肝细胞癌患者血清中FOXA2与FOXJ2的表达及临床意义.pdf

()().:.:/.():.:.():.()()()():.:.(编校:闫沛)肝细胞癌患者血清中 与 的表达及临床意义张 鑫冉小柯陈 茜徐宗瑶李艳杰李闪宜高 琪陈晓琦河南中医药大学第一临床医学院河南 郑州 河南中医药大学第一附属医院脾胃肝胆科河南郑州【摘要】目的:检测肝细胞癌()患者血清中叉头转录因子 与 的表达水平探讨、与 患者肿瘤相关指标及无进展生存期的相关性 方法:选取河南中医药大学第一附属医院脾胃肝胆科 年 月至 年 月入院的 患者 人收集患者血清 采用酶联免疫法检测 患者血清中 与 的表达水平分析其与 患者肿瘤相关指标及无进展生存期的相关性 计量数据与等级资料采用 检验分析相关性单因素相关性分析采用 检验运用 曲线计算 和 曲线下面积()根据约登指数最大法得到截断值采用 法进行无进展生存期分析 结果:与 表达水平均与肝癌临床分期相关(.)经 诊断曲线分析发现 与 的 对诊断存在统计学差异(.)经生存曲线分析发现、高表达组 患者的累积生存率均高于、低表达组 患者(.)与 在血清中的表达水平存在中等程度的正相关关系(.)结论:、在 患者血清中的表达水平与 的发展及预后密切相关可作为 判断疾病进展与预后的生物学标记物【关键词】肝细胞癌预后【中图分类号】.【文献标识码】:./.【文章编号】().【】:().:.【收稿日期】【修回日期】【基金项目】国家科技重大专项(民口)课题(编号:)河南省科技厅河南省重点研发与推广专项(编号:)河南省特色骨干学科中医药第二批学科建设项目(编号:)【作者简介】张鑫()男河南南阳人硕士研究生主要从事中西医防治消化系统肿瘤研究 :.【通信作者】陈晓琦()女河南商丘人副主任医师主要从事中西医防治消化系统肿瘤研究 :.现代肿瘤医学 年 月 第 卷第 期 .().:(.)(.)(.).(.).:.【】():原发性肝癌()在所有恶性肿瘤中的发病率居全国第 位其中肝细胞癌()约占 流行病学研究表明中国每年死于肝癌的人数约占全球因肝癌死亡人数的严重威胁我国居民健康肝癌的预防、诊断及治疗是我国目前重点关注的公共卫生问题 肝癌患者早期症状不典型容易被忽视发现时多合并不同程度肝硬化肝功能较差因此多中心复发率和肝内转移率都较高 如何提高治疗效果、减少复发转移率、延长生存期、提高生活质量成为 治疗的难题 近年来分子细胞生物学通过大量基础研究进一步阐明了 发生发展侵袭和转移的相关机制是当前社会关注的焦点但目前临床常用的靶向药易产生耐药性这促进了相关分子靶向药物的进一步研发叉头盒蛋白()家族有 个基因其中的大多数成员与癌症的发生发展有关 叉头盒蛋白()与叉头盒蛋白()可通过直接或间接作用抑制 发生发展、侵袭及转移从而影响预后是目前研究的热点 前期采用免疫组化 法检测病理组织中 与 的表达水平并结合临床数据证实 与 可影响 患者预后本研究将通过检测 患者血清中 与 的表达水平进一步验证两者抑制肝癌发生发展为两者成为新的分子治疗靶点提供循证医学依据 资料与方法.病例来源纳入河南中医药大学第一附属医院脾胃肝胆科 年 月至 年 月入院的 患者 人病历资料均完整 本研究纳入所有患者均签署知情同意书经河南中医药大学第一附属医院伦理委员会审核伦理号:.病例标准()诊断标准:患者的诊断标准、肝功能 分级和巴塞罗那临床分期(分期)均参照中国临床肿瘤学会指南工作委员会制定的原发性肝癌诊疗指南(年版)()纳入标准:符合肝细胞癌诊断标准年龄:岁性别不限病历资料完整自愿参加本实验并签署知情同意书()排除标准:既往或目前患有其它恶性肿瘤具有肝性脑病、难治性腹腔积液和严重感染发热患者孕妇或哺乳期病人及精神障碍疾病患者()剔除病例标准:不符合上述纳入标准而误纳者临床资料缺失的患者.实验方法实验材料:酶标仪()、恒温箱(上海新苗)、试剂盒(江苏酶免)、试剂盒(江苏酶免)实验步骤:提前 从 冰箱取出待测血清样本提前 从 冰箱中取出样本试剂盒以平衡至室温 根据试剂盒说明分别设置空白孔、标准孔和样品孔根据试剂盒说明书进行标准液配制样品稀释度为 倍 加入配制好的样品和标准品 恒温箱中反应 后弃去孔内液体 洗板 次加入酶标试剂 恒温箱中反应 后弃去孔内液体 洗板 次依次加入显色剂 与显色剂 恒温箱中反应 后加入终止液 加入终止液 内使用酶标仪测定以空白孔调零 波长依序测量各孔的吸光度(值)根据标准物的浓度计算出样品的浓度再乘以 倍的稀释倍数即样品的实际浓度.统计学方法本研究所有数据使用 .软件和 进行数据处理及绘图 计数资料以例数或构成比表示计量资料均首先进行正态性检验符合正态分布的用均数 标准差表示不符合正态分布使用非参数检验用四分位数进行描述计量数据与等级资料采用 检验分析相关性单因素相关性分析采用 检验 运用 曲线计算 和 曲线下面积()根据约登指数最大法得到截断值 采用 法进行无进展生存期分析 .及 .认为该指标对诊断存在统计学差异以此来判断最佳临界值 诊断曲线分析发现 的 为.(:.).对诊断存在统计学差异根据约登指数最大法得到最佳临界值.