富脯氨酸抗菌肽的功能与作用机制.pdf

第4 6卷3期2 0 2 3年9月 辽宁师范大学学报(自然科学版)J o u r n a l o fL i a o n i n gN o r m a lU n i v e r s i t y(N a t u r a lS c i e n c eE d i t i o n)V o l.4 6 N o.3S e p.2 0 2 3 收稿日期:2 0 2 2-1 1-2 3作者简介:王继红(1 9 6 6-),女,辽宁大连人,辽宁师范大学教授,博士.E-m a i l:j i h o n g w a n g 9 9 9h o t m a i l.c o m 文章编号:1 0 0 0-1 7 3 5(2 0 2 3)0 3-0 3 5 4-0 9 D O I:1 0.1 1 6 7 9/l s x b l k 2 0 2 3 0 3 0 3 5 4富脯氨酸抗菌肽的功能与作用机制王继红,韩雯旭,宁淑香(辽宁师范大学 生命科学学院,辽宁 大连 1 1 6 0 8 1)摘 要:富脯氨酸抗菌肽(p r o l i n e-r i c ha n t i m i c r o b i a l p e p t i d e s,P r AMP s)是最早分离自动物的线性多肽,具有较高的抗菌活性且细胞毒性较低,在天然免疫中具有重要的作用,是对抗多种耐药病原体的理想药物.富脯氨酸抗菌肽主要有3种来源:昆虫、哺乳动物和植物,其中,绝大多数P r AMP s来自前两种动物,只有少部分来自植物.这些P r AMP s的最大特点就是都富含脯氨酸,对革兰氏阴性菌和少部分革兰氏阳性菌、真菌均具有抑制作用.P r AMP s的作用机制不同于其他抗菌肽(a n t i m i c r o b i a lp e p t i d e s,AMP s)的膜破坏作用模式,其是通过进入细菌细胞质后与其内部靶点(D n a K蛋白)结合的模式对D n a K的生物学功能进行抑制,从而最终导致细菌死亡.这一作用机制对于抗菌新药的开发很有意义.除了抗菌作用外,P r AMP s还具有其他重要的生物学功能,其在抑制炎症反应、刺激血管生 成 以 及 对N F-B信 号 的 影 响 等 方 面 都 具 有 重 要 作 用.这 些 发 现 表 明P r AMP s在伤口修复、炎症、缺血-再灌注损伤以及诱导血管生成等方面具有很好的应用前景.关键词:抗菌肽;富脯氨酸抗菌肽;抗菌机制;D n a K中图分类号:Q 5 1 文献标识码:A随着后抗生素时代的来临,多重耐药细菌无处不在,寻找新的抗菌药物成为亟待解决的热点问题.抗菌肽(AMP s)代表着一类有前途的化合物,有助于解决这一全球性问题.AMP s对细菌的破坏作用主要得益于其膜破坏作用模式,这种作用模式会造成细菌细胞裂解进而导致细菌死亡1.然而,随着对AMP s研究的深入,发现了许多非溶性的AMP s具有细胞内作用模式,富脯氨酸抗菌肽(P r AMP s)就是这样的一类抗菌肽2-4.富脯氨酸抗菌肽是一类主要来源于昆虫、哺乳动物和植物的线性多肽,这些不同来源的P r AMP s都具有抗菌活性,在天然免疫中具有重要的作用5.P r AMP s通常是膜渗透性的,从而抑制蛋白质合成,达到杀菌的效果6.本实验室一直致力于海洋生物活性肽的研究,在对海参c D NA文库的生物信息学分析中发现了能翻译出海参富脯氨酸肽的基因序列.因此,海参富脯氨酸肽具有什么功能及其作用机制引起了我们的兴趣.为了对其进行全方位研究,笔者将从富脯氨酸抗菌肽的来源、分类、功能和作用机制等方面进行综述,为未来对富脯氨酸抗菌肽进行更有效的药物开发和应用提供参考.第3期王继红等:富脯氨酸抗菌肽的功能与作用机制3 5 5 1 富脯氨酸抗菌肽的来源据文献报道,富脯氨酸抗菌肽主要来源于昆虫、哺乳动物和部分植物7.第一个P r AMP s是发现于2 0世纪8 0年代末的a p i d a e c i n8.C a s t e e l s等将亚致死剂量的大肠杆菌注射到成年蜜蜂的体腔中,用反向高效液相色谱法鉴定出3种活性形式的a p i d a e c i n(a p i d a e c i na,a p i d a e c i nb,a p i d a e c i n),并进一步对其进行了纯化与表征8.这3种a p i d a e c i n的吸收特性以及用胰蛋白酶处理后其活性的丧失均表明,它们至少部分是由多肽物质组成的.氨基酸组成和序列分析证实了这一点,且发现其高脯氨酸含量(3 3%)是值得特别关注的(图1).a p i d a e c i n的发现很快被其他昆虫和哺乳动物的P r AMP s所证实.