固相萃取-高效液相色谱法测定大豆油中3种抗氧化剂的不确定度评定.pdf

粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工23年第48卷第5期粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工抗氧化剂是一种能够有效防止油脂及其制品、罐头、方便面、饼干等含油脂的食品酸败及其他食品变质的一类添加剂。当今生活的不少食品和药品中都存在着人工合成的抗氧化剂。其中，比较常见的3种是特丁基对苯二酚（tert-butyhydroquinone，TB鄄HQ）、二 丁 基 羟 基 乙 酰 丙 嗪（butylated hydroxy鄄收稿日期：2023-03-01作者简介：杨眉（1988-），女，工程师，硕士，研究方向：粮油监测分析。固相萃取-高效液相色谱法测定大豆油中 3 种抗氧化剂的不确定度评定杨眉，宋明雄，陈润霖，业润泽，周伟（玉溪市粮食质量监测中心，云南 玉溪653100）摘要：建立用固相萃取结合高效液相色谱仪测定大豆油中的3种抗氧化剂（BHT、BHA、TBHQ）方法，通过对该方法线性关系、回收率、精密度等参数的分析研究，确定该方法便捷可靠。根据JJF 1059.1-2012测量不确定度评定和表示提供的不确定度分析思路，通过建立数学模型，对该实验方法的不确定度进行评定，分析了影响结果的各个不确定度分量，为后续工作建立有效的质量控制方法提供参考。实验数据表明储备液和标准溶液的配制、样品回收、固相萃取过程、标准曲线拟合对结果的不确定度影响较大，样品称量和液相色谱进样的影响可忽略不计。特丁基对苯二酚（TBHQ）的测定结果表示为0.01280.00176 g/kg，k=2（P=95%）；二丁基羟基甲苯（BHT）测定结果表示为0.01440.00198 g/kg，k=2（P=95%）；丁基羟基茴香醚（BHA）的测定结果表示为0.0140 0.00192 g/kg，k=2（P=95%）。关键词：固相萃取-高效液相色谱；大豆油；抗氧化剂；不确定度中图分类号：TS 207文献标识码：A文章编号：1007-6395（2023）05-0152-06Evaluation of Uncertainty in the Determination of Three Antioxidants inSoybean Oil by Solid-Phase Extraction-High-Performance Liquid ChromatographyYANG Mei,SONG Mingxiong,CHEN Runlin,YE Runze,ZHOU Wei(Yuxi Food Quality Monitoring Center,653100 Yuxi Yunnan,China)Abstract:A solid phase extraction(SPE)coupled with high-performance liquid chromatography for the deter鄄mination of three antioxidants(BHT,BHA,TBHQ)in soybean oil was developed,through the analysis and re鄄search of the linear relation,recovery and precision of the method,the method is confirmed to be convenient andreliable.According to the idea of uncertainty analysis provided by Evaluation and Expression of Uncertainty inMeasurement(JJF 1059.1-2012)，the uncertainty of the experimental method was evaluated by establishing amathematical model,and the uncertainty components affecting the results were analyzed,to provide reference forestablishing effective quality control methods in follow-up work.The experimental data show that the preparationof reserve solution and standard