微生物学5沙门菌弧菌.ppt

单击以编辑母版标题样式,单击以编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击以编辑母版标题样式,单击以编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击以编辑母版标题样式,单击以编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第三节 沙门菌属,(,Salmonella,),1.,种类繁多（,血清型超过,2500,个,),2.,宿主范围广，多对动物致病,3.,只对人类致病的占少数,伤寒沙门菌,甲型副伤寒沙门菌,肖氏伤寒沙门菌,希氏伤寒沙门菌,4.,动物沙门菌也可对人致病,鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌,、,肠炎沙门菌、鸭沙门菌,一、生物学性状,形 态 染 色,1.,未接种细菌,3.,分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性,2.,分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性,4.,不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢,5.,不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢,主要生化特性,2,、,沙门菌“,H”,抗原,-,不耐热鞭毛抗原,H,抗原分为第,1,相、第,2,相,第,1,相特异性高，以英文小写字母表示,第,2,相特异性较低，以阿拉伯数字表示,各组沙门菌可依,H,抗原不同分种、型，,H,抗原为特异性抗原。,化学本质为蛋白质,。,3,、,沙门菌“,Vi”,抗原,-,表面抗原,少数沙门菌（伤寒杆菌等）新从病人体内分离标本常有表面抗原,Vi-virulence,毒力,Vi,抗原可阻断,O,抗原与相应抗体的凝集，在细菌鉴定中应予注意。,Vi,抗原可刺激机体产生低效价抗体，随细菌清除，此抗体消失，故测定,Vi,抗体有利于检出,带菌者,。,二、致病性,1,、侵袭力,沙门菌有毒株经口感染 小肠末端派伊尔淋巴结,M,细胞 被吞噬 在吞噬细胞内增殖,（不完全吞噬）,致病物质,2,、内毒素,导致体温升高、白细胞数变化等,3,、肠毒素,个别沙门菌可产生肠毒素（鼠伤寒），作用 与大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素相似，引起胃肠炎,致病物质,致病菌,伤寒沙门菌，副伤寒甲、乙等沙门,传染源,病人、带菌者（尤为重要）,传播途径,经粪,-,口途径传播,易感者,人群普遍易感,所致疾病,1,、肠热症（伤寒、副伤寒）,血流（第？次菌血症、内毒素）,全身淋巴组织中大量增殖,（肝、脾、肾、骨髓）,伤寒沙门菌,胃 小肠末端,M,细胞,肠粘膜局部淋巴组织中增殖,局部炎症、症状,加重局部炎症,溃疡、穿孔,全身症状（发热、不适、全身疼痛）,潜伏期,/,前驱期（病程第,1,周,）,全身症状（稽留高热 肝脾肿大等）,极期（病程第,2-3,周,）,整个病期约一个月左右,少数患者病后带菌,（肠道内、胆囊带菌）,成为,重要的传染源,感染后体内有抗体产生，但对胞内菌无免疫作用，常用抗体测定作为伤寒病的辅助诊断,肥达反应。,细胞免疫逐渐增强,细胞内细菌被清除,逐步痊愈,病后免疫以细胞免疫为主，终身免疫,因摄入大量（,10,8,）其它沙门菌污染食物后引起,潜伏期,6-12,小时,主要表现,恶心、呕吐、腹痛、腹泻、,发热持续,3-5,天,2,、胃肠炎（食物中毒）,3,、败血症,多见小儿及免疫功能低下者,病原菌为其它沙门菌（猪霍乱、鼠伤寒等）,可致,全身感染,，败血症、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎等。局部胃肠炎少见。,4,、无症状带菌者,多见伤寒、副伤寒患者,带菌部位 胆囊,与年龄性别关系密切,三、微生物学检查,伤寒病人按病程不同取不同标本,第一周,第二周起,病程全程,食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物,败血症患者取血液,细菌的分离鉴定,标本,血,尿、粪便,骨髓,细菌分离鉴定步骤,粪便、尿,增菌培养,SS,中国兰,挑取不发酵,乳糖菌落,血清学鉴定：直接玻片凝集,血液,骨髓标本,伤寒杆菌表现,葡萄糖,+,乳糖,动力,+,H,2,S +/,双糖管,用已知的伤寒杆菌“,O”,、“,H”,抗原及副伤寒甲、乙的“,H”,抗原与不同稀释度的病人血清作,试管凝集试验,。