桂皮醛对关节炎大鼠炎症因子及骨桥蛋白的作用.pdf

论著桂皮醛对关节炎大鼠炎症因子及骨桥蛋白的作用*杨云皓 李发菊 许望东 何成松(西南医科大学附属医院风湿免疫科,四川 泸州 6 4 6 0 0 0)【摘要】目的 探讨桂皮醛(C i n)对型胶原诱导的关节炎(C I A)大鼠的作用及对骨桥蛋白(O P N)水平的影响。方法 选取2 0只S P F级S D健康雄性大鼠,随机选取5只大鼠为对照组,其余大鼠建立型C I A大鼠模型。取造模成功的大鼠随机分为模型组、低剂量C i n组、高剂量桂C i n组,每组5只。造模成功后连续给药3周,1次/天,低、高剂量C i n组分别给予剂量为1 0 0、2 0 0 m g/k g的C i n灌胃处理,正常组和模型组使用等量生理盐水灌胃处理。观察C i n对C I A大鼠关节炎评分影响,检测各组大鼠血清中O P N、白介素-6(I L-6)、I L-1 7和肿瘤坏死因子-(TN F-)的水平,免疫组织化学法(I HC)检测滑膜组织中O P N表达,W e s t e r n b l o t法检测滑膜组织中O P N的蛋白表达,R T-Q P C R方法检测软骨中O P N mR NA水平,HE染色观察各组大鼠关节组织病理改变。结果 与对照组比较,模型组大鼠关节炎评分显著升高,血清中O P N、I L-6、I L-1 7和TN F-的水平显著升高,O P N在滑膜、软骨表达水平升高,关节组织出现明显的炎症细胞浸润和滑膜增生;与模型组比较,低、高剂量C i n组能够降低大鼠关节炎评分,显著降低血清中O P N、I L-6、I L-1 7和TN F-的水平,O P N在滑膜、软骨表达水平降低,并减轻关节组织的病理损伤,高剂量C i n组作用更显著。上述指标差异均具有统计学意义(P9 8%),牛型胶原蛋白(上海金穗生物科技有限公司),O P N、白介素-6(I L-6)、I L-1 7、肿瘤坏死因子-(T N F-)E L I S A试剂盒和定量P C R试剂(武汉科鹿生物科技有限责任公司),中性树胶、D A B显色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司),R I P A裂解液、B C A蛋白质浓度测定试剂盒、E C L化学发光检测试剂盒、PM S F、脱脂奶粉、羊抗兔二抗(艾斯本技术有限公司),GA P DH兔源单克隆抗体(武汉三鹰生物技术有限公司),O P N兔源单克隆抗体(上海a b c a m公司);RM 2 0 1 6切片机(上海徕卡仪器有限公司),I X 5 1显微 镜(日 本 奥 林 巴 斯),荧 光 定 量P C R仪:S t e p O n eTM实时荧光定量P C R系统(美国生命技术公司),T G L-1 6冷冻离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司),D R-2 0 0 B s酶标仪(D i a t e k公司),D YY-6 C电泳仪(北京六一仪器厂)。1.3 方法1.3.1 造模、分组及给药 2 0只大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量C i n组、高剂量C i n组,每组5只。除对照组外,其余3组均按以下方法建立C I A大鼠模型,将牛型胶原与乙酸溶液混合,并在4 下持续摇摆1 2 h,以获得8 m g/m L胶原蛋白溶液。将胶原蛋白溶液与完全弗氏佐剂(体积比为1 1)混合,以获得终浓度为4 m g/m L胶原蛋白乳剂,按0.3 m L/只于造模大鼠足跖部及尾根部多点皮下注射,7 d后再进行1次加强免疫,对照组以同样的方法注射等量0.9%氯化钠溶液,造模1 4 d6。造模后根据足趾肿胀、变形情况进行关节炎评分:0分为无足趾肿胀;1分为轻微肿胀;2分为中度肿胀;3分为严重肿胀;4分为严重肿胀伴有变形。每个足趾最高评分为4分,总分最大为1 6分,总分大于4分的大鼠表示造模成功7。造模第1 4 d后开始给药,低、高剂量C i n组按照1 0 0、2 0 0 m g/k g灌胃,1次/d,持续3周;对照组和模型组灌胃等量0.9%氯化钠溶液,1次/d,持续3周。1.3.2 E L I S A法检测大鼠血清中O P N及炎症因子I L-6、I L-1 7、T N F-的水平 最后一次给药2 4 h后,通过腹腔注射戊巴比妥将大鼠麻醉,采集腹主动脉血,置于4 冰箱中静置2 h,然后2 0 0 0 r/m i n离心1 0 m i n,收集上层血清。采用E L I S A试剂盒检测大鼠血清O P N、I L-6、I L-1 7和T N F-含量,严格按试剂盒说明书进行操作。