solution,sample recovery,solid phase extraction process and standard curve fit鄄ting have great influence on the result uncertainty,the effects of sample weighing and liquid chromatographic in鄄jection were negligible.The determination result of TBHQ in soybean oil was（0.0128 0.00176）g/kg,k=2（P=95%）,the determination result of BHT in soybean oil was（0.0144 0.00198）g/kg,k=2（P=95%）,the determi鄄nation result of BHA in soybean oil was（0.0140 0.00192）g/kg,k=2（P=95%）.Key words:solid phase extraction-high-performance liquid chromatography,soybean oil,antioxidant,uncer鄄taintytoluene，BHT）和丁基羟基水茴草醚（butylated hy鄄droxyanisole，BHA），它们都是我国目前依法允许应用的3种主要食品添加剂，既可单独应用又可综合应用。研究结果表明，以上3种抗氧化剂一旦过量应用就会对人体健康产生不利作用，最严重的时候还会引发前列腺癌等各种疾病，所以GB 2760-2014食品安全国家标准 食品添加剂使用标准 对这3种抗氧化剂的使用量都有明确要求，单独使用不得152粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工23年第48卷第5期粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工高于0.2 g/kg。食品中抗氧化剂的分析检测方法较多，随着现代分析检测技术的飞速发展，目前常见的主要是气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法和液相色谱-质谱法等1。这些方法的处理较为复杂，耗费试剂较大，容易在处理过程中造成待测物的丧失和损伤，从而导致结果出现问题。通过固相萃取法结合高效液相色谱检测大豆油中的3种抗氧化剂，对该方法的平均回收率、精密度等方法学参数进行了分析考察，实验数据结果显示该方式简单安全，操作简便，消耗试剂较少。同时对该实验方法进行不确定分析，建立数学模型，研究影响结果的各个不确定度分量，找出关键影响不确定度大小分量，为实验室进行抗氧化剂不确定评定时提供参考。1材料与方法1.1仪器Ultimate 3000高效液相色谱仪（紫外线和荧光检测器，处理软件采用变色龙工作站），美国赛默飞世尔科技(中国)公司；Raykol Fotector全自动固相萃取仪，睿科集团股份有限公司；PlusRaykol EVA-60全自动氮吹平行浓缩仪，睿科集团股份有限公司；5430R高速冷冻离心机（最大转速为6 000 r/min），德国艾本德公司；AL204/01分析天平，美国梅特勒-托利多仪器有限公司。1.2主要试剂和材料1.2.1试剂乙腈（色谱纯），美国赛默飞公司；甲酸（色谱纯），美国赛默飞公司；甲醇（色谱纯），美国赛默飞公司；正己烷（分析纯），上海泰坦科技股份有限公司；无水硫酸钠（分析纯），上海泰坦科技股份有限公司；BHA、BHT、TBHQ标准品（1 000 mg/L，纯度均98%），北京坛墨质检公司。1.2.2材料C18固相萃取柱，2 000 mg/12 mL；压榨一级大豆油：市场购买。1.3实验方法1.3.1样品前处理采用GB 5009.32-2016食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定第一法高效液相色谱法，对一级大豆油的试样进行提取、净化、洗脱、回收、富集和用50 氮气吹至干，最后用0.22 m有机相微孔滤膜过滤，再进行进一步分析测定。1.3.2样品标准储备液和标准混合工作液的配制TBHQ、BHT、BHA混合标准储备液的配制：先准确称取3种抗氧化剂的固体标准品各25 mg（精确至0.01 g），再用乙腈稀释后溶解并定容至25 mL的容量瓶中，混合配制成浓度为10 g/L的单标储备液，然后放入冰箱中冷藏备用。