动物实验基本操作技术.ppt

第九章第九章 动物实验基本操作技术动物实验基本操作技术5/3/202415/3/20242动动物物实实验验准准备备引进引进动物动物动动物物抓抓取取固固定定动动物物编编号号标标记记给药给药途径途径和方和方法法动物动物麻醉麻醉体液体液采集采集实验实验外科外科技术技术操作操作术术前前准准备备术术中中技技术术术术后后护护理理动物动物处死处死动物实验流程动物实验流程5/3/20243动物实验基本操作技术动物实验基本操作技术 动物实验的方法是各种各样的，如常用模型复制法、切开动物实验的方法是各种各样的，如常用模型复制法、切开和分离法、切除和注入法、离体组织器官法等，在不同的和分离法、切除和注入法、离体组织器官法等，在不同的研究领域有其不同的目的和应用，但是一些基本的操作技研究领域有其不同的目的和应用，但是一些基本的操作技术方法是一样的。术方法是一样的。如动物的如动物的抓取、固定、标号、脱毛、麻醉、给药、采血、采尿、抓取、固定、标号、脱毛、麻醉、给药、采血、采尿、处死处死等，对于实验研究者来说无论从事哪一类研究项目，等，对于实验研究者来说无论从事哪一类研究项目，都会不同程度的应用这些技术。都会不同程度的应用这些技术。5/3/20244一、大、小鼠的抓取固定一、大、小鼠的抓取固定第一节第一节 实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定5/3/20245固固定定盒盒5/3/20246二、豚鼠的抓取固定法二、豚鼠的抓取固定法5/3/20247三、家兔的抓取固定法三、家兔的抓取固定法5/3/202485/3/20249一、大、小鼠的一、大、小鼠的性别鉴定性别鉴定第二节第二节 性别鉴定性别鉴定5/3/202410Female Male 二、兔的性别鉴定5/3/202411一、大、小鼠一、大、小鼠 1.根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）第第三三节节 年龄的大致判断年龄的大致判断日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1 1仔鼠裸体仔鼠裸体鲜红鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带脐带瘢痕脱落瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行5/3/202412日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1010能听到声音能听到声音9 91111全身被白毛，全身被白毛，门齿长门齿长出出13131515眼皮眼皮张张开，能跳开，能跳跃跃，能抓取，能抓取东东西西1818以后以后能自行采食，独立生活能自行采食，独立生活5/3/2024135/3/2024145/3/2024155/3/2024165/3/2024175/3/2024185/3/2024195/3/2024205/3/2024215/3/202422 2.根据体重鉴定日龄根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应小鼠日龄与体重的对应日龄日龄/d初生初生 5 10 15 20 25 30体重体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.05/3/202423 大鼠日龄与体重的对应大鼠日龄与体重的对应日龄日龄/d初生初生 10 20 30 40 10 20 30 40 体重体重/g6 67 177 1725 3525 3550 5550 5590 10090 100150150日日龄龄/d/d5050 60 70 80 60 70 80体重体重/g/g150150210 170210 170240 210240 210270 240270 2403203205/3/202424二、豚鼠二、豚鼠老老年年豚豚鼠鼠：牙牙齿齿和和趾趾爪爪长长，被被毛毛稀稀疏疏无无光光泽泽，眼眼神神呆呆滞滞，行动迟缓。行动迟缓。年年轻轻豚豚鼠鼠：牙牙齿齿短短白白，爪爪短短软软，眼眼睛睛圆圆亮亮，行行动动敏敏捷捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同日龄雌性体重略高于雄性。被毛有光泽，且紧贴身体。同日龄雌性体重略高于雄性。