DB15∕T 1074-2016 尖叶胡枝子总黄酮制备与检测(内蒙古自治区).pdf

ICS 65.020 B38 备案号：52136-2017 DB15 内蒙古自治区地方标准 DB 15/T 10742017 尖叶胡枝子总黄酮制备与检测 Preparation and Detection of Total Flavonoids from Lespedeza hedysaroides 2016 - 11 - 28 发布 2017 - 02 - 28 实施 内蒙古自治区质量技术监督局 发 布 DB15/T 10742017 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由中国农业科学院草原研究所提出。 本标准由内蒙古自治区质量技术监督局归口。 本标准起草单位：中国农业科学院草原研究所。 本标准主要起草人：阿拉木斯、吴洪新、王育青、乌兰巴特尔、常春、戴雅婷、赵金梅、张晓庆、赵海霞、孙娟娟、刘洪林。 DB15/T 10742017 1 尖叶胡枝子总黄酮制备与检测 1 范围 本标准主要规定了尖叶胡枝子总黄酮的命名、制备、性状、鉴别、检查及含量测定。 本标准适用于尖叶胡枝子总黄酮的实验室提取与应用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 中国药典2005年版一部附录IXH“水分测定法” 中国药典2005年版一部附录IXJ“炽灼残渣检查法” 中国药典2005 年版一部附录 IXE“重金属检查法” 中国药典2005年版一部附录IXF“砷盐检查法” 中国药典2005年版一部附录VA“分光光度法” 3 术语和定义 下列术语与定义适用于本文件 尖叶胡枝子总黄酮 total flavonoids of Lespedeza hedysaroides 以植物材料名称加所得中间体的来源形式命名。 4 制法 4.1 提取 取干燥尖叶胡枝子（地上部分），粉碎至过 40 目筛，用 70 %乙醇、加热温度为 70 、固液比为1：20 回流提取三次，总提取时间大于 4 h。合并提取液，加热减压浓缩回收乙醇至无醇。 4.2 纯化 用与提取液等体积的石油醚萃取 3 次除叶绿素， 加热减压浓缩提取液至适于上柱， 将提取液加于已经处理好的 D101 大孔吸附树脂柱上，先用 2 倍柱体积量的水洗脱除杂，再用 80 %乙醇洗脱至大孔吸附树脂柱无黄色，收集乙醇洗脱液，按上述条件回收乙醇，浓缩至稠膏，在室温下真空干燥，粉碎即得。 5 性状 DB15/T 10742017 2 本产品为棕黄色至棕褐色粉末，微苦。 6 鉴别 6.1 化学鉴别 盐酸-镁粉反应：取样品与荭草苷对照品各少量，分别用甲醇溶解，加镁粉 25 mg，滴加浓盐酸 1-2 滴，观察颜色变化,样品与对照品均为红色。 6.2 薄层鉴别 取样品 50 mg，加甲醇 25 mL 使溶解，超声处理 10 min，滤液作为供试品溶液。另取尖叶胡枝子粉碎物5 g，按照4.1方法制备提取液，作为待测溶液；取荭草素、牡荆苷各2 mg，加甲醇溶解，制成每 1 mL含 0.2 mg的对照溶液。 吸取上述4种溶液各3 L， 分别点于同一正相硅胶板上， 以氯仿-甲醇-水(8:1:1)混合液作为展开剂展开，展距 10 cm，取出，晾干。喷以5%硫酸醇溶液显色，斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品相应的位置上呈现与对照品相同颜色的斑点， 同时供试品色谱在与提取液色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点，提示尖叶胡枝子在处理过程中其主要黄酮成分均保留。 7 检查 7.1 水分检查 水分检查按中国药典2005年版一部附录IXH“水分测定法”第一法之烘干法检查。限定其含水量应低于5.0 %。 7.2 炽灼残渣检查 炽灼残渣检查按中国药典2005年版一部附录IXJ“炽灼残渣检查法”检查。限定其炽灼残渣应低于1.0 %。 7.3 重金属检查 取炽灼残渣，按中国药典2005 年版一部附录 IXE“重金属检查法”第二法检查，重金属限量应低于百万分之五。 7.4 砷盐检查 取炽灼残渣，按中国药典2005年版一部附录IXF“砷盐检查法”第一法之古蔡法检查，砷盐限量应低于百万分之一。 8 含量测定 DB15/T 10742017 3 8.1 芦丁标准贮备液的制备 精密称取 120 干燥至恒重的芦丁标准样品20 mg，用70 乙醇溶解后移至 100 mL 棕色容量瓶中，用 70 乙醇定容至刻度，放入冰箱中备用。 8.2 供试品溶液的制备 称取本品约0.5 g，精确至0.1 mg，置于50 mL容量瓶中，加50 %乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。 8.3 测定方法 分别精密吸取芦丁标准溶液和供试品溶液，按照分光光度法(中国药典2005年版一部附录VA) ，选择510 nm为测定波长测定。本品按干燥品计尖叶胡枝子总黄酮应高于 35 %。