1.3.3 免疫组织化学法(I HC)检测大鼠滑膜组织中O P N表达 将石蜡组织 切片脱蜡至 水,切 片 置 于0.0 1 M柠檬酸盐缓冲液(P H 6.0)中,加热进行抗原修复,冷却至 室温,用 组 化 笔 在 组 织 周 围 画 圈,3%H2O2室温孵育2 0 m i n,封闭内源性的过氧化物酶。7651西部医学 2 0 2 3年1 1月 第3 5卷第1 1期 M e d J W e s t C h i n a,N o v e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 1用5%B S A稀释抗体,滴加适量O P N兔源一抗稀释液,一抗稀释比例1 1 5 0,4 过夜。复温,滴加山羊抗兔二抗稀释液,二抗稀释比例为1 2 0 0,3 7 水浴锅孵育3 0 m i n。配制D A B工作液,显微镜下控制显色,阳性为棕黄色。进行显色后,苏木素复染,盐酸乙醇分化,氨水泛蓝,脱水、透明、中性树胶封片。显色结果进行半定量分析,光镜下胞质及胞膜呈棕色为阳性细胞,用光学显微镜放大4 0 0倍拍照,每张切片随机选取3个视野,采用I m a g e-P r o P l u s 6.0软件进行图像分析,表达水平以平均光密度计算。1.3.4 W e s t e r n b l o t法检测大鼠滑膜组织中O P N的蛋白表达 取大鼠膝关节滑膜组织,组织块用预冷的P B S缓冲液漂洗23次,剪成小块置于匀浆器中,加入2 0 0 L蛋白裂解液,冰浴彻底匀浆;将匀浆液转移至离心管中,冰浴3 0 m i n,期间用移液器反复吹打,1 2 0 0 0 r/m i n离心5 m i n,吸取上清液,B C A法测定蛋白浓度。配制1 0%的分离胶和5%的 浓 缩 胶 进 行S D S-P AG E电泳,上样后先8 0 V电泳3 0 m i n,再调整为1 2 0 V电泳3 0 m i n,按3 0 0 mA恒流转膜9 0 m i n,加入5%脱脂牛奶室温封闭1 h,随后将 条带加入O P N兔 源 一 抗 蛋 白 稀 释 液 中,一 抗 稀 释 比 例 为1 1 0 0 0,4 过夜,第2天 回 收 已 稀 释 的 一 抗,用T B S T洗三次,每次5 m i n。加入辣根过氧化物酶标记羊抗兔二抗,二抗稀释比例为1 1 0 0 0 0,室温孵育3 0 m i n,用T B S T在 室 温 下 摇 床 上 洗 四 次,每 次5 m i n,后滴加E C L发光液,反应1 m i n后置于暗室中曝光,随后显影、定影。以GA P DH为内参蛋白,用A l p h a E a s e F C软件处理系统分析目标带的光密度值。1.3.5 R T-Q P C R方法检测大鼠软骨中O P N mR-NA水平 取大鼠膝关节软骨组织,每个组织称取5 0 m g。采用T R I p u r e法提取S D大鼠软骨总R NA,取总R NA 1 5 L反转录合成c D NA第一链(M-ML V R e v e r s e T r a n s c r i p t a s e试剂盒),取反转录产物1 L进行内参基因GA P DH及目的基因O P N的扩增。引物由武汉金开瑞生物工程有限公司完成引物合成,引物序列:GA P DH(1 6 4 b p)引物序列上游:5-AA C AG-C AA C T C C C AT T C T T C C-3,下 游:5-T G G T C-C AG G G T T T C T T A C T C C-3;O P N(2 0 6 b p)引物序列上 游:5-AG C A C A C AAG C AGA C G T T T T G-3,下游:5-G C AA C T G G GAT GA C C T T GAT AG-3。反应条件:预变性9 5 1 m i n,9 5 1 5 s,5 8 2 0 s,7 2 4 5 s,4 0次循环。采用2-C T公式计算和比较相关基因表达水平的C T值。1.3.6 HE染色观察大鼠关节组织病理学改变 将大鼠膝关节标本置于4%多聚甲醛中固定,随后进行脱钙、彻底脱去钙盐后进行常规石蜡包埋、切片(厚度为23 m)。组织切片置于载玻片上,二甲苯脱蜡,乙醇溶液复水,HE染色,最后脱水封片,显微镜下观察大鼠关节组织的病理改变。1.4 统计学分析 采用S P S S 2 1.0软件和G r a p h P a d P r i s m 9.0软件进行分析及作图。计量资料以均数标准差(xs)表示,两样本均数比较采用t检验,多样本均数比较采用单因素方差分析。