昆虫的P r AMP s包括来自蜜蜂(A p i sm e l l i f e r a)的a b a e c i n9,来自黑腹果蝇(D r o s o p h i l a m e l a n o-g a s t e r)的d r o s o i n1 0,来自无翅红蝽(P y r r h o c o r i sa p t e r u s)的p y r r h o c o r i c i n1 1,来自红尾碧蝽(P a l o m-e n ap r a s i n a)的m e t a l n i k o i n-11 2和来自脊胸长蝽(O n c o p e l t u s f a s c i a t u s)的o n c o c i n1 3-1 4.在甲壳纲动物中,S t e n s v a g等从蜘蛛蟹(H y a s a r a n e u s)中分离出P r AMP sA r a s i n 11 5,并且S c h n a p p等从滨蟹(C a r-c i n u sm a e n a s)中分离得到一个与B a c 7相似的P r AMP s1 6.在反刍动物奶牛(如B o s t a u r u s)1 7、绵羊(如O v i sa r i e s)和山羊(如C a p r ah i r c u s)1 8-1 9中发现了两种不同的哺 乳动物P r AMP s,由于这两 种成熟肽 的分子量分别 为5和7k D a,因此被 命名 为b a c t e n e c i n5和b a c t e n e c i n7(B a c 5和B a c 7).之后,在猪小肠中分离出来了一种与B a c 7相似的P r AMP s同源物,因其由3 9个氨基酸组成,故被命名为P R-3 92 0.在绵羊基因组中也发现了其他类似b a c t e n e c i n的P r AMP s,如B a c 4、B a c 6.5和B a c 1 1,但仍有待进一步鉴定1 8.随着对P r AMP s研究的不断深入,在部分植物中也发现了P r AMP s的存在.C a o等从甘蓝型油菜中分离出了首个在植物中具有富脯氨酸抗菌肽特征的成员 B n P R P 1,并通过基因组序列分析发现,其他十字花科植物中也具有其同源序列2 1.图1 从蜜蜂的免疫淋巴中纯化得到的a p i d a e c i n sa,b和的氨基酸序列(根据参考文献8 修改)F i g.1 T h ea m i n oa c i ds e q u e n c e f o ra p i d a e c i n sa,ba n d,p u r i f i e df r o mi mm u n e l y m p ho fh o n e y b e e s(m o d i f i f i e df r o mt h er e f e r e n c e8)2 富脯氨酸抗菌肽的分类与结构特点富脯氨酸抗菌肽(P r AMP s)绝大多数发现于昆虫和哺乳动物中,近年来也有部分来自植物,其富含脯氨酸并且带阳电荷,原因是含有的精氨酸多而赖氨酸少,属于在脯氨酸残基中富集的阳离子肽组,与精氨酸残基一起以保守模式开放排列2 2.从以往文献中总结出了一些研究颇多的P r AMP s,并强调了这些肽的关键特征(表1).P r AMP s按来源分,主要分为3大类:来自哺乳动物的P r AMP s,来自昆虫和其他脊椎动物的P r AMP s,来自植物的P r AMP s.3 5 6 辽宁师范大学学报(自然科学版)第4 6卷表1 文献中记录的天然P r AMP s(根据参考文献2 3 改编)T a b l e1 N a t u r a l l yo c c u r r i n gP r AMP s i d e n t i f i e df r o mt h e l i t e r a t u r e(m o d i f i f i e df r o mt h er e f e r e n c e2 3)名称序 列长度P r o/%A r g/%净电荷数A b a e c i nYV P L P NV P Q P G R R P F P T F P GQ G P F N P K I KWP Q3 23 16+4A p i d a e c i naGNN R P VY I P Q P R P P HP R I1 83 31 7+3A p i d a e c i nbG NN R P VY I P Q P R P P H P R L1 83 31 7+3A p i d a e c i nC d 3+G K P S K P R P A P I K P R P P HP R L2 04 01 5+6A r a s i n 1S RWP S P G R P R P F P G R P K P I F R P R P C2 53 62 4+7B a c 5(12 3)R F R P P I R R