详见图 的 为.(:.).对诊断存在统计学差异根据约登指数最大法得到最佳临界值.详见图 根据 诊断曲线得出的 与 的最佳临界值将 与 分为高表达组与低表达组 对收集的 例 患者 个月的无进展生存时间及生存情况进行 生存曲线分析结果显示:、高表达组 患者的累积生存率均高于、低表达组 患者(.)详见图 图 与 的 诊断曲线.图 与 高低表达组 患者的生存曲线.与 表达水平与临床病理特征的相关性根据 诊断曲线得出的 与 的最佳临界值将 与 分为高表达组与低表达组并与肝癌临床病理特征进行单因素相关性分析发现 表达水平与肿瘤直径、有无门脉癌栓、有无转移、肝癌分期相关(.)表达水平与肿瘤直径、有无门脉癌栓、肿瘤个数、肝癌分期相关(.)见表 讨论肝细胞癌因其复发率高、预后差而成为我国重点关注的公共卫生问题尽管目前分子靶向药与免疫检查点抑制剂的问世已使部分患者的生存状况得到改善但 的根治性治疗仍然具有挑战性 近年来随着分子细胞生物学的发展初步阐明了癌症从生长到侵袭和转移的复杂机制同时也促进了相关分子靶向药物的研发 而 家族基因也被证明可作为癌基因或肿瘤抑制基因参与癌症的发生及发展 以 家族为基石的基因治疗可能成为肝癌治疗的又一新方向现代肿瘤医学 年 月 第 卷第 期 .表 、的表达水平与 患者临床病理特征的关系.()()()().()()().().()().()().()().()():.:.与 是叉头类 结合蛋白的成员是肝脏器官发生和体内平衡过程中必不可少的转录因子 转录调控是基因调控诸多方式中最常见的方式之一转录因子通过结合特定的 序列来控制从 到信使 的遗传信息转录速率转录包括引发和调节基因转录的蛋白质等多种因素 而肝组织含有的 转录因子的失调或突变与肝癌的发生发展关系密切 近年来有多篇文献报道 在黑色素瘤、食管鳞状细胞癌、肝内胆管癌、卵巢癌、非小细胞肺癌等肿瘤细胞中的高表达可抑制肿瘤增殖、侵袭及转移 同样 与 的发生发展关系密切 研究发现在 的异种移植动物模型中 过表达可显著抑制肿瘤生长同时过表达的 可通过上调雷帕霉素途径的单磷酸腺苷激活蛋白激酶机制靶标来增强仑伐替尼对 细胞的抑制作用 可提高 细胞的糖基化水平导致 细胞生存信号通路的激活长链非编码 的转录可促进 的表达从而抑制肝癌细胞中的上皮 间充质转化进而抑制 细胞迁移、侵袭和肺转移病变的形成 研究前期通过免疫组化 法发现 的表达水平与 的发生发展及预后相关 的高表达可延缓患者总生存周期 这些结果表明 在 中起着抑癌作用 在肝癌细胞中的高表达抑制了肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移的能力 本研究通过酶联免疫法发现 表达水平与肿瘤直径、有无门脉癌栓、有无转移、肝癌分期相关(.)阳性表达组 患者的累积生存率高于 阴性表达组 患者提示 的表达水平与 的发展及预后相关 在 的发展过程中发挥了重要作用提示 可能为影响预后的重要基因 在抑制肿瘤发生发展中也扮演着重要角色研究证明 可抑制结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌等肿瘤细胞的侵袭和转移其表达水平在肿瘤组织中下调且表达水平降低与肿瘤患者预后不良呈正相关 在 中等通过染色质免疫沉淀分析发现 通过直接结合其启动子来调节 钙黏蛋白的转录来抑制 发育过程中的细胞迁移和侵袭表明 同样通过上皮间质转化影响 发生发展有研究发现 的蛋白表达水平在 例 患者的组织中显著下调而高表达的 可显著提高患者生存率同时在小干扰 干扰 的表达后可导致 细胞增殖的促进 这些均与本研究的结果一致 本研究通过酶联免疫法与临床数据相结合证实 的表达水平与肿瘤直径、有无门脉癌栓、肿瘤个数、肝癌分期相关(.)高表达组 患者的累计生存率显著低于 低表达组患者(.)由此可见在 中发挥抑癌基因的作用 的表达水平与 的发生发展及预后关系密切表明 可能为影响肝细胞癌患者预后的重要因素、通过发挥抑癌作用参与癌症的发生及发展本研究通过基础实验与临床数据相结合分析、表达水平与 患者肝功能及预后的关系表明、可能为影响肝细胞癌患者的肝功能及预后的重要因素结合前期研究基础为肝癌诊断与治疗提供了新的循证医学证据 同时本研究表明 和 在 患者血清中的表达水平仍呈显著正相关表明协同影响 的发生发展未来有望共同应用于临床上癌症的诊断、治疗及预后评估【参考文献】国家卫生健康委办公厅.原发性肝癌诊疗指南(年版).临床肝胆病杂志():.(张 鑫等 肝细胞癌患者血清中 与 的表达及临床意义).():.:.()():.:.:.:.():.():.()():.():.冉小柯陈欣菊赵云霞等.叉头转录因子、在肝细胞癌组织中的表达及意义.临床肝胆病杂志():.():.():.:.:.():.():.:.()():.():.():.:.():.():.():.():.():.:.():.()():.:.():.():.():.():./.:.()():./.():./.():.():.(编校:闫沛)现代肿瘤医学 年 月 第 卷第 期 .