以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结果2.1 C i n对C I A大鼠关节情况和关节炎评分影响 造模第1 4天,与对照组比较,各组大鼠足跖出现明显肿胀,关节炎评分显著升高(P0.0 5);造模第2 1、2 8、3 5天,与模型组比较,低、高剂量C i n组足跖肿胀缓解,大鼠关节炎评分显著降低(P0.0 5);造模第3 5天,与低剂量C i n组比较,高剂量C i n组大鼠关节炎评分显著降低(P0.0 5),见表1。表1 C i n对C I A大鼠关节炎评分的影响(xs),n=5T a b l e 1 E f f e c t o f c i n n a m a l d e h y d e o n a r t h r i t i s s c o r e i n C I A r a t s组别 关节炎评分(分)1 4 d2 1 d2 8 d3 5 d对照组0000模型组9.0 00.7 19.8 00.8 41 0.4 01.3 41 1.2 00.8 4低剂量C i n组9.2 01.3 08.2 00.8 47.8 00.8 47.8 00.8 4高剂量C i n组9.2 01.3 08.2 01.3 07.4 01.1 46.0 01.2 2注:与对照组比较,P0.0 5;与模型组比较,P0.0 5;与C i n低剂量组比较,P0.0 5。2.2 C i n对C I A大鼠血清中O P N及炎症因子水平的影响 与对照组比较,模型组大鼠血清中O P N、I L-6、I L-1 7、T N F-表达水平显著增加(P0.0 5);与模型组比较,低、高剂量C i n组大鼠血清中O P N、I L-6、I L-1 7、T N F-的表达水平均显著减少(P0.0 5);与低剂量C i n组比较,高剂量C i n组大鼠血清中O P N、I L-6、I L-1 7、T N F-的表达水平显著减少(P0.0 5),见表2。2.3 I HC法检测C i n对C I A大鼠滑膜组织O P N蛋白表达的影响 I HC结果显示棕黄色的阳性产物主要分布于胞膜及胞质。I HC图像表明对照组滑膜组织可见O P N少量表达,与对照组相比,模型组大鼠滑8651西部医学 2 0 2 3年1 1月 第3 5卷第1 1期 M e d J W e s t C h i n a,N o v e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 1 表2 各组大鼠血清O P N、I L-6、I L-1 7、T N F-含量比较(xs),n=5T a b l e 2 C o m p a r i s o n o f s e r u m O P N,I L-6,I L-1 7 a n d T N F-c o n t e n t i n r a t s o f e a c h g r o u p组别 O P N(n g/m L)I L-6(p g/m L)I L-1 7(p g/m L)TN F-(p g/m L)对照组0.1 40.0 32 7.8 52.1 13 0.2 12.8 72 3.4 52.1 2模型组0.4 40.0 44 2.3 93.6 35 1.7 03.4 94 0.0 43.2 2低剂量C i n组0.3 30.0 53 7.6 12.2 14 3.7 33.3 93 4.0 82.6 2高剂量C i n组0.2 20.0 43 2.7 32.0 93 6.4 52.8 72 8.5 32.4 0注:与对照组比较,P0.0 5;与模型组比较,P0.0 5;与C i n低剂量组比较,P0.0 5。膜的O P N蛋白表达更高,低剂量C i n和高剂量C i n治疗可降低C I A滑膜O P N蛋白表达(图1)。半定量分析结果表明,与对照组比较,模型组滑膜组织O P N表达明显增加(P0.0 5);与模型组比较,低、高剂量C i n组滑膜组织O P N表达均明显减少(P0.0 5);高剂量C i n组滑 膜组织O P N表达减少 更显著(P0.0 5),见图2。图1 各组大鼠滑膜组织免疫组织化学变化(I H C 4 0 0)F i g u r e 1 I mm u n o h i s t o c h e m i c a l c h a n g e o f s y n o v i a l t i s s u e i n r a t s注:A.对照组;B.模型组;C.低剂量C i n组;D.高剂量C i n组。