P P I R P P F Y P P F R P P I2 34 32 6+6B a c 7(13 5)R R I R P R P P R L P R P R P R P L P F P R P G P R P I P R P L P F P3 54 63 1+1 1B n P R P 1P P T QN P S MA P P T QN P Y GQ PMT P P TQN P Y G Q PMA P P 3 53 700B S N-3 7F R P P I R R P P I R P P F Y P P F R P P I R P P I F P P I R P P F R P P3 74 92 2+8D r o s o c i nG K P R P Y S P R P T S H P R P I R V1 93 22 1+5F o r m a e c i n1G R P N P VNNK P T P Y P HL1 63 16+2F o r m a e c i n2G R R N P NNK P T P HP R L1 52 72 0+4H e l i o c i nR F I HP T Y R P P P Q P R R P V I MR A2 12 92 4+5M e t a l n i k o w i n1V D K P D Y R P R P R P P NM1 53 32 0+2O n c o c i nV D K P P Y L P R P R P P R R I YN R1 93 22 6+5P e n a e i d i n-1Y R G G Y T G P I P R P P P I G R P P L R L VV C A C Y R LS V S D A R N C C I K F G S C CHL VK5 01 41 2+7P R-3 9R R R P R P P Y L P R P R P P P F F P P R LP P R I P P G F P P R F P P R F P3 94 92 6+1 0P y r r h o c o r i c i nV D K G S Y L P R P T P P R P I YN R N2 02 51 5+3R i p t o c i nV D KG G Y L P R P T P P R P VY R S1 92 61 6+3T u r 1 AR R I R F R P P Y L P R P G R R P R F P P P F P I P R I P R I P3 23 83 1+1 0T u r 1 BR R I P FWP P NWP G PWL P PWS P P D F R I P R I L R K R3 23 11 9+62.1 来自哺乳动物的P r AMP s从哺乳动物中分离出的所有富脯氨酸抗菌肽都属于AMP s的c a t h e l i c i d i n家族.c a t h e l i c i d i n是一个有趣的抗菌肽前体家族,它具有一个保守的前区,名为c a t h e l i n,随后是一个高度可变的C末端结构域,对应于蛋白水解后的活性肽2 4.这类P r AMP s对大部分革兰氏阴性菌及少数革兰氏阳性菌均有抗菌作用:较多实验证明的包括大肠杆菌、肠道沙门氏菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌等.B a c 5、B a c 7和P R-3 9是分别来自牛和猪的中性粒细胞以及绵羊和山羊的几个同源物中的P r AMP s.B a c 7具有一个特殊的一级结构,由一个高阳离子的N端区组成,其中,前1 6个残基中具有8个精氨酸,其余1 4个残基由3个疏水串联重复序列组成2 5.该肽对革兰氏阴性菌具有很强的抗菌活性,在革兰氏阴性败血症休克实验的大鼠模型中能够中和内毒素,对哺乳动物细胞无毒2 6.此外,合成的B a c 7片段能够在哺乳动物细胞质膜上易位但不产生细胞毒性2 7.B e n i n c a s a等合成了B a c 7(13 5)和B a c 7(11 6)肽片段,证明了B a c 7对革兰氏阴性菌(大肠杆菌、肠道沙门菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯杆菌)和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、粪肠球菌和屎肠球菌)临床分离株(包括多重耐药菌株)均有体外抗菌广谱活性2 8.