1066.4906.化合物 Z2(4-(3-氯苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素B2a)：白色固体，收率 42%，熔点为 154156。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.29(s,1H),7.247.14(m,2H),7.20(s,1H),7.17(d,J=10.5Hz,1H),6.75(s,1H),5.87(d,J=9.5Hz,1H),5.815.66(m,2H),5.465.38(m,2H),5.385.27(m,1H),4.99(t,J=7.0Hz,1H),4.78(d,J=3.0Hz,1H),4.754.63(m,2H),4.624.55(m,1H),4.31(d,J=5.9Hz,1H),4.043.92(m,2H),3.913.80(m,2H),3.803.70(m,2H),3.683.54(m,3H),3.453.41(m,6H),3.343.14(m,2H),2.572.51(m,1H),2.402.26(m,3H),2.23(dd,J=12.8,4.6Hz,1H),2.051.96(m,2H),1.89(s,3H),1.79(d,J=8.7Hz,1H),1.731.47(m,11H),1.301.26(m,6H),1.18(d,J=6.8Hz,3H),0.98(t,J=7.2Hz,3H),0.930.83(m,7H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.6,139.6,138.0,135.7,No.5张宇等:含氨基甲酸酯结构的阿维菌素 B2a衍生物的合成、杀虫活性及分子对接1035129.0,128.2,125.3,124.7,120.4,118.0,117.5,99.7,98.5,94.8,81.7,80.4,79.4,79.2,78.2,77.3,76.1,70.8,69.9,68.4,68.3,68.1,67.7,67.6,67.3,56.5,56.4,45.7,41.2,40.7,39.8,36.5,35.7,35.1,34.5,34.2,27.3,20.2,20.0,18.4,17.7,15.2,13.8,12.5,11.8.HRMS(MALDI):C55H78ClNNaO16M+Na+,计算值1066.4907,测量值1066.4906.化合物 Z3(4-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素 B2a)：白色固体，收率 33%，熔点为 153155。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.77(d,J=1.5Hz,1H),7.62(d,J=8.0Hz,1H),7.44(d,J=8.7Hz,1H),7.136.93(m,1H),5.935.82(m,1H),5.805.70(m,2H),5.505.40(m,2H),5.395.31(m,1H),5.00(t,J=7.2Hz,1H),4.78(d,J=3.8Hz,1H),4.764.67(m,2H),4.674.58(m,1H),4.31(d,J=6.2Hz,1H),4.06(s,1H),4.003.94(m,2H),3.943.83(m,2H),3.833.73(m,2H),3.713.62(m,2H),3.59(d,J=10.6Hz,1H),3.45(s,3H),3.39(s,3H),3.353.30(m,1H),3.27(t,J=9.1Hz,1H),2.55(s,1H),2.422.30(m,3H),2.25(dd,J=13.1,4.9Hz,1H),2.051.97(m,2H),1.89(s,3H),1.821.77(m,1H),1.751.48(m,10H),1.44(t,J=12.1Hz,1H),1.281.26(m,3H),1.24(d,J=6.2Hz,3H),1.19(d,J=6.9Hz,3H),0.98(t,J=7.2Hz,3H),0.92(d,J=6.8Hz,3H),0.89(d,J=6.4Hz,3H),0.860.82(m,1H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.5,152.8,139.7,137.8,137.2,135.7,131.9,124.8,122.6(q,J=273.2Hz),122.5,120.3,118.0,117.6,99.7,98.2,95.0,81.9,80.5,80.4,79.3,79.2,75.6,70.8,69.9,68.3,67.6767.6,67.1,66.5,60.5,56.5,56.4,53.5,45.7,41.1,40.7,39.7,36.4,35.7,35.1,34.9,34.5,34.1,27.3,20.2,19.9,18.4,17.4,15.1,13.8,12.4,11.8.HRMS(MALDI):C56H77ClF3NNaO16M+Na+,测量值1134.4770,计算值1134.4781.化合物 Z4(4-(4-氟甲基苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素 B2a)：白色固体，收率 45%，熔点为 156158。