羔羊大肠杆菌的分离鉴定与治疗.pdf

612023年/第11期特种经济动物作者简介：陆梅香（1975.10-），女，中级兽医师，研究方向：畜牧兽医。羔羊大肠杆菌的分离鉴定与治疗陆梅香(山东省嘉祥县马村镇人民政府山东济宁272402)摘要：本研究通过对辖区内某养殖场3份病死羔羊的组织病料进行病原菌的分离鉴定，并开展了药敏试验。结合临床表现及实验室诊断，该养殖场羔羊感染大肠杆菌，药敏试验结果显示该病对氟苯尼考最敏感，采用了中药方剂配合氟苯尼考的方式对患病羊群进行了治疗，效果显著。关键词：羔羊；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验；防治大肠杆菌（Escherichia coli）又称大肠埃希氏菌，是一种条件性致病菌，血清型众多，在自然界中广泛存在。致病性大肠杆菌不仅能够引起动物发病，也是危害人类健康的重要病原菌之一1。该病主要通过消化道进行传播，各个年龄，各个品种的羊群均易感，其中以25周龄羔羊最为常见2。羔羊感染前期临床症状主要表现为精神沉郁、食欲下降、腹泻和排灰白色黄色粥糊状粪便。随着病情的发展，排便逐渐成水样，病羊消瘦、脱水，最终衰竭而死。该病的发生没有明显的季节性，但以冬春产羔季节多发。为明确近期辖区内某养殖场初生羔羊病死原因，本研究对3份病死羔羊的组织病料进行了病原菌的分离鉴定，并采用了中西结合的方式对患病羊群进行了治疗，效果显著，现将具体情况介绍如下。1 羔羊发病情况及诊断1.1发病情况2022年12月，本辖区内一养殖场的羊群突然发病，患病羊群主要为断奶或哺乳羔羊。患病羔羊主要表现为精神沉郁、食欲废绝、腹泻和排粥样或水样粪便，消瘦、脱水等症状。其中3头患病羔羊发病35 d后死亡。经了解得知，发病期间该养殖户曾使用青霉素、四环素、诺氟沙星等抗生素类药物进行了针对性治疗，但效果不佳。随后上报了上级兽医站，兽医到达现场后对病死羔羊进行了病理剖检，初步怀疑为大肠杆菌感染。按1.2诊断方法并结合临床表现，做进一步诊断。1.2诊断分别采集了病死羔羊的肠道组织、肝脏、肺脏、肠道内容物和肛拭子等样品放置于灭菌的采样袋内密封，4保存带回实验室进行病原菌的分离鉴定3。1.2.1细菌分离鉴定无菌操作将病料剪碎，分别接种于麦康凯琼脂平板、伊红美蓝琼脂平板和普通肉汤培养基上，置于37恒温箱中培养18 h后，仔细观察菌落的生长状态。无菌操作挑取单个菌落涂片，经过革兰氏染色后，放置于显微镜下观察细菌形态。将病料接种于肉汤培养基一段时间后发现肉汤逐渐变浑浊，肉汤表面形状菌环；在麦康凯琼脂培养基上有红色的菌落长出，菌落外观整齐，中间略微突起；伊红美蓝琼脂平板上的菌落呈黑色，带有金属光泽，菌落表面光滑，呈露珠状。经革兰氏染色后镜检发现，革兰氏阴性短小棒状杆菌单个或成对均匀分布，外观呈紫红色，两端钝圆，无芽孢。经比对，该菌疑似大肠杆菌。1.2.2生化试验无菌操作挑取单个菌落分别接种与含有葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、VP、MR等不同营养成分的生化反应管中进行生化试验，密封，37培养18 h观察各个生化反应管的情况。结果显示，该病原对葡萄糖、山梨醇、蛋白胨水、葡磷胨水、半固体琼脂、棉子糖、木糖及赖氨酸、鸟氨酸呈阳性反应。在葡萄糖发酵过程中产气，对苯丙氨酸、硫化氢、枸橼酸盐、尿素、葡萄糖酸盐、侧金盏花醇检测呈阴性。符合大肠杆菌的生化特性。1.2.3药敏试验本次选取了环丙沙星、阿莫西林、红霉素、青霉素、土霉素、替米考星、氟苯尼考、恩诺沙星8种药物进行药敏试验。