日日龄龄/d/d 初生初生 7 20 30 60 7 20 30 60 体重体重/g/g606080 10080 100120 150120 150200 170200 170220 240220 240300300日日龄龄/d/d 90 120 180 90 120 180体重体重/g/g330330400 400 400400470 520470 5206006005/3/202425三、家兔三、家兔家家兔兔的的门门齿齿和和爪爪随随年年龄龄增增长长而而增增长长，是是年年龄龄鉴鉴别的重要标志。别的重要标志。青年兔：门齿洁白，短小，排列整齐；青年兔：门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔：门齿暗黄老年兔：门齿暗黄,厚而长厚而长,排列不整齐排列不整齐,有破损。有破损。1岁家兔岁家兔趾：趾：红色与白色长度相等；红色与白色长度相等；1岁以下：红多于白；岁以下：红多于白；1岁以上：白多于红。岁以上：白多于红。5/3/202426五、犬五、犬犬犬的的年年龄龄主主要要以以牙牙齿齿的的生生长长情情况况、磨磨损损程程度度、外形颜色等情况综合判定。外形颜色等情况综合判定。5/3/202427年龄 犬齿更换和磨损情况2个月以下仅有乳齿(白、细、尖)24个月更换门齿46个月更换犬齿(白，牙尖圆钝)610个月更换臼齿1岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2岁下门齿尖突部分磨乎3岁上、下门齿尖突大部分磨平45岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄68岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损910岁唇部、胡须发白10岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白5/3/202428第四节 妊娠检查妊妊娠娠诊诊断断(pregnancydiagnosis)：在在配配种种以以后后能能及及时时掌掌握握雌雌性性动动物物是是否否妊妊娠娠、妊妊娠娠的的时时间间及及胎胎儿儿和和生生殖殖器器官官的的异异常常情情况况，采采用用临临床床和和实实验验室室的的方方法法进行检查。进行检查。通通过过妊妊娠娠检检查查，可可以以及及时时地地对对雌雌性性动动物物加加强强护护理理或或再再次次配配种种，以以保保护护母母体体和和胎胎儿儿的的正正常常发发育育，避避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。5/3/202429外部检查法外部检查法摸胎法摸胎法阴道检查法阴道检查法直肠检查法直肠检查法超声波检查法超声波检查法孕酮含量测定法孕酮含量测定法青蛙试验青蛙试验妊娠检查方法有5/3/202430第五节第五节 分组与编号分组与编号动物实验前对实验动物进行随机分组和编号标记动物实验前对实验动物进行随机分组和编号标记一、随机分组：随机数字表（随机抽样原理）一、随机分组：随机数字表（随机抽样原理）（一）（一）为二组为二组例例：设设有有雄雄性性Wistar大大鼠鼠12只只，按按体体重重大大小小依依次次编编为为1，2，3，12号号，试试用用完完全全随随机机的的方方法法，分为甲、乙两组。分为甲、乙两组。分分组组方方法法：随随机机点点落落在在是是随随机机数数字字表表上上第第21行行第第31列列的的78，则则从从78开开始始，由由上上向向下下抄抄12个个随随机机数字，如下：数字，如下：5/3/202431随机数字：随机数字：78386957910374566826541随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组：随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组：动物编号：动物编号：123456789101112组组别：乙别：乙乙乙甲甲甲甲甲甲乙乙甲甲甲甲乙乙乙乙甲甲甲甲乙组乙组5个，甲组个，甲组7个，两组数字不等个，两组数字不等继继续续用用随随机机方方法法将将甲甲组组多多余余的的一一只只调调整整给给乙乙组组，从从上上面面最最后后一一随随机机数数字字41，接接下下去去抄抄一一个个数数为为62，以以7除除之之(因因甲甲组组原原分分配配7只只)得得6，即即把把原原分分配配在甲组的第在甲组的第6个甲个甲(即即11号大鼠号大鼠)调入乙组。调入乙组。5/3/202432如如果果甲甲组组多多两两个个，则则接接下下去去抄抄两两个个数数。分分别别以以8，7除除之之，余余数数即即指指要要调调入入乙乙组组的的第第几几个个甲甲，余余此此类类推推。