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.417.32(m,2H),7.046.94(m,2H),6.72(d,J=7.3Hz,1H),5.915.80(m,1H),5.795.70(m,2H),5.465.19(m,3H),5.074.92(m,1H),4.77(d,J=3.9Hz,1H),4.754.52(m,3H),4.384.26(m,1H),4.05(s,1H),4.003.93(m,2H),3.923.81(m,2H),3.75(d,J=16.6Hz,2H),3.703.61(m,2H),3.57(d,J=9.9Hz,1H),3.45(d,J=5.2Hz,3H),3.39(s,3H),3.333.18(m,2H),2.602.49(m,1H),2.402.27(m,3H),2.272.20(m,1H),2.061.95(m,2H),1.88(s,3H),1.78(d,J=9.0Hz,1H),1.701.46(m,10H),1.431.36(m,1H),1.26(d,J=6.3Hz,3H),1.23(d,J=6.3Hz,3H),1.18(d,J=7.0Hz,3H),0.97(t,J=7.2Hz,3H),0.91(d,J=6.7Hz,3H),0.88(d,J=6.4Hz,3H),0.84(d,J=11.7Hz,1H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.8,159.2(d,J=243.6Hz),153.1,140.0,138.3,138.1,135.8,134.0,125.0,120.6,118.1,117.8,115.8(d,J=22.5Hz),99.8,98.4,95.1,82.0,80.7,80.6,79.4,79.3,77.4,75.8,71.0,70.0,68.6,68.5,67.9,67.8,67.4,66.8,56.9,56.7,45.9,41.4,40.9,39.9,36.7,35.9,35.3,35.1,34.7,34.3,27.5,20.4,20.1,18.5,17.6,15.3,13.9,12.6,12.0.HRMS(MALDI):C55H78FNNaO16M+Na+,测量值1050.5210,计算值1050.5202.化合物 Z5(4-(3-甲基苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素B2a)：白色固体，收率 47%，熔点为 157159。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.28(d,J=12.6Hz,1H),7.16(d,J=6.5Hz,2H),6.86(d,J=6.4Hz,1H),6.71(s,1H),5.85(d,J=8.3Hz,1H),5.785.66(m,2H),5.41(s,2H),5.365.24(m,1H),4.97(t,J=7.0Hz,1H),4.76(d,J=3.2Hz,1H),4.724.56(m,3H),4.28(d,J=5.5Hz,1H),4.04(s,1H),3.993.91(m,2H),3.903.79(m,2H),3.803.69(m,2H),3.693.58(m,2H),3.56(d,J=10.4Hz,1H),3.43(s,3H),3.38(s,3H),3.303.18(m,2H),2.52(s,1H),2.382.27(m,6H),2.22(dd,J=12.8,4.6Hz,1H),2.021.94(m,2H),1.86(s,3H),1.77(d,J=10.6Hz,1H),1.701.36(m,11H),1.25(d,J=6.9Hz,3H),1.21(d,J=6.3Hz,3H),1.17(d,J=6.9Hz,3H),0.96(t,J=7.2Hz,3H),0.920.78(m,7H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.6,152.8,139.7,139.0,138.0,138.0,137.8,135.7,128.9,124.8,124.3,120.4,118.0,117.6,99.7,98.3,94.9,81.8,80.4,79.3,79.2,75.7,70.8,69.9,68.4,68.3,67.7,67.6,67.22,66.7,60.4,56.8,56.5,45.7,41.2,40.8,39.8,36.5,35.7,35.1,35.0,34.5,34.2,27.3,21.5,21.1,20.3,20.0,18.4,17.5,15.2,14.2,13.8,12.5,11.8.HRMS(MALDI):C56H81NNaO16M+Na+,测量值1046.5439,计算值1046.5453.化合物 Z6(4-(2-甲基苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素B2a)：白色固体，收率 43%，熔点为 152155。