TBHQ、BHT、BHA混合标准工作液的配制：先移取适量的3种抗氧化剂的混合标准储备液，依次稀释成浓度为0、20.0 mg/L、40.0 mg/L、60.0 mg/L、80.0 mg/L、100.0 mg/L的工作标准溶液。1.3.3仪器方法色谱条件：C18色谱柱，柱长250 mm，内径4.6mm，粒径为5 m；流动相A：0.5%甲酸水溶液，流动相B：甲醇；洗脱梯度：02 min时，流动相A为45%；28 min时，流动相A从45%降至5%；814 min时，流动相A为5%；1414.1 min时，流动相A从5%增至45%；柱温：35；进样量：50 L；测定波长：280 nm。2结果和讨论2.1线性方程及相关系数将 浓 度 为20.0 mg/L、40.0 mg/L、60.0 mg/L、80.0mg/L、100.0 mg/L混标溶液分别进样，建立标准曲线。以样品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，分析所得的线性方程及相关系数见表1，由结果可得知，三组分的线性关系良好，且相应的相关系数均大于0.999。2.2方法精密度及回收率2.2.1方法精密度用浓度为6.0 mg/L的3种抗氧化剂混合溶液，在同一条件下进样6次，得到的RSD值在0.58%0.92%范围内，6次平行实验结果见表2。2.2.2方法回收率向空白试样基质中进行试样的加标实验，并测定回收率，共平行测定5次，分析结果为空白试样加标回收率在99.88%102.86%范围内，结果见表3。根据表2表3可知，方法精密度和回收率都能满足样品的测定要求。3大豆油中TBHQ、BHT、BHA的不确定度分析3.1数学模型的建立样品中抗氧化剂的计算公式为：X=CVm，式中X为大豆油中3种抗氧化剂的含量，g/kg；C为样品上液相色谱后从标准曲线上得到的样品浓度，mg/mL；V为样品溶液最终的定容体积，mL；m为试样称取的质量，g。153粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工23年第48卷第5期粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工3.2不确定度分量的分析与评定3.2.1大豆油称量过程中，引入的不确定度Urel（M）（1）电子天平自身引入标准不确定度U（M1）根据本实验使用的电子天平校准证书可知其最大允许偏差为0.2 mg，按照矩形分布，k=3姨，电子天平允差的标准不确定度为：U（M1）=0.23姨=0.1155 mg（2）称样重复性引入的标准不确定度U（M2）称样过程都是经过去皮和称样两次质量相减，从而得到大豆油质量M，因此其称量的标准不确定度为：U（M2）=2姨0.1155=0.163 mg因此，称量1 g大豆油的相对标准不确定度为：Urel（M）=0.163 mg1 000 mg=1.6310-43.2.2 TBHQ、BHT、BHA标准物质和配制其混合标准溶液时2，所带来的不确定度Urel（std）。3.2.2.1三种主要抗氧化剂标准品纯度所引入的相对标准不确定度Urel（C）查阅3种抗氧化剂的出产标准证书，TBHQ相对扩展不确定度为0.2%，k=2；BHT相对扩展不确定度为0.1%，k=2；BHA相对扩展不确定度为0.1%，k=2。由此，标准品纯度所带来的相对标准不确定度可以计算为：UrelTBHQ（C）=0.2%2=0.1%，UrelBHT（C）=0.1%2=0.05%，UrelBHA（C）=0.1%2=0.05%。3.2.2.2三种抗氧化剂储备液与标准溶液的配制所引入的相对标准不确定度Urel（V）（1）3种抗氧化剂储备液配制使用所引入的不确定度Urel（V1），主要涵盖了称量25 g标准品单标所使用的天平引入的相对标准不确定度Urel（V1-A），以及使用25 mL容量瓶定容所引入的相对标准不确定度Urel（V1-B）。根据3.2.1，称量25 g标准品天平引入的相对标准不确定度为：Urel（V1-A）=0.163 mg25 000 mg=6.5210-6使用25 mL容量瓶来定容时所引入的相对标准不确定度Urel（V1-B）包含容量瓶自身引入的相对标准不确定度Urel（V1-B1）以及实验室温度引入的相对标准不确定度Urel（V1-B2）。