最最后后各各组组的的鼠鼠数数就就相相等等了了。调调整整后后各组鼠的编号为：各组鼠的编号为：组别组别鼠的编号鼠的编号甲组甲组3457812乙组乙组126910115/3/202433(二二)为三组：为三组：A组、组、B组、组、C组组分分组组方方法法：落落点点是是随随机机数数字字表表第第40行行17列列的的08，则则从从08开开始始，自自左左到到右右抄抄12个个随随机机数数字字，以以3除除各各随随机机数数字字，若若余余数数为为l，即即该该鼠鼠归归A组组；余余数数为为2，归人归人B组；余数为组；余数为3，归入，归入C组。组。动物编号：动物编号：123456789101112随机数字：随机数字：082701501529393943796910除除3余数：余数：201202001101组组别：别：BCABCBCCAACA调整组别：调整组别：B5/3/202434（三）（三）每个动物为一组：每个动物为一组：例例：设设有有A，B，C，D，E，F代代表表的的6只只家家兔兔，试试用完全随机法将其每只分为一组。用完全随机法将其每只分为一组。分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第为第21行第行第17列的列的33，则从，则从33向左抄用向左抄用6个数字，然个数字，然后分别以后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即除之。凡除不尽的，即将余数写下。将余数写下。随机数字随机数字3346952687除除数数654321余余数数311121随机排列随机排列CABDFE5/3/202435二、编号标记方法二、编号标记方法实实验验动动物物分分组组后后，为为了了区区分分、观观察察并并记记录录每每个个个个体体的的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。反应情况，必须给每只动物进行编号标记。1体体表表颜颜料料着着色色法法一一般般对对短短期期试试验验的的白白色色动动物物可可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：红色：红色：0.5中性红或品红溶液；中性红或品红溶液；黄黄色色：35苦苦味味酸酸溶溶液液或或8090苦苦味味酸酸酒酒精精饱和液；饱和液；咖啡色：咖啡色：2硝酸银溶液；硝酸银溶液；黑色：煤焦油酒精溶液。黑色：煤焦油酒精溶液。5/3/202436 左左 前前 腿腿上上部部为为1，左左腰腰部部为为2，左左 后后 腿腿为为3，头头部部为为4，背背部部为为5，尾尾基基部为部为6，右右侧侧从从前前至至后后依依次次为为7、8、9。用用黄黄色色表示个位数，红色表示十位数。表示个位数，红色表示十位数。5/3/202437 2个体耳号标记法 3.个体断趾标记法 4.耳号钳标记法 5.挂牌法5/3/2024385/3/202439三、三、实验动实验动物被毛的去除方法物被毛的去除方法除毛的方法有剪毛、拔毛和脱毛三种。剪剪毛毛：固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时需注意以下几点：把剪刀贴紧皮肤剪，不可用手提起被毛，以免剪破皮肤；依次剪毛，不要乱剪；剪下的毛集中放在一个容器内，勿遗留在手术野和兔台周围，以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛。5/3/202440 拔拔毛毛：兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时，需用拇指、食指将局部被毛拔去，以利操作。脱脱毛毛：脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛，适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。5/3/202441 常用脱毛常用脱毛剂剂的配方：的配方：硫化钠3g、肥皂粉1g，淀粉7g，加水适量调成糊状。硫化钠8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g，加水75ml。硫化钠8g，溶于100ml水中。以上脱毛剂适用于家兔、大白鼠、小白鼠家兔、大白鼠、小白鼠等小动物的脱毛。硫化钠10g、生石灰15g，溶于100ml水此配方适用于狗等大此配方适用于狗等大动动物的脱毛。物的脱毛。