第3期王继红等:富脯氨酸抗菌肽的功能与作用机制3 5 7 2.2 来自昆虫和其他脊椎动物的P r AMP s昆虫产生的富脯氨酸抗菌肽通常比哺乳动物产生的短,属于短的富含脯氨酸的AMP s家族,包括d r o s o c i n、p y r r o c o r i c i n、a p i d a e c i n、f o r m a e c i n、l e b o c i n和a b a e c i n2 9,它们在氨基酸组成和序列基序模式上非常相似.这些短P r AMP s因其特殊的抗菌机制而引起特别关注.迄今为止,最具特征的短P r AMP s是a p i d a e c i n型肽(也称为a p i d a e c i n).a p i d a e c i n主要对革兰氏阴性菌具有较强的抗菌活性,有研究表明其对革兰氏阴性菌的最小抑菌浓度区间为0.2 76 4M.此外,很多实验结果也证明了它对其他病原微生物,如革兰氏阳性菌、真菌、病毒和原虫也具有一定的抑制作用.a b a e c i n的N端与a p i d a e c i n的N端十分相似,前者具有更强的抗革兰氏阴性菌的广谱活性9,但其对真菌具有一定的抑制作用,且对农药具有一定的解毒效果.l e b o c i n s是富含脯氨酸和O-糖基化的3 2残基肽,该类型肽对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和一些真菌均有活性3 0.R a o等通过实验证明了合成的M a n d u c as e x t al e b o c i n-B和l e b o c i n-C的N端富脯氨酸肽对革兰氏阴性(如粘质沙雷氏菌和鼠伤寒沙门氏菌)、革兰氏阳性(如金黄色葡萄球菌和蜡状芽孢杆菌)以及真菌(如新隐球菌)均具有抑制作用3 1.2.3 来自植物的P r AMP s目前在某些植物中也发现了富脯氨酸抗菌肽的存在.C a o等对AMP s进行虚拟筛选时,发现一个编码新型P r AMP s的甘蓝型油菜基因.该基因编码一种含有1 3个脯氨酸残基的肽,将这种特殊的P r AMP s命名为B n P R P 1.B n P R P 1与已知的来自猪的富脯氨酸抗菌肽S P-B具有4 0.5%的同源性.活性分析表明,B n P R P 1对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌具有较强的抗菌活性,且对核盘菌、毛霉、稻瘟病菌和灰霉病菌等病原菌也有较强的抗真菌活性.M o y e r等采用质谱分析方法对药用植物苋菜(Am a r a n t h u s t r i c o l o r)中的AMP s进行了检测,发现了一种新型短链富脯氨酸抗菌肽,不仅可显著抑制金黄色葡萄球菌L A C,同时也显示出对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抗菌能力3 2.3 富脯氨酸抗菌肽的功能与作用机制3.1 富脯氨酸抗菌肽的抗菌功能与作用机制不同于常见的抗菌肽作用于病原体细胞膜的特点,富脯氨酸抗菌肽(P r AMP s)具有细胞内靶点,其通过影响入侵生物体的代谢而对病原体起到抑制作用3 3.大多数AMP s通过破坏细菌膜,引起代谢物外流和细胞破坏,从而达到杀死细菌的目的.然而,P r AMP s主要使用非裂解机制杀灭细菌,基本上不影响膜的完整性.3.1.1 P r AMP s的非裂解机制C a s t e e l s等首次对这种模式进行了研究,证明了富脯氨酸抗菌肽a p i d a e c i n和P R-3 9二者均可以抑制细菌生长而不引起细胞裂解2,3 4.之后,C a s t l e等的研究表明a p i d a e c i n被细菌内化,说明这种P r AMP s不是通过破坏细菌细胞膜抑菌,而是通过抑制重要的代谢途径从内部杀死微生物3.但是在S k e r l a v a j等的研究结果中,与前两种抗菌肽相比,B a c 7在特定条件下可渗透革兰氏阴性菌的包膜,其渗透活性较高,这种情况可能是由于其具有更多、更长的疏水肽3 5.又发现B a c 7的短片段(如B a c 7(13 5)对肠杆菌科具有双重作用模式,证实了以上结论3 6.裂解模式仅为B a c 7的次要模式,仅在高肽浓度时出现,该浓度远远高于抑菌和杀菌水平.P r AMP s的非裂解作用机制表明存在一种或多种转运蛋白,将其摄入细菌细胞中.M a t t i u z z o等研究表明,昆虫和哺乳动物P r AMP s主要利用细胞膜蛋白S b mA通过跨内膜的电化学质子梯度转运P r AMP s3 7.在-蛋白细菌(如大肠杆菌、痢疾杆菌和肺炎克雷伯氏菌)和部分、-蛋白细菌(如鲍曼不动杆菌、苜蓿根瘤菌和枯草杆菌)中发现与S b mA的同源物,因此推测S b mA蛋白在其他物种中也可能具有转运P r AMP s的作用3 8.随后,K r i z s a n等发现P r AMP s摄取的第二种转运蛋白,即内膜蛋白M d t M3 9.