第二章病毒的基本特征.ppt

第二章第二章 病毒的基本特征病毒的基本特征第一节第一节 病毒概述病毒概述第二节第二节 病毒的形态结构与理化性状病毒的形态结构与理化性状第三节第三节 病毒培养和增殖病毒培养和增殖第四节第四节 病毒的遗传与变异病毒的遗传与变异第五节第五节 理化因素对病毒的影响理化因素对病毒的影响第六节第六节 病毒的感染病毒的感染第七节第七节 病毒的分类病毒的分类第八节第八节 病毒病的实验室诊断病毒病的实验室诊断 .一、病毒的含义一、病毒的含义 病毒是一类比较原始的、有生命特征的、能够自我复制和严格细胞内寄生的非细胞微生物。.病毒与其它生物的比较病毒与其它生物的比较.二、病毒区别与其他微生物的特征二、病毒区别与其他微生物的特征个体极其微小个体极其微小无细胞结构无细胞结构只含一种核酸只含一种核酸缺乏独立代谢能力缺乏独立代谢能力繁殖方式为依靠自身核酸复制繁殖方式为依靠自身核酸复制大多对抗生素不敏感，而对干扰素敏感大多对抗生素不敏感，而对干扰素敏感某些病毒可整合到宿主某些病毒可整合到宿主DNADNA上，引起潜伏感染上，引起潜伏感染某些病毒能够形成包涵体或引起细胞病变某些病毒能够形成包涵体或引起细胞病变.公元前14世纪古埃及长老石刻象显示了小儿麻痹后遗症，这可能是病毒感染的第一个史载记录。三、病毒学的发展.Smallpox(天花天花)Endemic in China by 1000BCRabies(狂犬病狂犬病)Endemic in Europe by AD 16-17.关于植物病毒病害的记载关于植物病毒病害的记载 荷兰郁金香杂色病荷兰郁金香杂色病(1576).牛痘接种防治天花牛痘接种防治天花-古代接种术古代接种术(1796)1.对病毒的早期认识对病毒的早期认识-利用疫苗对病毒病的防治利用疫苗对病毒病的防治.发明了狂犬病疫苗（发明了狂犬病疫苗（18851885）提出了提出了“VirusVirus”和和“VaccinationVaccination”之词之词巴斯德巴斯德(Louis Pasteur,1822-1895)Martinus Beijerinick(1851-1931)证明在经过可吸附细菌的琼脂扩证明在经过可吸附细菌的琼脂扩散后散后,这种侵染物仍可导致烟草花叶这种侵染物仍可导致烟草花叶病。他将此侵染物称为病。他将此侵染物称为“侵染性活液侵染性活液”,”,并也采用了并也采用了“Virus”“Virus”一词。一词。.John Enders(1897-1985)1949年年在体外培养的细胞中获得脊髓灰质在体外培养的细胞中获得脊髓灰质炎病毒炎病毒,1954年获得诺贝尔奖。年获得诺贝尔奖。Aaron Klug(1926-)1962年年提出了烟草花叶病毒病毒的柱状结提出了烟草花叶病毒病毒的柱状结构构,1982年获得诺贝尔奖。年获得诺贝尔奖。David Baltimore(1938-)1970年年在提纯的罗斯肉瘤病毒粒子中发现在提纯的罗斯肉瘤病毒粒子中发现了逆转录酶，证明遗传信息可以由了逆转录酶，证明遗传信息可以由RNA反反向产生向产生DNA。1975年获得诺贝尔奖。年获得诺贝尔奖。2.现代病毒学的发展历程现代病毒学的发展历程.Michael J.Bishop(1936-）1976年年发现正常细胞中存在罗斯肉瘤病毒发现正常细胞中存在罗斯肉瘤病毒致瘤基因的对应基因致瘤基因的对应基因,1989年获诺贝尔奖。年获诺贝尔奖。Phillip A.Sharp(1944-),1977年年发现腺病毒基因组中存在基因剪切发现腺病毒基因组中存在基因剪切现象现象(gene splicing),1993年获诺贝尔奖。