5/3/2024425/3/2024435/3/2024445/3/202445第六节第六节 常规采血方法常规采血方法 一、大、小鼠的采血方法一、大、小鼠的采血方法1颈颈静脉或静脉或颈动颈动脉采血脉采血2股静脉或股股静脉或股动动脉采血脉采血3心心脏脏采血采血4尾部采血尾部采血5眼眶采血眼眶采血6断断头头取血取血5/3/202446眼窝静脉丛采血尾部采血5/3/202447心脏采血5/3/2024485/3/2024495/3/202450二、豚鼠的采血方法二、豚鼠的采血方法1耳缘剪口采血耳缘剪口采血2心脏采血方法同大、小鼠。心脏采血方法同大、小鼠。3股动脉采血方法同大、小鼠。股动脉采血方法同大、小鼠。4后肢背中足静脉采血后肢背中足静脉采血5/3/2024515/3/202452三、家兔的采血方法三、家兔的采血方法1.心脏采血心脏采血2.耳中央动脉采血耳中央动脉采血3.耳静脉采血耳静脉采血4.颈总动脉颈总动脉5/3/2024535/3/202454 四、狗、猫的采血方法 1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血 2股动脉采血 3.心脏采血同大、小鼠心脏采血。4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血。5/3/202455 采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。5/3/2024561）采采血血场场所所有有充充足足的的光光线线；室室温温夏夏季季最最好好保保持持在在2528，冬季，冬季，1520为宜；为宜；2）采血用具有采用部位一般需要进行消毒；）采血用具有采用部位一般需要进行消毒；3）采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；）采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；4）若若需需抗抗凝凝全全血血，在在注注射射器器或或试试管管内内需需预预先先加加入入抗抗凝剂凝剂。采血时要注意5/3/202457部部位位 动物种类动物种类a.尾静脉尾静脉大鼠、小鼠大鼠、小鼠b.耳缘静脉耳缘静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊c.眼底静脉丛眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠兔、大鼠、小鼠取少量血取少量血5/3/202458部部位位 动物种类动物种类后肢外侧皮下小隐静脉后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫狗、猴、猫耳中央动脉耳中央动脉兔兔颈静脉颈静脉狗、猫、兔狗、猫、兔心脏心脏豚鼠、大鼠、小鼠豚鼠、大鼠、小鼠断头断头大鼠、小鼠大鼠、小鼠取中量血取中量血5/3/202459部部位位 动物种类动物种类股动脉、颈动脉股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔狗、猴、猫、兔心脏心脏狗、猴、猫、兔狗、猴、猫、兔颈静脉颈静脉马、牛、山羊、绵羊马、牛、山羊、绵羊摘眼球摘眼球大鼠、小鼠大鼠、小鼠取大量血取大量血5/3/202460动物种类动物种类最大安全采最大安全采血量血量(ml)最小致死采最小致死采血量血量(ml)小鼠小鼠0.20.3大鼠大鼠12豚鼠豚鼠510兔兔1040狼狗狼狗100500猎狗猎狗50200猴猴15604.最大安全采血量与最小致死采血量最大安全采血量与最小致死采血量5/3/202461第第七七节节 麻醉方法麻醉方法一、实验动物的麻醉方法一、实验动物的麻醉方法全身麻醉法：吸入法，注射法全身麻醉法：吸入法，注射法局部麻醉法：浸润麻醉，表面麻醉局部麻醉法：浸润麻醉，表面麻醉5/3/202462（一）全身麻醉法（一）全身麻醉法1、吸入法麻醉药：麻醉药：u乙醚乙醚u氯仿氯仿u三氟乙烷三氟乙烷5/3/2024632 2、注射法、注射法静脉注射、肌肉注射、腹腔注射静脉注射、肌肉注射、腹腔注射麻醉药：麻醉药：u 巴比妥类药物、巴比妥类药物、氯胺酮、氯胺酮、乌拉坦、乌拉坦、水合氯醛水合氯醛（一）全身麻醉法（一）全身麻醉法5/3/202464（二）（二）局部麻醉法局部麻醉法u注射部位：皮肤、肌下组织、深层组织u 1%盐酸普鲁卡因 局部浸润麻醉u 0.022盐酸可卡因 表面麻醉5/3/202465麻醉药物应用原则：麻醉药物应用原则：l依据动物体重计算麻醉药物的剂量；依据动物体重计算麻醉药物的剂量；l依据动物生命体征变化控制给药速度；依据动物生命体征变化控制给药速度；l掌握宁少勿多、分阶段给药的方式；掌握宁少勿多、分阶段给药的方式；l麻醉时需注意保温。