若大肠杆菌中同时缺失了S b mA和M d t M,则细菌对某些P r AMP s的敏感性也会随之降低.3 5 8 辽宁师范大学学报(自然科学版)第4 6卷3.1.2 P r AMP s的假定内部靶点 D n a K实验结果表明,p y r r h o c o r i c i n、d r o s o c i n和a p i d a e c i n均能特异结合7 0k D a的细菌热休克蛋白D n a K,因此推测D n a K可能为P r AMP s的假定内部靶点4 0.D n a K通过其底物结合结构域与底物蛋白内的短疏水肽段的短暂结合,来协助细胞内的多种蛋白质折叠过程,因此该基因的缺失可能会对细菌细胞生长产生严重影响,所以推测D n a K的抑制可能是P r AMP s发挥作用的最终机制4 1.D n a K有2个主要的生理功能:AT P酶活性和折叠蛋白质4 2.K r a g o l等4 3通过实验证明L-氨基酸合成的具有生物活性的p y r r h o c o r i c i n(L-p y r r h o c o r i c i n)可以抑制重组D n a K的AT P酶活性,而无活性的全D-p y r r h o c o r i c i n类似物以及膜活性抗菌肽c e c r o p i nA和m a g a i n i n2则没有这种抑制作用.K r a g o l等接着测定了大肠杆菌中碱性磷酸酶和-半乳糖苷酶的活性,研究了p y r r h o c o r i c i n对D n a K另一重要生物功能 协助错误折叠的蛋白重新折叠4 3.结果显示,p y r r h o c o r i c i n以肽浓度依赖性的方式强烈抑制大肠杆菌T G-1培养株的-半乳糖苷酶活性,在引入p y r r h o c o r i c i n后的1h内检测到大肠杆菌T G-1培养株的-半乳糖苷酶活性被显著抑制;在6h后,d r o s o i n组也显示出对-半乳糖苷酶的抑制作用.而对细菌培养物的碱性磷酸酶来说,只有p y r r h o c o r i c i n和d r o s o i n能够抑制活大肠杆菌细胞中多种碱性磷酸酶的活性.这些结果说明,p y r r h o c o r i c i n和d r o s o i n能够抑制伴侣辅助蛋白的折叠,对于其抑制机制,K r a g o l等提出p y r r h o c o r i c i n或d r o s o i n与D n a K的结合可以阻止多螺旋盖子在其肽结合口袋上的移动,永久关闭腔,从而抑制了伴侣辅助的蛋白质折叠4 3.C h e s n o k o v a等则认为这些抗菌肽通过结合其常规底物结合位点与D n a K相互作用,因此它们的抗菌活性是细菌D n a K竞争性抑制的结果4 4.关于哺乳动物P r AMP s,在使用L-B a c 7(13 5)功能化亲和树脂寻找细菌细胞质相互作用物的过程中,唯一一种从大肠杆菌蛋白裂解物中能够特异性保留高亲和力的蛋白质也是D n a K,并发现该肽在体外以剂量依赖性方式抑制完整的D n a K/D n a J/G r p E/AT P分子伴侣系统的蛋白质折叠复性活性4 5.因此,昆虫和哺乳动物P r AMP s杀死敏感细菌的机制可能与它们通过结合D n a K从而抑制蛋白质折叠及重折叠的能力有关4 6.但不能排除P r AMP s通过结合除D n a K之外的其他内部靶位来灭活细菌,具体靶点仍需探究.3.2 富脯氨酸抗菌肽的其他功能与作用机制目前对富脯氨酸抗菌肽除抗菌作用以外的功能的研究,主要集中在来自哺乳动物的P r AMP s,尤其是对P R-3 9的研究.P R-3 9是从猪小肠中分离得到的c a t h e l i c i d i n相关抗菌肽家族的成员,在组织中的巨噬细胞、多形核白细胞和角质形成细胞的溶酶体中被激活4 7.c a t h e l i c i d i n在哺乳动物抵抗细菌感染的天然免疫防御中起着关键作用,可以刺激血管生成并抑制炎症反应4 8.3.2.1 抑制炎症反应P R-3 9最初从猪小肠中分离得到,后又在猪和人中性粒细胞中被鉴定出来,接着在伤口液体中也分离得到了该肽.G a l l o等已证明在伤口液中它能诱导间充质细胞表达多配体聚糖(s y n d e c a n)4 9.而s y n d e c a n被认为是伤口修复的介质,因此,P R-3 9除了具有抗菌特性外,在炎症过程和组织修复中可能发挥更大的作用5 0.为了证明这一结论,S h i等经过研究发现,P R-3 9通过与胞浆成分S r c同源性3结构域的相互作用,能够阻断NA D P H氧化酶的组装,从而抑制NA D P H的活性5 1.