根据血清中抗体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒病人的辅助诊断试验。,血清学试验,肥达反应（,Widal test),概念,1,、正常效价,O,抗体,1:80 H,抗体,1:160,PA,抗体,1:80 PB,抗体,1:80,2,、病程中动态观察,二份血清,第二次效价增长四倍以上有意义,3,、,O,、,H,抗体的区别,O-Ab-IgM,（特点）,H-Ab-IgG,（特点）,分析肥达反应结果,O,、,H,均不增高伤寒、副伤寒可能性小,O,增高、,H,不增高感染早期、其它沙门,菌感染,O,不增高、,H,增高预防接种后、非特异性回忆,反应,O,、,H,均增高伤寒、副伤寒可能性大,4,、抗体始终不升高的可能因素,早期使用抗生素、免疫功能低下等,例：发热两周后入院，肥达反应结果如下,甲：,O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:40,乙,O 1:80 H 1:320 PA 1:40 PB 1:40,丙,O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:320,丁,O 1:320 H 1:640 PA 1:40 PB 1:40,伤寒病人微生物检查阳性率,系列,1-,尿液中细菌培养；,系列,2-,血液中细菌培养；,系列,3-,粪便中细菌培养；,系列,4-,肥达反应抗体效价,阳,性,率,病程：发 病 后 周 次,细菌培养（按前面步骤进行）,Vi,抗体效价测定,Vi,抗体 1：10 有意义。,四、防治原则（了解）,预防接种：死菌苗、活菌苗（,Ty21a,株）,彻底治疗病人及带菌者,注意饮食卫生，防止病从口入,伤寒带菌者检查,变形杆菌属（简述,P,181,）,变形杆菌属肠杆菌科,有周身鞭毛，运动活泼，培养基中迁徙生长,能分解尿素（重要特征）,主要引起各种创伤感染、尿路感染等,变形杆菌的迁徙生长现象,变形杆菌的迁徙生长现象,变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分立克次体间有共同抗原成分。因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应，称外裴试验（,Weil-Felix test),辅助诊断斑疹伤寒等疾病,外裴试验,第,11,章,弧菌属,(,Vibrio,),为一大群菌体弯曲呈弧状的革兰阴性菌,主要特点：,有单鞭毛，运动活泼,培养要求为碱性环境,自然界广泛分布,尤其是水体中，,致病菌主要有霍乱弧菌、副溶血性弧菌。,与肠杆菌科不同的是氧化酶试验阳性。,自,1817,年已发生过,7,次世界性霍乱大流行，前,6,次由霍乱弧菌古典生物型引起，第,7,次由霍乱弧菌,El Tor,生物型引起。,霍乱弧菌古典,生物,型的发现与命名,1854,年首次发现，,1884,年分离成功,-Koch,第一节 霍乱弧菌,霍乱弧菌病原菌的发现与命名,EI Tor,弧菌的发现与命名,1905,年在埃及,EI Tor,检疫所检出，当时未发现与霍乱发病有关系。1961年确定为霍乱病原菌，命名为,EI Tor,型霍乱弧菌,1992,年出现新流行菌株,O139,，是目前在东南亚各国流行的主要病原菌，这是首次由非,O1,群霍乱弧菌引起的流行,霍乱弧菌病原菌的发现与命名,一、生物学性状,形态与染色,G,弧形，有单鞭毛，运动十分活泼。,霍乱弧菌 扫描电镜,15000,营养要求不高，普通培养基上,生长良好。,耐碱怕酸,pH8.89.0,碱性蛋白,胨水,/,碱性琼脂平板。,霍乱弧菌可在,无盐,的环境中生长，,其他弧菌不能。,培养特性,霍乱弧菌具有,O,抗原、,H,抗原,O,抗原 目前发现的已有,155,个血清群，,O1,、,O139,群引起霍乱，其他血清群引起人类胃肠炎等疾病。,O1,群又可分为,3,个血清型。,抗原构造与分型,霍乱弧菌,O1,群血清型,血清型,(,抗原组分,),01,多克隆抗体,01,单克隆抗体,A B C,出现,频率,造成,流行,小川型,(AB),常见,是,稻叶型,(AC),常见,是,彦岛型,(ABC),极少见,未知,抗原构造与分型,根据表型差异，,O1,群霍乱弧菌的每一个血清型还可分为,2,个生物型。