年获诺贝尔奖。Fred Sanger(1918-)1977年年建立了建立了DNA序列分析方法序列分析方法,并对并对X174噬菌体的单链噬菌体的单链DNA序列进行了测定。序列进行了测定。因此获得诺贝尔奖。因此获得诺贝尔奖。.Gallo&Montagnier 1983年年分离到一种与爱滋病有关的逆转录病毒。分离到一种与爱滋病有关的逆转录病毒。R.Beachy 1986年年利用烟草花叶病毒外壳蛋白基因转化植物利用烟草花叶病毒外壳蛋白基因转化植物,获得抗获得抗TMV侵染的基因工程植株。这一研究为抗病侵染的基因工程植株。这一研究为抗病毒动植物基因工程奠定了基础。毒动植物基因工程奠定了基础。Stanley B Prusiner(1942-)发现发现朊病毒朊病毒(Prions)，1997年获年获诺贝尔奖。诺贝尔奖。.四、研究病毒的意义几乎能感染所有的细胞型生物，危害严重；了解病毒的特性，为疫苗的研制打下良好基础。.一、病毒的大小与形态测量病毒的单位为测量病毒的单位为nm，大小在，大小在20-300nm之间。之间。病毒形态多数呈球状或近似球状，少数为杆状、病毒形态多数呈球状或近似球状，少数为杆状、丝状或子弹状，痘病毒呈砖块状，噬菌体大多丝状或子弹状，痘病毒呈砖块状，噬菌体大多数呈蝌蚪状。数呈蝌蚪状。第第 二二 节节病毒的形态结构与性状病毒的形态结构与性状.病病毒毒子子（Virion)：结构完整、功能齐全的病毒颗粒。（一）病毒的结构组成 核酸基因组和衣壳(capsid)。囊膜囊膜(envelope)(envelope):围绕核衣壳的一层包膜。纤纤突突(spike)(spike):包膜突起，主要由糖蛋白组成。二、病毒的结构组成与特征.病毒体结构模式病毒体结构模式纤突包膜核心衣壳壳粒核衣壳.二、病毒的衣壳类型二、病毒的衣壳类型1、螺旋对称的病毒壳体、螺旋对称的病毒壳体2、二十面体对称的病毒壳体、二十面体对称的病毒壳体3 3、复合对称的病毒壳体、复合对称的病毒壳体.螺旋对称型廿面体对称型复合对称型.三、病毒的化学组成1、核酸核酸 1）种类：种类：DNA、RNA 存在形式：单链与双链；正链与负链，分节存在形式：单链与双链；正链与负链，分节 作用：携带全部遗传信息作用：携带全部遗传信息 特点：有内含子、特点：有内含子、ORF可重叠可重叠2）表示病毒核酸大小的方法 相对分子质量；碱基数3）病毒核酸的结构特征 分段基因组；帽子和poly(A）尾巴结构；感染性核酸等。.结构蛋白结构蛋白非结构蛋白非结构蛋白 功能：功能：保护核酸；保护核酸；与易感宿主细胞受体结合；与易感宿主细胞受体结合；良好的抗原，可激发机体发生免疫应答。良好的抗原，可激发机体发生免疫应答。2、蛋白质、蛋白质.3.脂质 病毒体的脂质主要存在于囊膜中，主要来源于宿主细胞膜系统。含脂质的病毒对乙醚或其它有机溶剂敏感，处理后可使病毒失去感染性或感染性降低，而无囊膜病毒对乙醚有抵抗力。.4.糖类病毒囊膜含有糖蛋白，由病毒的基因组编码，但糖分子与宿主细胞有关。与宿主细胞表面受体结合（吸附）、刺激机体产生中和抗体。.一、病毒培养的宿主系统一、病毒培养的宿主系统 1、动物第三节第三节 病毒的培养和增殖病毒的培养和增殖动物接种途径和方法动物接种途径和方法1.皮内接种皮内接种2.皮下接种皮下接种3.肌肉接种肌肉接种4.静脉接种静脉接种5.腹腔接种腹腔接种.2、鸡胚接种、鸡胚接种.