图2 各组大鼠滑膜O P N表达的平均光密度值F i g u r e 2 A v e r a g e o p t i c a l d e n s i t y o f O P N e x p r e s s i o n i n s y n o v i a l m e m-b r a n e o f r a t s i n e a c h g r o u p注:与对照组比较,P0.0 5;与模型组比较,P0.0 5;与C i n低剂量组比较,P0.0 5。2.4 W e s t e r n b l o t法检测C i n对C I A大鼠滑膜组织O P N蛋白表达的影响 与对照组比较,模型组滑膜组织中O P N蛋白相对表达水平显著增加(P0.0 5);与模型组比较,低、高剂量C i n组中O P N蛋白相对表达水平显著减少(P0.0 5),表明C i n抑制了滑膜组织中O P N蛋白的表达,且具有剂量依赖性,见图3。图3 W e s t e r n b l o t 检测各组大鼠滑膜组织O P N蛋白表达情况F i g u r e 3 T h e O P N p r o t e i n e x p r e s s i o n i n s y n o v i a l t i s s u e o f r a t s i n e a c h g r o u p w a s d e t e c t e d b y W e s t e r n b l o t注:A.w e s t e r n b l o t检测各组大鼠滑膜组织O P N蛋白条带;B.各组大鼠滑膜组织O P N蛋白表达比较。与对照组比较,P0.0 5;与模型组比较,P0.0 5;与C i n低剂量组比较,P0.0 5。2.5 C i n对C I A大鼠软骨中O P N mR NA表达的影响 各组大鼠软骨中O P N mR NA的相对定量分析结果显示,与对照组比较,模型组大鼠软骨O P N mR-NA表达显著增加(P0.0 5);与模型组比较,低、高剂量C i n组大鼠软骨O P N mR NA表达显著减少(P0.0 5),其中高剂量C i n组大鼠软骨中O P N mR NA表达较低剂量C i n组减少(P0.0 5),见图4。2.6 C i n对C I A大鼠关节组织病理形态的影响 各组大鼠滑膜组织HE染色结果显示,对照组滑膜组织无炎症细胞浸润和滑膜增生,模型组滑膜组织出现炎性细胞浸润和滑膜增生,低剂量C i n组以及高剂量9651西部医学 2 0 2 3年1 1月 第3 5卷第1 1期 M e d J W e s t C h i n a,N o v e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 1 图4 各组大鼠O P N m R N A在软骨中的表达F i g u r e 4 E x p r e s s i o n o f O P N m R N A i n c a r t i l a g e o f r a t s i n e a c h g r o u p注:与对照组比较,P0.0 5;与模型组比较,P0.0 5;与低剂量C i n组比较,P0.0 5。C i n组经过C i n治疗后都可减轻大鼠关节炎诱导的滑膜组织炎性细胞浸润和滑膜增生,见图5。图5 各组大鼠滑膜病理组织变化(H E 4 0 0)F i g u r e 5 P a t h o l o g i c a l c h a n g e o f s y n o v i a l m e m b r a n e i n r a t s o f e a c h g r o u p注:A.对照组;B.模型组;C.C i n低剂量组;D.C i n高剂量组。3 讨论R A是一种慢性自身免疫性关节炎,其特征是关节肿痛、晨僵、关节畸形和残疾。目前,R A主要通过药物治疗,其中N S A I D s和糖皮质激素能有效缓解R A患者的疼痛,但对病情的改善无明显作用,其严重的胃肠反应、肝肾毒性、心血管事件等副作用限制了其临床应用。DMA R D s治疗对R A病情控制至关重要,但长期使用也有较明显副作用,同时DMA R D s对部分患者治 疗效果不佳。生 物制剂常用 于对传统DMA R D s无反应的中重度R A患者。虽然有效,但由于其副作用(易受严重感染和癌症风险)和高昂价格,这些靶向药物的使用受到限制。R A属于中医“痹证”范畴。在过去的数千年里,中医为R A的治疗提供了许多有用且廉价的方法和药物8。肉桂是樟科樟属植物,习称“桂类药材”,药食用途广泛,具有补火助阳、温里散寒的功效;C i n是从肉桂树皮中分离得到的一种活性化合物,是肉桂的代表性成分,具有积极的抗菌、抗炎、抗肿瘤和降糖等作用,可用于治疗血液循环障碍、消化不良和炎症等3-4。