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.86(s,1H),7.21(t,J=7.7Hz,1H),7.16(d,J=7.3Hz,1H),7.03(t,J=7.3Hz,1H),6.42(s,1H),5.915.81(m,1H),5.805.67(m,2H),5.485.39(m,2H),5.365.26(m,1H),4.98(t,J=7.5Hz,1H),4.77(d,J=3.2Hz,1H),4.734.59(m,3H),4.30(d,J=6.1Hz,1H),4.013.92(m,2H),3.913.81(m,2H),3.803.71(m,2H),3.713.59(m,2H),3.57(d,J=10.0Hz,1H),3.44(s,3H),3.41(s,3H),3.313.22(m,2H),2.592.45(m,1H),2.402.18(m,8H),2.021.93(m,2H),1.88(s,3H),1.811.74(m,1H),1.701.45(m,10H),1.441.36(m,1H),1.27(d,J=6.4Hz,3H),1.24(d,J=6.3Hz,3H),1.17(d,J=6.9Hz,3H),0.97(t,J=7.2Hz,3H),0.91(d,J=6.9Hz,3H),0.88(d,J=6.5Hz,3H),0.850.81(m,1H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.5,139.8,138.0,137.9,135.8,135.7,130.4,126.9,124.8,120.4,118.0,117.6,99.7,98.4,95.0,81.8,80.7,80.4,79.3,77.3,75.7,70.8,69.9,68.4,68.3,67.7,67.6,67.2,66.7,56.8,56.6,45.7,41.2,40.8,39.8,36.5,35.7,35.1,35.1,34.5,34.2,27.3,1036农药学学报Vol.2520.3,20.0,18.4,17.7,17.5,15.2,13.8,12.5,11.8.HRMS(MALDI):C56H81NNaO16M+Na+,测量值1046.5440,计算值1046.5453.化合物 Z7(4-(4-三氟甲基苯基)-氨基甲酰氧基阿维菌素 B2a)：白色固体，收率 33%，熔点为 151153。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.617.55(m,4H),6.88(s,1H),5.89(d,J=10.6Hz,1H),5.805.74(m,2H),5.46(d,J=4.4Hz,2H),5.37(dd,J=10.5,5.7Hz,1H),5.01(t,J=7.4Hz,1H),4.80(d,J=3.4Hz,1H),4.744.62(m,3H),4.33(d,J=6.3Hz,1H),4.023.96(m,2H),3.953.84(m,2H),3.80(s,2H),3.733.63(m,2H),3.60(d,J=10.8Hz,1H),3.47(s,3H),3.42(d,J=4.0Hz,3H),3.32(d,J=2.3Hz,1H),3.28(t,J=9.0Hz,1H),2.622.52(m,1H),2.442.32(m,3H),2.26(dd,J=12.8,4.8Hz,1H),2.051.98(m,2H),1.91(s,3H),1.80(d,J=11.4Hz,1H),1.731.42(m,11H),1.301.28(m,3H),1.26(d,J=7.1Hz,3H),1.21(d,J=6.9Hz,3H),0.99(t,J=7.2Hz,3H),0.94(d,J=6.8Hz,3H),0.90(d,J=6.4Hz,3H),0.87(d,J=11.8Hz,1H).13CNMR(101MHz,CDCl3)173.5,152.6,141.2,139.7,137.9,137.9,135.7,126.3,126.2,124.8,124.2(q,J=260.2Hz),120.3,118.1,118.0,117.6,99.7,98.2,94.9,81.8,80.5,80.4,79.2,75.6,70.8,69.9,68.3,68.3,67.7,67.6,67.2,66.5,60.5,56.6,56.5,45.7,41.1,40.7,39.7,36.4,35.7,35.1,34.9,34.5,34.2,27.3,20.2,20.0,18.4,17.5,15.1,14.2,13.8,12.5,11.8.HRMS(MALDI):C56H78F3NNaO16M+Na+,测量值1100.5157,计算值1100.5170.化合物 Z8(4-(1-萘基)-氨基甲酰氧基阿维菌素 B2a)：白色固体，收率 39%，熔点为 158160。1HNMR(400MHz,CDCl3)7.97(d,J=8.0Hz,1H),7.927.87(m,2H),7.68(t,J=8.3Hz,1H),7.577.50(m,3H),7.05(s,1H),5.89(d,J=10.4Hz,1H),5.835.72(m,2H),5.45(s,2H),5.415.31(m,1H),5.01(t,J=6.5Hz,1H),4.80(d,J=3.3Hz,1H),4.764.65(m,3H),4.32(d,J=5.7Hz,1H),4.033.97(m,