第六章-植物病害的诊断-植物病理学-教学.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第六章 植物病害的诊断,诊断的目的在于确认病害的种类、发病的原因、确定病原的种类，根据病原的特性和发病规律、制订防治对策，及时指导防治。为此，诊断是防治的依据，只有诊断正确，才能对症下“药”，做到防病保产的作用。,诊断是生产上防治病害的重要环节。植物医院的主要职责就是进行病害的诊断、对症下药。（挂羊头买狗肉者除外）。,诊断首先要有坚实的病害基础知识，丰富的临床经验，还要有必备的（先进的）仪器设备和一整套诊断技术。,一、病害诊断的主要步骤,1、,田间观察和病情调查,2,、,症状鉴别,3、,病原鉴定,1、,田间观察和病情调查,各种病害在田间的发生发展都表现一定的规律性，到发病现场作田间观察和发病环境调查是诊断的第一步，也是首要的工作。,在观察中，应详细查看病害的分布情况（有无发病中心、分布是否均匀等）、症状类型（病症、病状），并认真调查、记载：,1、,田间观察和病情调查,病情指数：,反应病害的普遍程度和严重程度。,（,各级病株数,级值）,病情指数=,100,总株数,最高级值,1、,田间观察和病情调查,举例：,7月25日，调查水稻品种稻瘟病（叶瘟）发病情况，共调查200片叶，其中：,0级 50片；1级 110；2级 35；3级 5,分级标准：0无病；1叶片病斑少于5个；2叶片病斑小而多于5个；3叶片病斑大而小；4叶片病斑大而多。,由此计算：,普遍率%=75%；病情指数=24.4,1、,田间观察和病情调查,（2）、发病时期、寄主品种、受害部位、症状及田间栽培管理、地势、土壤、昆虫活动等环境条件；,（3）、发病田与健康田间在栽培管理方面的差异（水肥、前茬作物、农药使用情况等）；,（4）、病田周围的环境；（大气环境、工厂、企业废水、废气的排放污染情况等）,一般根据田间分布状况可区别两类病害：非侵染性病害和侵染性病害。,2,、,症状鉴别,观察症状发生的部位、形态、大小、气味、颜色、质地（软、干），有无病征及病征类型等外部症状特点；有的还可借助显微镜解剖观察内部症状，如病毒病，在寄主表皮细胞内有内含体存在。线虫病可看到线虫虫体。,内含体形成的原因：,A、,病毒粒体的聚集；,B、,病毒与寄主组织的混合物；,C、,病毒侵入后诱发寄主产生的蛋白质体）,有些病害，在田间症状不明显，,采集新鲜病害标本,，带会室内保湿，待出现病征后再鉴定。,2,、,症状鉴别,标本采集：,（1）症状典型、有不同部位、不同阶段；,（2）真菌病害应有子实体；,（3）每种病害标本力求单纯。,（4）作好田间记录（记载内容：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集地点、日期、采集人等）。,2,、,症状鉴别,标本制作：,干燥和浸渍两种。,（1）干燥制作法：,蜡叶标本。用标本夹压好，压前整形，并勤换纸。,（2）浸渍制作法：,一般果实和多汁的，用浸渍法制作。,3、,病原鉴定,自然界中有许多病害，其病原不同，但症状相似。所以仅凭症状为依据，往往有误诊的可能。必须进一步作病原鉴定。,（1）非侵染性病害的病原鉴定,通常采用化学诊断法、人工诱发、化学治疗和指示植物鉴定法。,3、,病原鉴定,A、,化学诊断：,尤其对营养元素的缺乏或过量，盐碱、有害气体、有毒气体、通过取样化验结果与正常值比较，而确定病原。,B、,人工诱发,：对可疑病因，提供发病条件，如低温、药害、高温、人工强光照等，诱发相同症状的病害。,C、,化学治疗：,对可疑病因给以满足，如怀疑缺素，给以该元素，观察是否恢复或减轻。