经查询，实验室使用的A类25 mL容量瓶最大误差为0.03 mL，考虑均匀分布的情况，k=3姨，因此该指标标准不确定度为：U（V1-B1）=0.033姨=0.0173 mL在使用25 mL容量瓶时，相对标准不确定度计算为：Urel（V1-B1）=0.0173 mL25 mL=6.9210-4在实验室中，由于室温变化难以保持在20，故若充分考虑定容时实验室温度在（202）条件下进行，水的膨胀系数为2.110-4-1，若考虑温度变化时遵循矩形分布规律，且包含因子k=3姨，则由表13种抗氧化剂的线性方程及相关系数序号抗氧化剂名称保留时间/min线性方程相关系数1特丁基对苯二酚（TBHQ）2丁基羟基茴香醚（BHA）3二丁基羟基甲苯（BHT）7.36310.15813.7080.99960.99960.9997y=0.311x+0.0523y=0.6458x+0.0412y=0.3267x+0.0328表2方法精密度化合物添加量测定值1测定值2测定值3测定值4测定值5测定值6测定值平均RSDmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/L/%TBHQBHTBHA6666.11566.00526.12116.08976.12526.10216.10236.12546.05426.04566.10216.08756.12116.02156.12156.15106.02546.01256.10426.06756.08320.580.920.704444.12153.98984.13214.01253.98754.23564.01123.99874.21563.98574.01253.99873.98783.98773.98984.02373.99524.1144表3方法回收率化合物添加量测定值1测定值2测定值3测定值4测定值5测定值平均回收率mg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/Lmg/L/%TBHQBHTBHA100.5999.88102.86154粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工23年第48卷第5期粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工室温变化时所产生的标准不确定度为；U（V1-B2）=2522.110-43姨=0.00606 mL室温变化所带来的相对标准不确定度为：Urel（V1-B2）=0.00606 mL25 mL=2.4210-4所以，用25 mL容量瓶定容时所产生的相对标准不确定度Urel（V1-B）为：Urel（V1）=0.0006922+0.0002422姨=7.3310-4（2）3种抗氧化剂储备液配制所引入的不确定度Urel（V2）3种抗氧化剂标准溶液稀释系列见表4所示。由于配制标准溶液过程中，必须使用50 mL容量瓶和1 mL移液器3，所以，这2种器具的实际运用中可能会产生的相对标准不确定度为Urel（V250）和Urel（V21）。50 mL单标容量瓶定容过程所产生的相对标准不确定度Urel（V250）又涵盖50 mL容量瓶自身产生的相对标准不确定度Urel（V250A）和实验室温度变化所产生的相对标准不确定度Urel（V250B），具体参见3.2.2.2。实验室中50 mL容量瓶均为国准A级，最大允差为0.05 mL，考虑到服从均匀分布规律，k=3姨，所以标准不确定度为：U（V250A）=0.05 mL3姨=0.0289 mL50 mL单标容量瓶的相对标准不确定度为：Urel（V250A）=0.0289 mL50 mL=5.7810-4温度引入的标准不确定度为：U（V250B）=5022.110-4mL3姨=0.0121 mL温度的变化所带来的相对标准不确定度为：Urel（V250B）=0.0121 mL50 mL=2.4210-4在标准溶液配制过程中，共使用了50 mL容量瓶5次，而每次使用50 mL单标容量瓶所产生的相对标准不确定度为：Urel（V250）=0.0005782+0.0002422姨=6.2710-45次使用所带来的相对标准不确定度为：Urel（V250）=5姨6.2710-4=1.4010-3同理，由1 mL移液器所产生的相对标准不确定度Urel（V21）又涵盖了1 mL移液器自身引入的相对标准不确定度Urel（V21A）以及实验室温度变化所产生的相对标准不确定度Urel（V21B）。