,性 状,古典生物型,（,classical biotype,）,EI Tor,生物型,（,EI Tor biotype,）,溶解羊红细胞,+,凝集鸡红细胞,+,多粘菌素,+,群噬菌体裂解,+,1992,年在印度、盂加拉国暴发,O139,群霍乱流行。,O139,群在抗原性方面与,O1,群无交叉。,WHO,规定，霍乱的病原体包括,O1,群和,O139,群霍乱弧菌,O-1,群 有,3,个血清型，每一血清型均含有 二种生物型，古典生物型、,EI Tor,生物,型,二种生物型均可引起霍乱流行,抵抗力,对酸、含氯的化学 消毒剂敏感,正常胃酸,4 min,漂白粉：水,=1,：,4,，,1h,二、致病性,致病物质,1,、侵袭力,鞭毛,-,穿透能力强，穿过肠道粘液层，有利于细菌粘附于肠壁上皮细胞。,菌毛,-,定居因子，是细菌定居于小肠粘膜上皮细胞的重要因素。,2,、霍乱肠毒素,霍乱肠毒素化学结构与致病机理,性质,外毒素，是肠毒素的典型代表,结构,A+B,亚单位构成，,A,是毒性部分，,B,是运载和保护部分,致病机理,B,与肠粘膜上皮细胞受体,(GM1),结合，形成穿膜孔道,A,进入细胞内，,作用于细胞内腺苷环化酶 细胞内,cAMP,分泌增多,再吸收 剧烈吐泄,2,、所致疾病,-,霍乱,传染源,病人，带菌者,传播途径,经口传播,人类为唯一易感者,霍乱弧菌对酸敏感，正常胃酸可杀死细菌。,霍乱弧菌肠毒素作用后，引起剧烈腹泻、呕吐，典型病例大便为米泔水样。病人可严重脱水、酸中毒；最终因循环衰竭，死亡。,未经治疗者死亡率高达,50%75%,3,、免疫性,牢固的终身免疫,以体液免疫为主，出现保护性抗肠毒素抗体、抗菌抗体。,O139,与,O1,之间无交叉免疫：抗原基因由,rfb,区域编码，,O139,弧菌,O,抗原基因大部分缺失，使,O-1,菌苗对,O139,弧菌不起作用。,三、微生物学检查,霍乱为烈性传染病，传播速度极快。,对首例病例要及时诊断，封锁疫区，上报疫情。,一般根据病情诊断，必要时将可疑物密封保存于碱性蛋白胨水，送上级检疫部门。,直接镜检,-,动力、染色,分离培养,-,碱性培养基,快速诊断,-,免疫荧光,血清学鉴定,检查步骤,O1,群霍乱弧菌死菌苗肌肉注射,目前疫苗的研制转向口服疫苗、基因,工程减毒活疫苗,治疗：补液、抗菌,防治原则,嘉兴市秀城区某餐厅因承办婚宴发生一起食物中毒事件,。,2004,年,4,月,28,日中午,12,时左右，婚宴,10,桌，,100,人就餐。从当日,17,时起，就餐人群开始出现病人，至次日,11,时，中毒病人,31,人，罹患率为,31,。症状主要为腹痛、腹泻、恶心、呕吐等胃肠道症状。,副溶血性弧菌,广泛生存近岸海水和鱼贝类,等,食物中，温,、,热地带较多。我国华东沿海该菌的检出率为,57.4,66.5,，尤以夏秋季较高。海产鱼虾的带菌率平均为,4548,，夏季,可,高达,90,。腌制的鱼贝类带菌率也,可,达,42.4,。,第五节 副溶血弧菌,（了解）,副溶血弧菌（原名,-,嗜盐弧菌）,主要引起疾病,-,食物中毒,特点：,细菌嗜盐，易污染海产品，在海水中可存活,50,天。,培养要求,3.5%,氯化钠,潜伏期短，几小时即可发病。症状严重，可有水样、血水样便。恢复较快。,TCBS,培养基：显示绿色菌落，非蔗糖发酵,第,12,章 幽门螺杆菌,（,HP,）,G-,杆菌，弧形、,S,形或螺旋状,营养要求高，生长缓慢,尿素酶试验强阳性,抵抗力弱，易产生耐药性,生物学性状,Helicobacter pylori,，,是螺杆菌属的代表菌种,致病性,感染普遍，粪,-,口传播,与胃炎、十二指肠溃疡及胃癌有关,（,1983,年，澳大利亚皇家医院内科医生,马歇尔、沃伦，,2005,年医学诺贝尔奖获得者）,致病物质及致病机制不详,幽门螺杆菌,幽门螺杆菌,微生物学检查,有创检查 直接涂片脲酶试验,分离培养,无创检查 碳标记呼吸试验,血清学试验,传统方法,新法,PCR,、核酸探针技术,治疗,抗生素（联用），痢特灵（呋喃唑酮）,Salmonella,沙门菌属,Widal test,肥达反应,Vibrio,弧菌属,V,.cholera,霍乱弧菌,non-agglutinating,Vibrio,NAG,不凝集弧菌,本章专业英语词汇,了解主要沙门菌的生化反应。,伤寒沙门菌的主要致病因素及伤寒发病过程。,何谓肥达反应？如何观察分析肥达反应结果？,弧菌属的,O,抗原分型及与霍乱发病的关系。,霍乱弧菌的致病因素。,霍乱肠毒素的致病机理。,本 章 要 点,