不同病毒的接种途径不同病毒的接种途径痘病毒和疱疹病毒，痘病毒和疱疹病毒，1013日龄日龄 流感、新城疫、传支等，流感、新城疫、传支等，911日龄日龄 鹦鹉热衣原体和立克鹦鹉热衣原体和立克次氏体等，次氏体等，68日龄日龄正黏病毒和副黏病毒，正黏病毒和副黏病毒，1011日龄日龄.病毒的收获病毒的收获 绒毛尿囊膜接种绒毛尿囊膜接种 尿囊膜接种尿囊膜接种卵黄囊接种卵黄囊接种羊膜腔接种羊膜腔接种.收获尿囊液收获尿囊液.3、细胞培养1）细胞培养增殖病毒的优点）细胞培养增殖病毒的优点生理特性一致，培养条件易于控制；无个体差异，对病毒易感性相等；可观察病毒的繁殖特征；可进行病毒纯化和定量；可提高病毒的产量。.2）常用的培养细胞）常用的培养细胞原代细胞：原代细胞：直接利用新鲜动物组织经胰酶消化、直接利用新鲜动物组织经胰酶消化、分散，获得单个细胞，如分散，获得单个细胞，如CEFCEF。二倍体细胞：二倍体细胞：将长成单层的原代细胞消化分散成将长成单层的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代，其染色体数与原代细单个细胞，继续培养传代，其染色体数与原代细胞一样，保持其二倍染色体数目的单型细胞。胞一样，保持其二倍染色体数目的单型细胞。传代细胞：传代细胞：能在体外持续增殖传代的细胞系，能在体外持续增殖传代的细胞系，大多数由癌细胞或二倍体细胞突变而成。大多数由癌细胞或二倍体细胞突变而成。如如HeLaHeLa细胞和细胞和BHK-21BHK-21等。等。.3 3）细胞培养方法）细胞培养方法单层细胞培养法：单层细胞培养法：用胰酶将剪碎的组织或传用胰酶将剪碎的组织或传代细胞分散成单个细胞，接种到培养瓶或培养代细胞分散成单个细胞，接种到培养瓶或培养板上，让细胞贴壁生长，静置培养或转瓶培养。板上，让细胞贴壁生长，静置培养或转瓶培养。悬浮细胞培养法：悬浮细胞培养法：通过振荡或转动装置使细通过振荡或转动装置使细胞始终分散悬浮于培养液内的培养方法。胞始终分散悬浮于培养液内的培养方法。微载体培养：微载体培养：通过搅拌悬浮在培养液内，使通过搅拌悬浮在培养液内，使微小细胞在载体表面繁殖成单层。兼有单层和微小细胞在载体表面繁殖成单层。兼有单层和悬浮细胞培养的优点。悬浮细胞培养的优点。.二、病毒在培养细胞中的增殖效应1.细细胞胞病病变变效效应应(cytopathic effect，CPE)：由由病病毒毒引引起起的的细细胞胞病病变变。常常见见的的细细胞胞形形态态学变化为细胞变圆、坏死、溶解或脱落。学变化为细胞变圆、坏死、溶解或脱落。.CPE正常细胞正常细胞病变细胞病变细胞.2、包涵体：某些病毒能使感染细胞形成某些病毒能使感染细胞形成在光镜下可见的小体，称为包涵体。在光镜下可见的小体，称为包涵体。.三、病毒的定量测定三、病毒的定量测定蚀斑法蚀斑法将将适适当当浓浓度度的的病病毒毒悬悬液液加加入入单单层层细细胞胞培培养养中中，当当病病毒毒吸吸附附细细胞胞后后，再再覆覆盖盖一一层层加加有有中中性性红红的的融融化化琼琼脂脂。病病毒毒在在细细胞胞内内复复制制后后产产生生局局限限性性病病灶，病变区不染色而显示为蚀斑灶，病变区不染色而显示为蚀斑(plaque)。蚀蚀斑斑是是由由一一个个感感染染性性病病毒毒体体复复制制形形成成的的，类类似似于细菌的菌落，称为蚀斑形成单位于细菌的菌落，称为蚀斑形成单位（PFU）。）。