麻醉时需注意保温。针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。实施不同的麻醉方法。5/3/202466麻醉具体操作：麻醉具体操作：家兔全身麻醉家兔全身麻醉麻醉剂：麻醉剂：3%3%戊巴比妥钠，戊巴比妥钠，1ml/kg1ml/kg（30mg/Kg 30mg/Kg）前前1/21/2快快速速推推入入，使使动动物物能能顺顺利利、快快速速地地渡渡过过兴兴奋奋期期；后后1/21/2速速度度宜宜慢慢，且且边边注注射射边边注注意意观观察察动动物物的的生生命命体体征征变变化化，当当确确定定已已达达到到麻麻醉醉效效果果时时，即即停停止止给给药药，不不必必急急于于将将剩剩余余的麻醉药物全部推入。的麻醉药物全部推入。给药方法：给药方法：耳缘静脉注射耳缘静脉注射5/3/202467麻醉成功标志麻醉成功标志角膜反射迟钝角膜反射迟钝或消失或消失肢体肌肉松弛肢体肌肉松弛疼痛反射消失疼痛反射消失呼吸变深变慢呼吸变深变慢 5/3/202468第第八八节节 给药途径与方法给药途径与方法注射法分为：注射法分为：皮下注射、皮内注射、肌肉注射皮下注射、皮内注射、肌肉注射腹腔注射、静脉注射腹腔注射、静脉注射脑脑膜膜下下注注射射、脑脑内内注注射射、胸胸腔腔内内注注射射、腰腰椎椎内内注注射、关节腔注射和心内注射射、关节腔注射和心内注射投入法投入法经消化道投入：口腔、胃腔或肠管经消化道投入：口腔、胃腔或肠管经呼吸道投入：鼻腔或气管经呼吸道投入：鼻腔或气管5/3/202469（一）皮下注射（一）皮下注射注注射射时时以以左左手手拇拇指指和和食食指指提提起起皮皮肤肤，将将连连有有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。号针头的注射器刺入皮下。注射部位：狗、猫大腿外侧注射部位：狗、猫大腿外侧兔背部兔背部/耳根部耳根部豚鼠后大腿内侧豚鼠后大腿内侧/小腹部；大白鼠侧下腹部小腹部；大白鼠侧下腹部（二）皮内注射（二）皮内注射局部脱毛局部脱毛消毒消毒绷紧皮肤绷紧皮肤30度进针度进针挑起针头稍刺入可注射挑起针头稍刺入可注射皮肤表面鼓起一小皮丘。皮肤表面鼓起一小皮丘。5/3/2024705/3/202471 （三）肌肉注射 选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部5/3/202472（四）腹腔注射（四）腹腔注射用用大大、小小白白鼠鼠做做实实验验时时，以以左左手手抓抓住住动动物物，使使腹腹部部向向上上，右右手手将将注注射射针针头头于于左左（或或右右）下下腹腹部部刺刺入入皮皮下下，使使针针头头向向前前推推0.30.5cm，再再以以45度度角角穿穿过过腹腹肌肌，固固定定针针头，缓缓注入药液，头，缓缓注入药液，为为避避免免伤伤及及内内脏脏，可可使使动动物物处处于于头头低低位位，使使内内脏脏移移向向上上腹腹。若若实实验验动动物物为为家家兔兔，进进针针部部位位为为下下腹腹部部的的腹白线离开腹白线离开1cm处。处。5/3/2024735/3/202474（五）静脉注射（五）静脉注射注射时尽量使血管充盈注射时尽量使血管充盈1兔：兔耳缘静脉兔：兔耳缘静脉先拔毛，手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈先拔毛，手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈固固定定：左左手手食食指指和和中中指指夹夹住住静静脉脉的的近近端端，拇拇指指绷绷紧紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面静脉的远端，无名指及小指垫在下面进进针针：6号号针针头头从从静静脉脉的的远远端端进进针针，移移动动拇拇指指于于针针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入结束：结束：然后拔出针头，用手压迫针眼片刻然后拔出针头，用手压迫针眼片刻5/3/2024755/3/2024762小白鼠和大白鼠小白鼠和大白鼠尾静脉注射尾静脉注射固固定定动动物物（鼠鼠筒筒或或烧烧杯杯），露露出出尾尾巴巴，4550温温水水浸浸润半分钟或酒精擦拭，血管充盈，表皮角质软化润半分钟或酒精擦拭，血管充盈，表皮角质软化固固定定：以以左左手手食食指指和和中中指指捏捏住住鼠鼠尾尾，无无名名指指从从下下面面托托起起，以大拇指和小指夹住尾巴的末梢以大拇指和小指夹住尾巴的末梢注射：注射：进针，先缓注少量药液，无阻力进针，先缓注少量药液，无阻力3狗狗前肢内侧皮下头静脉、后肢小隐静脉前肢内侧皮下头静脉、后肢小隐静脉侧侧卧卧固固定定，剪剪毛毛，用用胶胶皮皮带带扎扎紧紧静静脉脉近近端端，从从远远端端进进针针，有回血后，松开绑带（或两手），缓缓注入药液。