R A的发病机制涉及多种细胞因子和细胞组成的复杂网络,这些细胞释放细胞因子会触发滑膜细胞增殖,并对软骨和骨骼造成损伤。细胞因子T N F-和I L-6的参与是R A发病机制的核心,其他细胞因子如I L-1 7也在其中发挥重要作用9。在R A中,T N F-可以通过激活N F-B信号通路发挥促炎作用,T N F-能够诱导白细胞和内皮细胞的激活,细胞因子和趋化因子的级联反应以及血管生成,此外,T N F-还能够调控破骨细胞的生成,抑制成骨细胞的分化,从而打破骨代谢平衡,产生骨质损伤1 0。I L-6是一种急性期蛋白,可增强机体的炎症反应,R A患者急性期C反应蛋白生成、血管翳形成和贫血等典型表现可以用I L-6的许多生物学活性来解释1 1。有研究表明,I L-6可调节T h 1 7细 胞、调 节 性T细 胞(R e g u l a t o r y T c e l l,T r e g)的分化。T h 1 7细胞发育也需要I L-6-S T AT 3通路,I L-6-S AT A 3信号轴的增强会导致大鼠出现I L-1 7 A介导的自身免疫性关节炎1 2。此外,I L-6可以调节T r e g与T h 1 7细 胞 的 平 衡。T r e g细 胞 转 化 为T h 1 7细胞是由滑膜成纤维细胞衍生的I L-6诱导的,转化的T h 1 7细胞具有更强破骨作用1 3。I L-6还与T N F-、I L-1 7联合调节破骨细胞生成,进而导致骨质破坏与骨侵蚀1 1。I L-1 7参与R A疾病发生发展进程,它主要可促进成纤维样滑膜细胞的激活、破骨细胞的生成、中性粒细胞、巨噬细胞和B细胞的招募和激活。I L-1 7和T N F-之间的协同作用可激活促炎介质的产生,如I L-1、I L-6、I L-8、前列腺素E 2和基质金属蛋 白 酶,从 而 促 进 早 期 炎 症 向 慢 性 关 节 炎 进展1 4-1 5。T N F-、I L-1 7和I L-6在R A的发生发展过程中发挥着协同作用1 6-1 7。本研究结果显示,与对照组比较,模型组大鼠足跖明显肿胀,关节炎评分显著升高,关节组织病理切片出现炎性细胞浸润和滑膜增生,血清中炎症因子I L-6、I L-1 7、T N F-水平亦显著升高,与模型组比较,桂皮醛治疗组大鼠足跖肿胀明显减轻,关节炎评分显著降低,血清炎症因子I L-6、I L-1 7、T N F-的水平亦显著降低,表明C i n可减少关节炎大鼠炎症因子I L-6、I L-1 7、T N F-的释放,降低大鼠关节炎评分,减轻滑膜炎症反应,进一步缓解大鼠关节组织损伤。0751西部医学 2 0 2 3年1 1月 第3 5卷第1 1期 M e d J W e s t C h i n a,N o v e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 1O P N是一种分布广泛的细胞外基质蛋白,被认为是参与R A发病中的一种重要促炎因子。C D 4+T细胞分泌的O P N可通过I L-1 8促进T h 1细胞因子在局部炎症中的作用,T h 1细胞因子在R A发病过程中发挥重要作用5。O P N还参与白细胞、淋巴细胞和单核细胞聚集、迁移的过程,并促进相关炎症因子分泌,进而推动滑膜炎的发展1 8。O P N与骨代谢过程密切相关,O P N影响T h 1/T h 2细胞的平衡以及通过T细胞表面受体诱导T h 1 7细胞分化均可调节I L-1 7水平,进而通过S y k/P I 3 K/A k t信号通路和N F-k B信号通路增强破骨细胞活性,最终导致骨和软骨破坏1 9。O P N还通过与细胞表面a v b 3整合素和C D 4 4相互作用促进破骨细胞与骨基质的附着。O P N与整合素和C D 4 4等受体相互作用,调节软骨细胞、成骨细胞和破骨细 胞 的 增 殖、分 化、炎 症、代 谢 的 生 理 和 病 理 过程2 0。此外,有研究发现O P N缺乏可防止关节软骨破坏,抑制O P N表达可改善C I A大鼠的关节炎症反应和骨破坏,这支持O P N在R A的骨代谢过程中发挥重要作用2 1。本研究中,O P N在C I A大鼠血清、滑膜、软 骨 中 显 著 升 高,并 且 这 一 趋 势 被C i n逆 转。O P N改变趋势与C I A大鼠关节炎评分、HE病理改变一致,提示C i n可能通过下调O P N表达水平来减少炎症因子释放和恢复骨代谢的平衡改善型胶原诱导的大鼠关节炎。同时实验发现高剂量组关节炎的缓解和O P N及炎症因子的表达下调均较低剂量组更显著,表明较高剂量C i n对R A可能具有更强的治疗作用。