病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升中病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升中PFU的的数量数量来表示。来表示。.感感染染复复数数（moi):moi):以以起起始始病病毒毒感感染染的的每每个个细胞所需病毒颗粒数目（细胞所需病毒颗粒数目（PFU/cell)。病病毒毒的的一一步步生生长长曲曲线线:潜潜伏伏期期、裂裂解解期期、衰退期。衰退期。四、病毒的增殖过程四、病毒的增殖过程.从从病病毒毒进进入入宿宿主主细细胞胞开开始始，经经过过基基因因组组复复制制，最后释放出来，称为一个最后释放出来，称为一个复制周期复制周期。人人和和动动物物病病毒毒的的复复制制周周期期主主要要包包括括吸吸附附、穿穿入入脱壳、生物合成、组装成熟和释放脱壳、生物合成、组装成熟和释放五个连续五个连续 步骤。步骤。四、病毒的增殖过程四、病毒的增殖过程.一、吸附吸附吸附(adsorption)分两个阶段：分两个阶段：静静电电吸吸附附：病病毒毒体体与与细细胞胞接接触触，进进行行静静电电结合。非特异性、可逆。结合。非特异性、可逆。特特异异性性受受体体吸吸附附：病病毒毒体体表表面面位位点点与与宿宿主主细细胞胞膜膜上上相相应应的的受受体体结结合合。是是决决定定病病毒毒感感染的真正开始。染的真正开始。.病毒病毒病毒吸附蛋白病毒吸附蛋白病毒的细胞受体病毒的细胞受体腺病毒腺病毒五邻体五邻体柯萨奇腺病毒受柯萨奇腺病毒受体、整合素体、整合素IBVS蛋白蛋白唾液酸唾液酸A型流感病毒型流感病毒血凝素血凝素HA唾液酸唾液酸NDV血凝素神经氨酸血凝素神经氨酸酶酶HN唾液酸唾液酸FMDVVP1整合素、硫酸乙酰整合素、硫酸乙酰肝素肝素HIVgp120CD4、CCR5HBV外膜蛋白外膜蛋白多聚人血清蛋白、多聚人血清蛋白、IL-6RV糖蛋白糖蛋白G乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体.二、穿入脱壳1、以膜融合方式穿入脱壳 如副黏病毒、疱疹病毒等。2、在内吞小体脱壳 如AIV。3、在核膜脱壳 如腺病毒4、有的病毒表面位点与细胞受体结合后，由酶类协助病毒核酸进入宿主细胞内，如噬菌体。.Penetration of an Enveloped Virus by Fusion of Its Envelope with the Host Cell Membrane,.The entire virus is placed in an endocytic vesicle.Viral capsid proteins interact with the host cell membrane allowing viral nucleic acid to enter the host cell.Penetration of a Naked Virus by Endocytosis.Penetration of a Naked Virus by Endocytosis,step-3.the entire virus is placed in an endocytic vesicle.三、生物合成三、生物合成双股双股DNA病毒病毒单股单股DNA病毒病毒单正股单正股RNA病毒病毒单负股单负股RNA病毒病毒逆转录病毒逆转录病毒双股双股RNA病毒病毒.吸附穿入脱壳早期蛋白晚期蛋白装配DNA复制核酸游离成熟释放.