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选修一 第一部分 微生物的利用
第1课时 大肠杆菌的培养和分离
1.判断正误
(1)大肠杆菌是革兰氏阴性菌,对人无害。
(×)
(2)扩大培养大肠杆菌常用LB液体培养基。
(√)
(3)利用涂布分离法分离细菌时,需要先将培养的菌液进行梯度稀释。
(√)
(4)在“大肠杆菌的培养和分离”所用棉花为脱脂棉。
(×)
2.有关划线分离操作正确的是
( )
A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌
B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞
C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可
D.最后将平板倒置,放入培养箱中培养
解析 考查划线分离操作。平板划线操作时要时刻注意两个问题:一是防止杂菌污染;二是要尽可能地将菌种分离。
答案 D
3.固体培养基经高压蒸汽灭菌后,待培养基冷却到60 ℃时,需搁置斜面(图甲)或倒平板(图乙),请回答:
(1)如何确定制备的培养基灭菌是否合格?___________________________________________________________________________________________________________________________________。
(2)在固体培养基凝固前搁置斜面的目的是什么?____________________________________________________________。
(3)平板冷凝后,为什么要将平板倒置?__________________________________________________________________
_________________________________________________________________。
答案 (1)将未接种的培养基在适宜的温度下放置一定时间,观察培养基上是否有菌产生。 (2)增大接种面积 (3)平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
4.下表是用于分离纯化大肠杆菌的LB固体培养基的配方。请回答:
试剂
用量
蛋白胨
0.5 g
酵母提取物
0.25 g
氯化钠
0.5 g
水
50 mL
琼脂
1 g
(1)上述培养基配方中充当氮源的成分主要是________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行________处理。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是________和________两种。在接种过程中,接种环或玻璃刮刀的灭菌方法是_________________________________________________________________。
(3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片,可能的原因是什么?
_________________________________________________________________。
答案 (1)蛋白胨 灭菌
(2)划线分离法 涂布分离法 明火灼烧
(3)菌液浓度过高;培养过程中被杂菌污染;利用接种环划线时,划下一个区域前没有对接种环进行灭菌处理
5.为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:
(1)该小组采用涂布分离法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是_____________________;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布分离法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。
(2)该小组采用划线分离法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________________________。
(3)示意图A和B中,________表示的是用涂布分离法接种培养后得到的结果。
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________的利用率。
解析 (1)为了检测培养基平板灭菌是否合格,可在涂布接种前,随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1 mL稀释液中平均有(39+38+37)/3=38个活菌,则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1=380,则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100=3.8×104,则每升水样中活菌数目为3.8×104×1 000=3.8×107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃料层灼烧,以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图A和图B可以看出:A培养基中细菌的分布呈线性,是用划线分离法接种培养后得到的结果;B培养基中细菌均匀分布,是用涂布分离法接种培养后得到的结果 。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量,还可以使菌体与培养液充分接触,提高了营养物质的利用率,因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。
答案 (1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质
沁园春·雪 <毛泽东>
北国风光,千里冰封,万里雪飘。
望长城内外,惟余莽莽;
大河上下,顿失滔滔。
山舞银蛇,原驰蜡象,
欲与天公试比高。
须晴日,看红装素裹,分外妖娆。
江山如此多娇,引无数英雄竞折腰。
惜秦皇汉武,略输文采;
唐宗宋祖,稍逊风骚。
一代天骄,成吉思汗,
只识弯弓射大雕。
俱往矣,数风流人物,还看今朝。
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