在细菌分离培养基的平板表面贴上上述8种药物的药敏片，置于37恒温箱中培养24 h后，测量抑菌环的直径，以此判断药物的敏感性。详细结果如表1所示。特种经济动植物PECIAL ECONOMIC ANIMALS AND PLANTSS622023年/第11期表 1 药敏试验结果抗菌药物 抑菌圈直径/mm 结果判定氟苯尼考31敏感阿莫西林 5耐药恩诺沙星26中敏土霉素22中敏环丙沙星28中敏红霉素0耐药青霉素0耐药替米考星3耐药药敏试验结果显示：本次分离得到的大肠杆菌对氟苯尼考高度敏感；对恩诺沙星、环丙沙星、土霉素中度敏感；对阿莫西林、青霉素、红霉素、替米考星不敏感。3治疗结合临床诊断及实验室检测结果，该场羊羔确诊为大肠杆菌感染。根据药敏试验结果显示，本次分离的大肠杆菌对氟苯尼考的敏感性最强。因此，首先对症状较为严重的患病羔羊进行肌肉注射氟苯尼考注射液，照说明书，每天1次，连用3 d；其次，对患病羊群灌服中草药制剂：白头翁10 g、黄连10 g、茯苓10 g、白芍10 g、诃子肉10 g、生山药30 g、白术15 g、山茱萸15 g、甘草6 g和秦皮15 g，加水煎煮成中药液，灌服，每天2次。中西结合连续治疗3 d后，大多数患病羔羊的症状均有所缓解，再继续用药3 d后，病情得到了有效控制，在此期间没有继续出现新增或死亡病例，达到了预期的治疗效果。4诊疗体会大肠杆菌作为条件性致病菌，诱因众多：羔羊圈舍消毒力度不足、妊娠母羊饲养管理低下、初乳品质差和圈舍内温湿度水平不合理等均可诱发羔羊大肠杆菌感染。结合发病养殖户的实际情况发现，该养殖户对集约化饲养管理意识不强，养殖场内圈舍条件简陋，生产区与生活区没有明确的划分，产房内保温设施不足，温度偏低，粪便堆积，垫草杂乱。消毒等生物安全措施没有得到有效落实，从而导致羊群发病。因此，广大养殖户要防止传染病的发生和流行，就必须首先完善设施设备，强化生物安全和饲养管理理念，加强日常的饲养管理水平，保证羊舍内温湿度适宜，通风良好，定期对圈舍内的环境、用具、器物等进行彻底消毒，减少环境中病原微生物的含量，从源头上降低致病诱因。诊疗过程中将在病死羔羊病料中分离到的病原微生物，经过细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化特征鉴定最终确定为大肠杆菌。大肠杆菌在自然界中广泛存在，血清型众多，临床防控难度较大，现阶段对该病的防治以西医抗生素疗法为主，但随着抗生素的大量使用，耐药菌株不断出现，大肠杆菌多重耐药性呈逐渐攀升态势。李建强等研究发现羔羊大肠杆菌对红霉素、青霉素、四环素和卡那霉素耐药；龙岩市分离的羔羊大肠杆菌对链霉素、卡那霉素、替米考星等9种药物耐药4。本次药敏试验结果显示，8种测试药物中只有氟苯尼考的敏感性最强，红霉素、阿莫西林、替米考星等药物均已出现耐药，表明本辖区内分离到的大肠杆菌已经出现严重的耐药现象。本次研究结果与前人的研究结果一致，表明大肠杆菌耐药现象已经普遍存在。因此，为保证治疗效果，各养殖户务必要规范用药，定期轮换用药，临床治疗前先进行药敏试验，并且挑选出高度敏感抗菌药物，精准施治。为有效弥补抗生素类药物的不足，现阶段中草药在临床生产中的应用逐渐增加，其安全、绿色、（下转第71页）712023年/第11期特种经济动物母猪因鉴定输精时间推迟不准，只能输精12次，受胎率、产仔率较低。3后备母猪配种后管理及返情处理 成功配种后的母猪饲料由后备饲料转妊娠早期饲料，并限制饲料喂养量，一般喂养量控制在1.82.5 kg。