五、组装与释放.Release of influenza virus.HIV budding from human lymph tissue(TEM x133,335).ATTACHMENTPENETRATIONPENETRATIONHOSTFUNCTIONSASSEMBLY(MATURATION)TranscriptionREPLICATIONRELEASEUNCOATINGUNCOATINGTranslationMULTIPLICATION.第四节 病毒的变异一、基因突变一、基因突变病毒基因组中核酸碱基顺序的变化。病毒基因组中核酸碱基顺序的变化。自然突变：自然突变：产生频率为产生频率为10-510-8；诱导突变：诱导突变：各种物理、化学诱变剂可提高各种物理、化学诱变剂可提高突变率。突变率。实际意义：实际意义：形成突变株。形成突变株。.1、缺损干扰突变株：、缺损干扰突变株：病毒基因不完整或发生病毒基因不完整或发生改变，自身不能复制，只有在亲本病毒存在改变，自身不能复制，只有在亲本病毒存在时才能增殖出完整的病毒子，并对亲本病毒时才能增殖出完整的病毒子，并对亲本病毒的复制具有干扰作用。的复制具有干扰作用。2、条件致死突变株：、条件致死突变株：指病毒突变后在特定条指病毒突变后在特定条件下能增殖，而在另一种条件下不能增殖的件下能增殖，而在另一种条件下不能增殖的病毒。病毒。如如TS突变株（突变株（脊髓灰质炎病毒减毒活疫苗）脊髓灰质炎病毒减毒活疫苗）。.3、宿主范围突变株、宿主范围突变株：病毒基因组的改变影响了其对宿病毒基因组的改变影响了其对宿主细胞的吸附或相互作用。主细胞的吸附或相互作用。例如狂犬病毒突变株适应在兔脑内增殖，由例如狂犬病毒突变株适应在兔脑内增殖，由“街毒街毒”变为变为“固定毒固定毒。4、耐药突变株：、耐药突变株：酶基因的突变降低了对药物的亲和力酶基因的突变降低了对药物的亲和力或作用。或作用。.二、基因重组当两种有亲缘关系的不同病毒感染同当两种有亲缘关系的不同病毒感染同一宿主细胞时，它们的遗传物质发生一宿主细胞时，它们的遗传物质发生交换，结果产生不同于亲代的可遗传交换，结果产生不同于亲代的可遗传的子代。的子代。.1.分子内重组：分子内重组：两种不同病毒核苷酸片段的两种不同病毒核苷酸片段的交换。交换。DNA病毒、病毒、RNA病毒、不同科病毒、病毒与病毒、不同科病毒、病毒与宿主细胞基因组之间均可发生分子内重组。宿主细胞基因组之间均可发生分子内重组。.2、基因重配、基因重配（reassortment）分节段分节段病毒基因组病毒基因组之间核苷酸片段的交换之间核苷酸片段的交换。.3 3、复活：复活：同一毒株的具不同程度致死性突变的若干病毒颗粒同时感染某一细胞而产生具有感染性病毒的现象。.活病毒与灭活病毒之间（交叉复活）活病毒与灭活病毒之间（交叉复活）A3株（流行株）株（流行株）新新A3抗原抗原鸡胚中增殖不良鸡胚中增殖不良A1株（非流行株）株（非流行株）旧旧A1抗原抗原鸡胚中生长良好鸡胚中生长良好鸡胚中共同培养鸡胚中共同培养重组体（理想疫苗）重组体（理想疫苗）有有A3抗原抗原鸡胚中生长良好鸡胚中生长良好UV灭活灭活.4、基因整合病毒基因组与宿主细胞基因组的重组过程。病毒基因组与宿主细胞基因组的重组过程。1、温和噬菌体的溶源性反应、温和噬菌体的溶源性反应2、动物病毒的整合感染、动物病毒的整合感染 实际意义：病毒基因变异、宿主细胞转化、实际意义：病毒基因变异、宿主细胞转化、肿瘤发生。肿瘤发生。.1、补偿作用：、补偿作用：一种病毒为另一种病毒提供本身不能一种病毒为另一种病毒提供本身不能合成，但又是必需的基因产物，使其在混合感染的合成，但又是必需的基因产物，使其在混合感染的细胞内得以繁殖。