有回血后，松开绑带（或两手），缓缓注入药液。5/3/2024775/3/202478注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.01325510515肌肉0.10.20.20.50.20.50.5125静脉0.20.51215310515皮下0.10.50.510.5213310几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）5/3/202479动动物种物种类类 体重（体重（g）最大容最大容积积（ml）小鼠小鼠301.025-300.820-240.5大鼠大鼠3008.0250-3006.0200-2494.0-5.0100-1993.0豚鼠豚鼠3006.0250-3004.0-5.0家兔家兔35002002500-35001502000-2400100猫猫3000100-1502500-300050-80犬犬10,000-15,000 200-500（六）经口给药多用灌胃法 常用动物一次灌胃能耐受的最大容积 见右表5/3/2024801小鼠、大鼠（或豚鼠）小鼠、大鼠（或豚鼠）灌胃针安注射器上灌胃针安注射器上固固定定动动物物成成垂垂直直体体位位经经口口腔腔缓缓慢慢插插入入灌灌胃胃针针针针插入时应无阻力插入时应无阻力注射液体。注射液体。灌胃针插入位置：小鼠灌胃针插入位置：小鼠34cm大鼠或豚鼠大鼠或豚鼠46cm灌胃量：小鼠为灌胃量：小鼠为0.21ml，大鼠、豚鼠为，大鼠、豚鼠为15ml。5/3/2024815/3/2024822狗、兔、猫、猴狗、兔、猫、猴固固定定动动物物将将扩扩口口器器放放入入动动物物口口中中，用用绳绳固固定定于于嘴嘴部部橡橡皮皮导导管管（如如导导尿尿管管），经经扩扩口口器器上上的的小小圆圆孔孔插插入入将药液灌入。将药液灌入。5/3/202483（七）其它途径给药（七）其它途径给药1.呼吸道给药挥发性类药物：乙醚、氨气等呼吸道给药挥发性类药物：乙醚、氨气等2.皮肤给药皮肤给药药液涂在皮肤上，经皮肤吸收药液涂在皮肤上，经皮肤吸收用用于于鉴鉴定定药药物物或或毒毒物物经经皮皮肤肤的的吸吸收收作作用用、局局部部作作用用、致致敏敏作作用和光感作用等用和光感作用等3.脊髓腔内给药用于椎管麻醉或抽取脑脊液脊髓腔内给药用于椎管麻醉或抽取脑脊液4.脑内给药用于微生物学研究脑内给药用于微生物学研究大小鼠正中额部刺入脑，大小鼠正中额部刺入脑，豚鼠、兔、狗须先用穿颅钢针穿透颅骨，再刺入脑部豚鼠、兔、狗须先用穿颅钢针穿透颅骨，再刺入脑部5.直肠内给药用于动物麻醉直肠内给药用于动物麻醉6.关节腔内给药常用于关节炎的动物模型复制关节腔内给药常用于关节炎的动物模型复制5/3/202484n人与各种动物及各种动物之间用药剂量换算公式：B动物剂量（mg/kg）=WA动物剂量（mg/kg）5/3/202485第第九九节节 处死方法处死方法处处死死原原则则：当当实实验验中中途途停停止止或或结结束束时时，实实验验者者应应站站在在实实验验动动物物的的立立场场上上以以人人道道的的原原则则去去处处置置动动物物，原原则则上上不不给给实实验验动动物物任任何何恐恐怖怖和和痛痛苦苦，也也就就是是要要施行施行安乐死安乐死。安安乐乐死死是是指指实实验验动动物物在在没没有有痛痛苦苦感感觉觉的的情情况况下下死死去去。实实验验动动物物安安乐乐死死方方法法的的选选择择取取决决于于动动物物的的种种类与研究的课题。类与研究的课题。5/3/202486一、捣碎脑脊髓一、捣碎脑脊髓用于蛙类用于蛙类二、颈椎脱臼法二、颈椎脱臼法用于鼠类用于鼠类三、放血法三、放血法眼眶放血、心脏放血、动脉放血眼眶放血、心脏放血、动脉放血四、断头法四、断头法五、五、击打法击打法六、药物法六、药物法有毒药物或麻醉剂有毒药物或麻醉剂七、七、空气栓塞法空气栓塞法兔、猫等静脉注入兔、猫等静脉注入2040ml狗静脉内注入狗静脉内注入80150ml5/3/2024875/3/2024885/3/2024895/3/2024905/3/202491动物实验常用手术器械5/3/202492手术刀握持方法手术刀握持方法5/3/2024935/3/202494动物实验常用方法动物实验常用方法 动动物物实实验验的的方方法法很很多多，下下面面举举一一些些动动物物实实验验的的常常用方法：用方法：1 1、复制动物模型法、复制动物模型法 采采用用人人工工的的方方法法使使动动物物在在一一定定致致病病因因素素（机机械械、化化学学、生生物物和和物物理理）作作用用下下，造造成成动动物物的的组组织织，器器官官或或全全身身的的一一定定损损伤伤，复复制制成成与与人人类类疾疾病病相相似似的的动动物物疾疾病病模模型型，来来研研究究各各种种疾疾病病的的发发生生、发发展展规规律律及及防治方法。