因此,本研究未来将进一步探索C i n治疗R A的更佳适用剂量,O P N在R A发生发展中起重要作用,未来需深入探索其在R A发病机制中的作用以及能否成为一种新的R A治疗靶点。C i n可能为R A患者带来更多治疗选择。但尚需进一步大样本量动物试验及临床试验予以证实。4 结论桂皮醛可改善大鼠I I型胶原诱导性关节炎诱发的炎症反应和关节损伤,其作用可能与下调O P N表达水平、降低I L-6、I L-1 7和T N F-等炎症因子水平、减轻骨与软骨的破坏有关。【参考文献】1S P A R K S J A.R h e u m a t o i d A r t h r i t i sJ.A n n I n t e r n M e d,2 0 1 9,1 7 0(1):I T C 1-I T C 1 5.2张兵,王孝玉,朱亚辉,等.m i R-2 1对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响J.西部医学,2 0 2 2,3 4(1 1):1 6 0 7-1 6 1 2.3梁国华,陈碧霞.肉桂中桂皮醛的最新研究进展J.医药前沿,2 0 1 7,7(1 4):3 6 3-3 6 5.4沈梦婷,白丹妮,王庆伟,等.肉桂及其活性成分抗炎作用机制的研究进展J.中草药,2 0 2 2,5 3(1 0):3 2 1 8-3 2 2 5.5江凤林,王友莲.骨桥蛋白在类风湿关节炎中的研究进展J.实用临床医学,2 0 2 2,2 3(1):1 1 6-1 1 9.6陈倩雯,何奕坤,沈佳莹,等.补肾解毒通络方对型胶原诱导性关节炎大鼠T L R 4/I B/N F-B信号通路相关因子的影响J.中国中医药信息杂志,2 0 2 1,2 8(1 1):6 9-7 5.7陈日裕.黑骨藤追风活络胶囊对类风湿关节炎大鼠P I 3 K/AK T/H I F-1 轴的影响J.中国现代药物应用,2 0 2 1,1 5(8):2 5 0-2 5 2.8WAN G Y,C HE N S,D U K,e t a l.T r a d i t i o n a l h e r b a l m e d i-c i n e:T h e r a p e u t i c p o t e n t i a l i n r h e u m a t o i d a r t h r i t i sJ.J E t h n o-p h a r m a c o l,2 0 2 1,2 7 9:1 1 4 3 6 8.9KON D O N,KUR O D A T,KO B AYA S H I D.C y t o k i n e N e t-w o r k s i n t h e P a t h o g e n e s i s o f R h e u m a t o i d A r t h r i t i sJ.I n t J M o l S c i,2 0 2 1,2 2(2 0):1 0 9 2 2.1 0 王洁,卞莹莹,张川,等.肿瘤坏死因子及其受体在类风湿性关节炎中的研究进展J.药学实践杂志,2 0 1 7,3 5(4):2 8 9-2 9 3.1 1T AK E U C H I T,YO S H I D A H,T ANAKA S.R o l e o f i n t e r l e u-k i n-6 i n b o n e d e s t r u c t i o n a n d b o n e r e p a i r i n r h e u m a t o i d a r t h r i t i sJ.A u t o i mm u n R e v,2 0 2 1,2 0(9):1 0 2 8 8 4.1 2N I S H I HA R A M,O GUR A H,U E D A N,e t a l.I L-6-g p 1 3 0-S T AT 3 i n T c e l l s d i r e c t s t h e d e v e l o p m e n t o f I L-1 7+T h w i t h a m i n i m u m e f f e c t o n t h a t o f T r e g i n t h e s t e a d y s t a t eJ.I n t I m-m u n o l,2 0 1 7,1 9(6):6 9 5-7 0 2.1 3KOMA T S U N,OKAMO T O K,S AWA S,e t a l.P a t h o g e n i c c o n v e