配种后2周给予母猪1.5倍维持需要饲粮，限饲时间2周，避免因为营养过高影响胚胎着床。母猪1个情期后再次出现发情特征，且发情特征明显者进行二次配种，根据母猪发情状态结合卡片记录的发情配种记录进行处理，例如发情时间长，发情间隔时间异常，检查母猪是否存在阴道炎、子宫炎等疾病。母猪子宫炎、阴道炎，输精前使用1106U青霉素1106U链霉素20 mL鱼腥草生理盐水，稀释至80 mL，装入一次性输精瓶中，输入母猪子宫内，严重炎症需联合磺胺类药物进行治疗。返情后发情特征并不明显者，在第一情期内视作假发情，配种时间28 d返情者，并进行孕检，判定是否为假发情，假发情处理措施可同“2.3节”。4总结人工授精技术在降低公猪饲养规模，减少饲养成本的同时可有效阻断部分传染性疾病的传播感染，现已逐渐取代了传统本交配种方式。规模养猪场人工授精技术推广至今天，对种猪的选择、母猪鉴定、发情鉴定和工具准备等各环节要求较高，在实践过程中规范各项操作流程可为人工授精技术的成功创造良好条件。参考文献1董力中，孟祥宝，潘明，等.基于姿态与时序特征的猪只行为识别方法J.农业工程学报，2022，38(5):148-157.2刘晨阳，王济民，王祖力，等.中国生猪产业国际竞争力评价研究基于贸易与产业发展视角的比较分析J.中国农业资源与区划，2022，43(1):29-39.3王淑彬，王明利.中国生猪养殖场种养一体化综合效益评价研究基于8省的实地调研J.中国农业资源与区划，2022，43(2):43-54.4苏莹莹，王腾飞，刘旭乐，等.饲粮中添加发酵苜蓿对母猪繁殖性能和母猪、仔猪抗氧化能力的影响J.动物营养学报，2022，34(2):805-817.5赵尚尚，赵茜，赵国栋，等.胎次和分娩季节对新疆某场不同杂交模式母猪繁殖性能的影响J.中国畜牧杂志，2022，58(3):195-198.6辛海云，李宝红，孟繁明，等.定时输精技术在母猪繁殖中的应用研究进展J.广东农业科学，2021，48(8):106-115.7赵晶，王相国，齐晓龙，等.猪深部输精技术对母猪繁殖性能的影响J.中国农学通报，2017，33(32):108-112.8包明.中小规模猪场母猪繁殖力低原因分析及其提升策略J.特种经济动植物，2022，25(10):65-67.9范玉珊，吴俊辉，高凤磊，等.定时输精对经产母猪繁殖性能及生殖激素的影响J.中国畜牧兽医，2021，48(10):3726-3733.10崔茂盛，付永利，李志，等.猪场低剂量深部输精技术应用研究J.中国畜牧杂志，2018，54(4):47-49.无残留、低耐药性、抑菌、抗毒素等特点在疾病治疗过程中发挥着重大作用5。根据以往的疾病防治经验结合羊群采食草料特性，采用中西结合的治疗方式对患病羔羊进行了治疗，取得了良好的防治效果，供广大养殖户借鉴。参考文献1王华，简莹娜，李秀萍，等.羔羊致病性大肠杆菌的分离鉴定J.青海畜牧兽医杂志，2020，50(4):45-482李托，李陇平，张起艳，等.致羔羊腹泻大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验J.中国兽医杂志，2020，56(4):52-55.3林振华.地方养殖场猪大肠杆菌病的发病情况与耐药性检测分析J.甘肃畜牧兽医，2016，46(13):85-86.4陈长福.羔羊大肠杆菌的分离鉴定及致病性分析J.畜牧兽医杂志，2021，40(6):21-24.5李晏乐，岳肖华,孙卫东.中草药抑菌作用的现代研究进展J.中国中医基础医学杂志，2018，24(6):860-862.（上接第 62 页）