细胞内得以繁殖。主要表现为耐药性，抗原性等改变，基因并未改变，改变的主要表现为耐药性，抗原性等改变，基因并未改变，改变的生物学性状不能遗传。生物学性状不能遗传。1)辅助病毒与缺陷病毒之间辅助病毒与缺陷病毒之间 2)活病毒与死病毒之间活病毒与死病毒之间 3)两个不同的缺陷病毒之间两个不同的缺陷病毒之间三、病毒的非遗传性变异三、病毒的非遗传性变异.+2、表型混合：、表型混合：一种病毒的核酸被另一种病毒一种病毒的核酸被另一种病毒核酸所编码的蛋白衣壳包裹。核酸所编码的蛋白衣壳包裹。.virus Avirus Bphenotypemixing virus Avirus B.表型混合的子代病毒，遗传性未发生改变，但具有一些依赖于蛋白的表型特征；第二代的表型由病毒的基因组来决定。.四、病毒遗传变异的意义致病机制中的应用在病毒病诊断、预防和治疗中的应用在基因工程中的应用在基础理论研究中的应用.第五节 理化因素对病毒的影响一、物理因素1、干燥：病毒对干燥的抵抗力强。2、温度 高温：高温易将病毒杀死。低温：病毒对低温有较强的抵抗力。3、射线：电离辐射和非电离辐射均可使病毒灭活。4、PH：5-9稳定。.二、化学因素1、酸碱类消毒剂：病毒有效的杀灭剂；2、甲醛：灭活病毒；3、脂溶剂：区分病毒有无囊膜4、蛋白溶剂：提取核酸5、甘油：保护剂.第六节 病毒的感染持续性感染：病毒在宿主体内持续存在较长时间，甚至持续终生者。病毒在体内持续存在期间，机体可表现症状，也可不出现症状而成为危险的传染源，也可引起慢性进行性疾病。.持续性感染的类型持续性感染的类型潜伏感染：经急性或隐性感染后，病毒基因组存在于一定组织或细胞内，但并不能产生有感染性的病毒体。在某些条件下病毒被激活而急性发作，病毒仅在临床出现间歇性急性发作时才被检出。在非发作期，用一般常规法不能分离出病毒。例如，单纯疱疹病毒型感染.慢性感染：经显性或隐性感染后，病毒并未完全清除，可持续存在于血液或组织中并不断排出体外，病程长达数月至数十年。患者可表现轻微或无临床症状。如乙型肝炎病毒（HBV）、巨细胞病毒（CMV）等常形成慢性感染。.慢病毒感染：病毒感染后潜伏期很长可达数月、数年甚至数十年之久。此时机体无症状，也分离不出病毒。一旦发病出现慢性进行性疾病，最终常为致死性感染。如：AIDS、羊瘙痒病、人克雅病、库鲁病（Kuru）等。库鲁病是朊病毒感染机体后，经过长达数十年的潜伏期后，引起的一种进行性小脑退行性疾病。.持续性感染的机制1、病毒基因组的整合；2、病毒存在于受保护的部位或发生突变，因而逃避宿主免疫；3、某些病毒的抗原性太弱，机体难以产生免疫应答将其彻底清除；4、DI颗粒的产生；5、干扰素产生能力低下；6、机体免疫力低，无力完全清除病毒，导致病毒在体内长期存留。.第七节 病毒的分类The International Committee on Taxonomy of Viruses.形态学形态学:大小、大小、形状、形状、有无囊膜等；有无囊膜等；理化性质：分子量、热稳定性、离子稳定性；理化性质：分子量、热稳定性、离子稳定性；基因组：基因组：RNA,DNA,分段分段等；等；大分子成分和复制类型。大分子成分和复制类型。分类依据分类依据.类型类型 分类特点分类特点 病毒科名病毒科名DNA病毒病毒 双链双链DNA、有囊膜、有囊膜 痘病毒科痘病毒科 疱疹病毒科疱疹病毒科 双链双链DNA、无囊膜、无囊膜 腺病毒科腺病毒科 乳多空病毒科乳多空病毒科 单链单链DNA、无囊膜、无囊膜 细小病毒科细小病毒科DNA 病毒.