防治方法。5/3/202495 2 2、切开、分离法、切开、分离法以活体动物为对象的整体实验常用方法。以活体动物为对象的整体实验常用方法。麻麻醉醉情情况况下下，制制备备一一些些实实验验条条件件（如如活活体体解解剖剖、分分离离暴暴露露器器官官、组组织织或或进进行行一一些些手手术术制制备备等等措措施施）进进行行研研究究，称称“急性动物实验急性动物实验”。优优点点：比比较较简简便便，立立即即观观察察，实实验验条条件件相相对对地地较较易易控控制制，对要研究的器官，有可能直接观察。对要研究的器官，有可能直接观察。缺缺点点：存存在在着着麻麻醉醉、手手术术创创造造及及存存活活时时间间较较短短等等因因素素，也会对实验结果带来一定的影响。也会对实验结果带来一定的影响。要要求求：注注意意麻麻醉醉程程度度，手手术术要要轻轻巧巧，少少出出血血、减减少少创创伤伤，并要熟悉手术部位的神经、血管等解剖。并要熟悉手术部位的神经、血管等解剖。5/3/202496 3、切除和注入提取液法 研究内分泌器官的生理和病理病变研究内分泌器官的生理和病理病变如切除某一腺体后看辐射对机体的影响，如切除某一腺体后看辐射对机体的影响，切除某一腺体后看出现什么症状而推论这种腺体的功能切除某一腺体后看出现什么症状而推论这种腺体的功能如蝌蚪无甲状腺素，如注入甲状腺素，蝌蚪很快变成了蛙。如蝌蚪无甲状腺素，如注入甲状腺素，蝌蚪很快变成了蛙。4 4、离体组织器官法、离体组织器官法 离离体体实实验验是是利利用用动动物物的的离离体体组组织织、器器官官或或生生物物性性致致病病因因子子（微微生生物物、寄寄生生虫虫等等），置置于于一一定定的的存存活活条条件件下下（如如温温度度、营营养成分、氧气、水、养成分、氧气、水、pH等）进行观察的一种实验方法。等）进行观察的一种实验方法。5/3/202497动物组织、细胞的培养也常用此种方法。动物组织、细胞的培养也常用此种方法。离体实验的优点：离体实验的优点：方法比较简单，一般不需要很复杂的仪器设备。方法比较简单，一般不需要很复杂的仪器设备。实验条件比较容易控制，需要的人力较少。实验条件比较容易控制，需要的人力较少。不足之处：不足之处：模拟的存活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入，模拟的存活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入，因此可以作为整体研究的补充和参考因此可以作为整体研究的补充和参考5/3/202498 5 5、移植法、移植法 将动物器官、组织或细胞进行相互移植的一种方法。将动物器官、组织或细胞进行相互移植的一种方法。如如骨骨髓髓移移植植时时，将将小小鼠鼠A（供供体体）的的骨骨髓髓注注入入到到小小鼠鼠B的的血血液液中中（受受体体），很很快快可可见见脾脾结结节节化化（脾脾造造血血）。脾脾结结节节数数量反应了造血干细胞的多少，由此可以观察干细胞的变化。量反应了造血干细胞的多少，由此可以观察干细胞的变化。各小鼠之间的骨髓移植叫同种骨髓移植，各小鼠之间的骨髓移植叫同种骨髓移植，同同一一品品系系小小鼠鼠内内各各小小鼠鼠之之间间的的骨骨髓髓移移植植叫叫同同系系骨骨髓髓，小小鼠鼠骨髓移植给大鼠则叫异种骨髓移植。骨髓移植给大鼠则叫异种骨髓移植。动物各种组织、器官的移植也是实验研究中常用的方法。动物各种组织、器官的移植也是实验研究中常用的方法。5/3/2024996 6、生物电、活性物质观察法、生物电、活性物质观察法对对动动物物体体各各种种生生物物电电用用电电生生理理记记录录仪仪进进行行观观察察记记录录，如如心心电电、肌肌电电、脑脑电电等等；对对动动物物组组织织中中各各种种活活性性物物质质用用生生物物化化学学法法测测定定，如如各各种种酶酶，激激素素等等。7 7、病理解剖学、组织学观察法、病理解剖学、组织学观察法肉肉眼眼、光光镜镜和和电电镜镜检检查查，来来观观察察、分分析析动动物物各各种种疾疾病病时时病病理理组组织织学学改改变变。可可从从组组织织学学的的角角度度来来探探讨讨疾病防治机理。疾病防治机理。5/3/2024100