r s i o n o f F o x p 3+T c e l l s i n t o TH 1 7 c e l l s i n a u t o i mm u n e a r t h r i t i sJ.N a t M e d,2 0 1 4,2 0(1):6 2-6 8.1 4L U B B E R T S E.T h e I L-2 3-I L-1 7 a x i s i n i n f l a mm a t o r y a r t h r i t i sJ.N a t R e v R h e u m a t o l,2 0 1 5,1 1(7):4 1 5-4 2 9.1 5S C H I NO C C A C,R I Z Z O C,F A S ANO S,e t a l.R o l e o f t h e I L-2 3/I L-1 7 P a t h w a y i n R h e u m a t i c D i s e a s e s:A n O v e r v i e wJ.F r o n t I mm u n o l,2 0 2 1,1 2:6 3 7 8 2 9.1 6W A N G T,H E C.T N F-a n d I L-6:T h e L i n k b e t w e e n I mm u n e a n d B o n e S y s t e mJ.C u r r D r u g T a r g e t s,2 0 2 0,2 1(3):2 1 3-2 2 7.1 7P A N D O L F I F,F R A N Z A L,C A R U S I V,e t a l.I n t e r l e u k i n-6 i n R h e u m a t o i d A r t h r i t i sJ.I n t J M o l S c i,2 0 2 0,2 1(1 5):5 2 3 8.1 8S I NGH R,HU I T,MA T S U I A,e t a l.M o d u l a t i o n o f i n f e c-t i o n-m e d i a t e d m i g r a t i o n o f n e u t r o p h i l s a n d C X C R 2 t r a f f i c k i n g b y o s t e o p o n t i nJ.I mm u n o l o g y,2 0 1 7,1 5 0(1):7 4-8 6.1 9S I J,WAN G C,Z HAN G D,e t a l.O s t e o p o n t i n i n B o n e M e t a b-o l i s m a n d B o n e D i s e a s e sJ.M e d S c i M o n i t,2 0 2 0,2 6:e 9 1 9 1 5 9.2 0B A I R J,L I Y S,Z HAN G F J.O s t e o p o n t i n,a b r i d g e l i n k s o s-t e o a r t h r i t i s a n d o s t e o p o r o s i sJ.F r o n t E n d o c r i n o l(L a u s a n n e),2 0 2 2,1 3:1 0 1 2 5 0 8.2 1YUMO T O K,I S H I J I MA M,R I T T L I NG S R,e t a l.O s-t e o p o n t i n d e f i c i e n c y p r o t e c t s j o i n t s a g a i n s t d e s t r u c t i o n i n a n t i-t y p e I I c o l l a g e n a n t i b o d y-i n d u c e d a r t h r i t i s i n m i c eJ.P r o c N a t l A c a d S c i U S A,2 0 0 2,9 9(7):4 5 5 6-4 5 6 1.(收稿日期:2 0 2 2-1 1-1 7;修回日期:2 0 2 3-0 7-1 7;编辑:刘灵敏)1751西部医学 2 0 2 3年1 1月 第3 5卷第1 1期 M e d J W e s t C h i n a,N o v e m b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 1