类型类型 分类特点分类特点 病毒科名病毒科名RNA病毒病毒 双链双链RNA、分节、无囊膜、分节、无囊膜 呼肠病毒科呼肠病毒科 双双RNA病毒科病毒科 单负链单负链RNA、不分节、有囊膜、不分节、有囊膜 副粘病毒科副粘病毒科 弹状病毒科弹状病毒科 单负单单负单RNA、分节、有囊膜、分节、有囊膜 正粘病毒科正粘病毒科 布尼亚病毒科布尼亚病毒科 沙粒病毒科沙粒病毒科 单正链单正链RNA、不分节、无囊膜、不分节、无囊膜 小小RNA病毒科病毒科 杯状病毒科杯状病毒科 星状病毒科星状病毒科 单正链单正链RNA、不分节、有囊膜、不分节、有囊膜 冠状病毒科冠状病毒科 黄病毒科黄病毒科 披膜病毒科披膜病毒科RNARNA病毒病毒.类型类型 分类特点分类特点 病毒科名病毒科名 逆转录病毒逆转录病毒 双链双链DNA、不分节、有囊膜、不分节、有囊膜 嗜肝嗜肝DNA病毒科病毒科 单链单链RNA、不分节、有囊膜、不分节、有囊膜 逆转录病毒科逆转录病毒科逆转录病毒逆转录病毒.一、病毒的分离与鉴定样品的采集和处理病毒的培养理化特性的测定感染单位的测定二、诊断方法形态学检测方法核酸检测方法血清学检测方法第八节第八节病毒感染的诊断与防治病毒感染的诊断与防治.1.标本的采集、送检标本的采集、送检:原则：尽早采取；部位适宜原则：尽早采取；部位适宜 冷藏速送：冰块或干冰冷藏速送：冰块或干冰 50%的甘油缓冲盐水的甘油缓冲盐水 抗生素抗生素双份血清标本：急性期、恢复期双份血清标本：急性期、恢复期期双期双份血清份血清.2.方法方法:检验标本检验标本杀灭杂菌杀灭杂菌(青链霉素青链霉素)动物接种动物接种出现病状出现病状鸡胚接种鸡胚接种病变或死亡病变或死亡细胞培养细胞培养细胞病变细胞病变 鉴定病毒种型鉴定病毒种型接种接种病毒分离的一般程序：病毒分离的一般程序：.光镜光镜-包涵体包涵体电镜电镜免疫荧光免疫荧光ELISA核酸杂交、核酸杂交、DNA芯片、芯片、PCR.病毒的血清学诊断病毒的血清学诊断中和试验中和试验补体结合试验补体结合试验HA-HI试验试验免疫扩散等免疫扩散等.三三 、病毒感染的防治、病毒感染的防治(一）免疫预防一）免疫预防人工主动免疫人工主动免疫灭活疫苗：乙脑疫苗、狂犬疫苗减毒活疫苗：脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗 亚单位疫苗人工被动免疫免疫血清、卵黄抗体.（二）药物治疗药物治疗金刚烷胺金刚烷胺-抑制病毒脱壳抑制病毒脱壳RNA或或DNA类似物类似物阿糖腺苷类阿糖腺苷类无环鸟苷无环鸟苷二羟丙氨甲基鸟嘌呤二羟丙氨甲基鸟嘌呤迭氮酰氨胸苷迭氮酰氨胸苷抑制人类抑制人类HIV逆转录作用逆转录作用治疗治疗AIDS-治疗疱疹性脑炎等疱疹病毒感染治疗疱疹性脑炎等疱疹病毒感染.干扰素干扰素干扰素诱生剂干扰素诱生剂中草药中草药.复习题复习题1、病毒区别于其他微生物的特征病毒区别于其他微生物的特征 2、病毒的结构和化学组成、病毒的结构和化学组成3、病毒的复制过程、病毒的复制过程5、病毒的培养方法、病毒的培养方法6、病毒引致的细胞变化有哪些？病毒引致的细胞变化有哪些？7、病毒变异的类型及原理、病毒变异的类型及原理8、利用理化因素对病毒的影响在实际生产中、利用理化因素对病毒的影响在实际生产中有何应用？有何应用？9、病毒持续性感染的类型及机制、病毒持续性感染的类型及机制10、病毒感染的检测方法、病毒感染的检测方法.