,D、,指示植物：,对木本植物可采用反映快的草本植物当指示植物确定病原。,3、,病原鉴定,（3）,柯赫氏法则：,柯赫氏法则（,Kochs postulates）:,Koch,是德国医生，细菌学家。由于他最先分离出炭疽、结核、霍乱病原菌而获得1905年诺贝尔医学生理学奖。他在研究人体和动物病害病原的基础上，于1882年提出证明某种微生物致病性的必要步骤，即柯赫氏法则。该法则不仅对人医、兽医起到巨大作用，对植物病害的研究也起到积极推动作用，现在仍在发挥着作用，但也并非完美无缺。,3、,病原鉴定,柯赫氏法则（,Kochs postulates）：,、,这种微生物常常与某种病害有联系，发生这种病害往往就有这种微生物的存在；,、这种微生物可以从病组织上分离而得到纯培养，并且可以在各种培养基上研究它的性状；,、将纯培养微生物接种到相同品种的健株上，使其有发病的可能性，接种后出现的症状和原来病株症状相同；,、从接种发病的植物上又能再分离到和原来性状相同的微生物。（1905年，,Smith,补充）,通过上述四步，得到确实证据，即可确认该微生物即为某种病害的病原物。,3、,病原鉴定,柯赫氏法则的局限性：,、对有些专性寄生物，如病毒、类病毒、菌原体、霜霉菌、白粉菌和一些锈菌等不能直接应用，须改进后应用。对非侵染性病害的诊断，也须改进后应用。,、排斥了其他微生物的颉颃作用；,、发病条件与实际有差别，受人为影响；,、只能证明一菌一病，不能证明两种及两种以上微生物的复合侵染。,3、,病原鉴定,（4）,分离培养的一般方法,、表面灭菌：,从病株上选取一小块病组织（选择新发病的组织或器官，以病健交接处分离效果最好，病原物生活力强，较少受杂菌污染）。,用0.1%的升汞或70%酒精表面消毒,，一般3分钟左右（应材料而异），然后用灭菌水冲洗数次。,3、,病原鉴定,、,分离：,组织分离：,将上述处理过的病组织块在无菌条件下，移到普通马铃薯洋菜（琼脂糖）培养基上（平面或斜面培养基均可）。,稀释分离：,若不用病组织，则将病组织上的病原物水洗后，直接配成悬浮液，经稀释后与熔化并冷却至45的培养基混合，倒入灭菌培养皿中；或将病组织压碎（多为细菌）配成悬浮液，划线法在培养基平面上分离培养。,3、,病原鉴定,PDA,培养基：,真菌多用,PDA（,马铃薯琼脂葡糖糖）培养基。,PDA,培养基配方：,马铃薯（去皮）：200,g,琼脂：1720,g,葡萄糖（或蔗糖）：20,g,水：1000,ml,3、,病原鉴定,牛肉蛋白胨培养基：,细菌多用牛肉蛋白胨培养基。,pH=7.2。,配方：,牛肉浸膏：3,g,酵母膏：0.5,g,蛋白胨：510,g,葡萄糖（或蔗糖）10,g,蒸馏水：1000,ml,3、,病原鉴定,（5）,接种方法,种传的：,拌种、浸种；,土传的：,菌土，浸根；,气传的,：喷雾、涂抹、注射、针刺、喷粉、扫接；,虫传的：,媒介虫传；,嫁接传：,菟丝子，嫁接；,二、植物病害诊断注意事项,复合症状（复合侵染）,两种以上病原所致，可各自表现，也可只表现一种。如白粉病和锈病复合侵染，各自表现；病毒和线虫危害只表现黄化等；,潜伏侵染,侵染了但未表现症状，带毒现象；隐症现象（高温隐症）,2、病害与虫害的区分：,虫害有虫孔、取食后的伤痕、缺刻，排泄物，隧道等；,二、植物病害诊断注意事项,3、病原物与腐生物的区分：,腐生物大量存在，多易生在死亡组织和腐烂、水分多的部位。这就要一方面分离培养鉴定，另外作病征观察时，注意病征出现的（普遍性、一致性和大量性）特点。但有时仍很难判断，就需要柯赫氏法则进一步验证。,小结,诊断的意义和目的；,诊断的步骤；,普遍率和病情指数的计算方法；,柯赫氏法则及其局限性；,接种方法；,标本采集注意事项；,诊断注意事项及相关概念等。,