而NA D P H氧化酶利用NA D P H作为电子供体,催化分子氧还原为超氧阴离子(O2-).虽然O2-和其他活性氧中间体是宿主防御的重要组成部分,但这些剧毒氧化剂在炎症性疾病和缺血-再灌注损伤中会造成严重的组织损伤5 2.P R-3 9通过抑制NA D P H的活性,可以调节NA D P H氧化酶产生超氧阴离子(O2-),从而限制炎症过程中产生的过度组织损伤.在该研究中,S h i等发现P R-3 9同时具有了抗菌和氧化酶抑制活性,这两种相反活性的发现提示了中性粒细胞氧化和非氧化抗菌系统之间的相互作用机制,并可作为设计第3期王继红等:富脯氨酸抗菌肽的功能与作用机制3 5 9 在慢性或急性炎症状态下有效抑制氧化剂生成的药物的基础5 1.在该研究的基础上,I k e d a等发现通过抑制内皮细胞和中性粒细胞的NA D P H氧化酶来抑制超氧化物的产生,从而达到保护心脏的目的5 3.以大鼠为实验模型,观察到P R-3 9减少了PMN对冠状血管内皮的黏附,导致再灌注后心脏组织中PMN的浸润显著减少,因此P R-3 9可缓解PMN诱导的离体缺血-再灌注大鼠心脏收缩功能障碍.Z h a n g等实验结果表明,P R-3 9在感染中所具有的抗菌和抗炎免疫调节作用,可以有效改善肠出血型大肠杆菌O 1 5 7:H 7诱导的上皮屏障损伤,以及肠道内免疫和菌群稳态紊乱,表明P R-3 9可能是治疗肠出血型大肠杆菌O 1 5 7:H 7相关肠道疾病的优秀潜在药物5 4.3.2.2 促进血管生成血管生成是一个严格调控的过程,在正常组织中没有明显的血管生长现象.在先前的研究中发现许多肝素结合生长因子,包括血管内皮生长因子(V E G F)、成纤维细胞生长因子(F G F 1和F G F 2)等能够在某些炎症反应的组织中促进血管生成5 5-5 7.因此普遍认为组织损伤和炎症是诱导血管生成的必要条件,但这一级联反应中的分子调控机制还尚不清楚.L i等研究发现,在体外细胞和小鼠体内的实验中,P R-3 9均具有诱导血管生成的能力5 8.P R-3 9及其相关化合物可作为血管生成的有效诱导因子,选择性抑制了泛素-蛋白酶体依赖性的缺氧诱导因子(h y p o x i a-i n d u c i b l ef a c t o r-1,H I F-1)的降解,从而加速体外血管结构的形成,并加强小鼠的心肌血管系统5 9.3.2.3 对N F-B信号的影响核因子N F-B抑制剂I B 是N F-B信号通路中的重要成员,主要调节N F-B的激活与转录.在细胞质中,N F-B与I B 结合后以一种潜伏态存在,两者的结合能阻止N F-B进入细胞核从而使其不能发挥其促进转录的功能6 0.研究发现,P R-3 9能够可逆地结合到2 6 S蛋白酶体的 7亚单位上,并通过泛素-蛋白酶体途径阻断N F-B抑制剂I B 的降解,而不影响蛋白酶体的整体活性6 1.抑制I B 降解可消除在细胞培养和急性胰腺炎及心肌梗死小鼠模型中N F-B依赖性基因表达的诱导,在小鼠模型中,持续输注P R-3 9肽可显著减小心肌梗死面积6 2.综上,P R-3 9及其相关肽可能为调节细胞功能和控制N F-B依赖性基因表达提供新的治疗手段.4 结 语目前,对富脯氨酸抗菌肽独特的抗菌作用机制探究的还不够深入透彻,有待于进一步研究.理论上,按此全新的抗菌作用机制完全可能开发出一大类新的高效抗生素.另外,富脯氨酸抗菌肽作为一种载体把药物转运到哺乳动物细胞内的可行性以及这类抗菌肽的其他药理作用也越来越引起人们的高度关注.参考文献:1 L UOY,S ON G Y.M e c h a n i s mo fa n t i m i c r o b i a lp e p t i d e s:A n t i m i c r o b i a l,a n t i-i n f l a mm a t o r ya n da n t i b i o f i l ma c t i v i t i e sJ.I n tJM o lS c i,2 0 2 1,2 2(2 1):1 1 4 0 1.2 C A S T E E L SP,T EMP S T P.A p i d a e c i n-t y p ep e p t i d ea n t i b i o t i c sf u n c t i o nt h r o u g han o n-p o r e f o r m i n g m e c h a n i s mi n v o l v i n gs t e-r e o s p e c i f i c i t yJ.B i o c h e mB i o p h y sR e sC o mm u n,1 9 9 4,1 9 9(1):3 3 9-3 4 5.3 C A S T L EM,NA Z A R I ANA,Y ISS,e t a l.L