查询校准证书，1 mL移液器4的扩展不确定度U=1.010-2mL，k=2，所以，1 mL移液器自身所引入的标准不确定度为：U（V21A）=(1.010-2)2=0.005 mL根据3.2.2.2，温度引入的标准不确定度为：U（V21B）=122.110-43姨=2.4210-4mL因此，1 mL移液器引入的标准不确定度为：U（V21）=0.0052+0.0002422姨=5.0110-3mL在3种抗氧化剂的混合标准系列溶液的配制使用过程中，1 mL移液器共使用了5次，移液量分别为0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL各一次，而这些使用过程所产生的相对标准不确定度为：Urel（V21）=(0.005010.1)2+(0.005010.2)2+(0.005010.3)2+(0.005010.4)2+(0.005010.5)2姨=0.0606所以，3种抗氧化剂储备液配制使用过程所产生的相对标准不确定度Urel（V2）为：Urel（V2）=0.001402+0.06062姨=0.06063种抗氧化剂储备液和标准溶液的配制使用过程所产生的相对标准不确定度为：Urel（V）=0.06062+0.0007332姨=0.0606综上所述，TBHQ、BHT、BHA标准物质和配制3种抗氧化剂混合标准溶液时，所带来的不确定度Urel（std）分别为：表4标准溶液系列稀释过程所使用的器具原始浓度/(g/L)取用量/mL定容体积/mL定容后浓度/(mg/L)移取器具定容容器100.1502100.2504100.3506100.4508100.550101 mL移液器1 mL移液器1 mL移液器1 mL移液器1 mL移液器50 mL容量瓶50 mL容量瓶50 mL容量瓶50 mL容量瓶50 mL容量瓶155粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工23年第48卷第5期粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工3.2.6回收率所带来的不确定度Urel（R）该方法通过5次平行测定，加标回收率分别达到为：99.85%、98.65%、98.36%、100.12%、100.05%、100.1%、100.0%，平均值为99.505%，标准偏差为：S（R）=61移(Xi-x)26-1姨=0.0785标准不确定度为：U（R）=S(R)n姨=0.0785/6姨=0.0320因此，样品加标回收率的相对标准不确定度为：Urel（R）=U（R）/99.505%=0.0322表5标准曲线拟合引入的不确定度序号标准溶液线性方程待测消解液平均标准溶液抗氧化剂3种抗氧化剂引入质量浓度C/(mgL-1)质量浓度/(mgL-1)平均浓度/(mgL-1)标准不确定度102234yTBHQ=0.311x+0.0523C0-TBHQ=12.8U（Cel-TBHQ）=0.004246yBHA=0.6458x+0.0412C0-BHA=14.4C=5U（Cel-BHA）=0.002258yBHT=0.3267x+0.0328C0-BHT=14.0U（Cel-BHT）=0.0018610UrelTBHQ（std）=0.0012+0.06062姨=0.06061UrelBHT（std）=0.00052+0.06062姨=0.06060UrelBHA（std）=0.00052+0.06062姨=0.060603.2.3固相萃取过程引入的相对不确定度Urel（G）固相萃取包括样品的上柱、洗脱、浓缩和复溶等步骤，要确定每一步引入的不确定度较为困难和复杂，本实验采用空白样加标回收率来表示固相萃取过程引入的不确定度。在空白油样中加入8.0 mg/L三种抗氧化剂的混标溶液进行回收实验，5次加标回收的测定结果为7.86、7.89、7.93、8.05、8.10，平均回收率为99.58%，相对标准偏差RSD为1.31%，因此相对标准不确定度为：Urel（G）=1.31%599.58%=2.6210-33.2.4液相色谱仪引入的相对标准不确定度Urel（Y）液相色谱仪所产生的不确定度分量可以由进样装置的重复性5来表示，查阅液相色谱的技术参数，进样体积为50 L，进样的重现性0.5%，考虑按照矩形分布规律，k=3姨，所以液相色谱进样所产生的相对标准不确定度为：Urel（Y）=0.005501.732=610-53.2.5标准校准曲线所引入的相对标准不确定度Urel（Cel）本实验中，共使用了6种不同浓度的混合标准溶液6，分别为0 mg/L、2 mg/L、4 mg/L、6 mg/L、8 mg/L、10 mg/L，详见表5。每个浓度测2次后取平均值，样品溶液测定4次取平均值，然后拟合得到3种抗氧化剂的线性方程见表5。通过标准曲线校正，所带来的不确定度计算公式为：U（Cel）=S（y）b1P+1n(C0-C)2ni=1移（X1-C)2姨%式中：S（y）=ni=1移yi-(bXi+a$%)2n-2姨根据公式计算，b为斜率，a为截距，P为标准试样测定的次数，P=4，n为标准溶液测定次数（6个点，每点测定2次，故n=12），S(yTBHQ)=0.00202、S(yBHA)=0.00104、S(yBHT)=0.00086，标准不确定度见表5。因此，标准曲线拟合所带来的相对不确定度计算为：Urel（Cel-TBHQ）=U（Cel-TBHQ）/C0-TBHQ=0.0042/12.8=3.310-4、Urel（Cel-BHA）=0.0022/14.4=1.510-4、Urel（Cel-BHT）=0.0018/14.0=1.310-43.2.7合成相对标准不确定度Urel（X）及扩展不确定度U3种抗氧化剂的各相对不确定度分量见表6。合成相对标准不确定度为：根据JJF 1059.12012测量不确定度评定与表示，本实验中的方法采用了置信水平为95%，因此扩展因子k=2，扩展不确定度为：UTBHQ=kUrelXTBHQ=20.06870.0128=0.00176 g/kgUBHA=kUrelXBHA=20.06870.0144=0.00198 g/kgUBHT=kUrelXBHT=20.06870.0140=0.00192 g/kg156粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工23年第48卷第5期粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工粮 食 加 工表63种抗氧化剂的各相对标准不确定度分量相对标准不确定度3种抗氧化剂样品称量标准溶液配制固相萃取液相色谱进样标准曲线拟合回收率Urel（M）Urel（std）Urel（G）Urel（Y）Urel（Cel）Urel（R）Urel（XTBHQ）0.060610.00033Urel（XBHA）0.0001640.060600.002620.000060.000150.0322Urel（XBHT）0.060600.00013Urel（XTBHQ）=0.0001642+0.060612+0.002622+0.000062+0.000332+0.03222姨=0.0687Urel（XBHA）=0.0001642+0.060602+0.002622+0.000062+0.000152+0.03222姨=0.0687Urel（XBHT）=0.0001642+0.060602+0.002622+0.000062+0.000132+0.03222姨=0.0687本实验TBHQ的测定结果为（0.01280.00176）g/kg（k=2）；BHA的测定结果为（0.01440.00198）g/kg（k=2）；BHT的测定结果为（0.01400.00192）g/kg（k=2）。4结论通过采用固相萃取高效液相色谱法对大豆油中3种抗氧化剂（TBHQ、BHT、BHA）的测定，对整个实验过程可能引入的不确定度来源进行充分详细的分析，通过对实验方法回收率、精密度等测定，确定该方法测量结果的准确性和可靠性。通过对实验结果不确定度评估分析，数据表明储备液和标准溶液的配制、样品回收、固相萃取过程、标准曲线拟合对结果的不确定度影响较大，样品称量和液相色谱进样的影响可忽略不计。通过对抗氧化剂含量在大豆油中不确定度的分析，提示我们实验人员在实验操作过程中要精准配制储备液和标准溶液，正确使用移液器和各种玻璃器，固相萃取过程要严格按实验步骤进行，同时要精准称量实验样品，选择合适的标准曲线浓度范围，以此来减少测量结果的不确定性，从而获得更准确的测定结果。通过固相萃取高效液相色谱法对大豆油中3种抗氧化剂（TBHQ、BHT、BHA）含量不确定度评定，有助于提高实验操作的精准化和科学性，同时也为粮食质量安全风险评估提供可靠参考，更好地保障了粮食安全。参考文献:1杨眉，宋明雄，业润泽.固相萃取-超高效液相色谱法测定菜籽油中的3种抗氧化剂J.粮食科技与经济,2020,45（7）:109-111.2饶琛,张维波,陈翔,等.微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定香菇中总砷含量的不确定度评定J.广州化工,2022,50（16）:109-111,127.3国家质量监督检验检疫总局.全国流量容量计量技术委员会.JJG 196-2006常用玻璃量器检定规程:JJG 196-2006S.北京:中国计量出版社.4黄宇,赵嵩,张月送,等.高效液相色谱-蒸发光散射法测定酱腌菜中三氯蔗糖含量的不确定度评估J.现代食品,2021,16（58）:220-225.5刘汉林，李世荣，简春.高效液相色谱法测定奶粉中黄曲霉毒素M1的不确定度评定J.化学分析计量,2022,31（7）:77-80.6高云慨,陈小妹,陈春泉,等.HPLC-MS/MS法测定罗非鱼中4种四环素类抗生素残留量及不确定度评定J.食品安全导刊,2022,32（41）:97-101.157