e t h a l e f f e c t so f a p i d a e c i no nE s c h e r i c h i ac o l ii n v o l v es e q u e n t i a lm o l e c u l a r i n t e r a c t i o n sw i t hd i v e r s e t a r g e t sJ.JB i o lC h e m,1 9 9 9,2 7 4(4 6):3 2 5 5 5-3 2 5 6 4.4 S C O C C H IM,T O S S IA,G E NNA R OR.P r o l i n e-r i c ha n t i m i c r o b i a l p e p t i d e s:C o n v e r g i n gt oan o n-l y t i cm e c h a n i s mo f a c t i o nJ.C e l lM o lL i f eS c i,2 0 1 1,6 8(1 3):2 3 1 7-2 3 3 0.5 V I T A L IA.P r o l i n e-r i c hp e p t i d e s:M u l t i f u n c t i o n a l b i o a c t i v em o l e c u l e s a sn e wp o t e n t i a l t h e r a p e u t i cd r u g sJ.C u r rP r o t e i nP e p tS c i,2 0 1 5,1 6(2):1 4 7-1 6 2.6 L IW,T A I L HA D E SJ,OB R I E N-S I MP S ONN M,e t a l.P r o l i n e-r i c ha n t i m i c r o b i a l p e p t i d e s:P o t e n t i a l t h e r a p e u t i c s a g a i n s t a n t i b i o t-i c-r e s i s t a n tb a c t e r i aJ.Am i n oA c i d s,2 0 1 4,4 6(1 0):2 2 8 7-2 2 9 4.3 6 0 辽宁师范大学学报(自然科学版)第4 6卷7 S E E F E L D TAC,G R A FM,P E R E B A S K I N EN,e t a l.S t r u c t u r e o f t h em a mm a l i a na n t i m i c r o b i a l p e p t i d eB a c 7(11 6)b o u n dw i t h i nt h ee x i t t u n n e l o f ab a c t e r i a l r i b o s o m eJ.N u c l e i cA c i d sR e s,2 0 1 6,4 4(5):2 4 2 9-2 4 3 8.8 C A S T E E L SP,AMP EC,J A C O B SF,e t a l.A p i d a e c i n s:A n t i b a c t e r i a l p e p t i d e s f r o mh o n e y b e e sJ.EMB OJ,1 9 8 9,8(8):2 3 8 7-2 3 9 1.9 C A S T E E L SP,AMP EC,R I V I E R EL,e t a l.I s o l a t i o na n dc h a r a c t e r i z a t i o no f a b a e c i n,am a j o ra n t i b a c t e r i a l r e s p o n s ep e p t i d e i nt h eh o n e y b e e(A p i sm e l l i f e r a)J.E u r JB i o c h e m,1 9 9 0,1 8 7(2):3 8 1-3 8 6.1 0 B U L E TP,D I MA R C QJL,HE T RUC,e t a l.An o v e l i n d u c i b l e a n t i b a c t e r i a l p e p t i d eo fD r o s o p h i l ac a r r i e sa nO-g l y c o s y l a t e ds u b-s t i t u t i o nJ.JB i o lC h e m,1 9 9 3,2 6 8(2 0):1 4 8 9 3-1 4 8 9 7.1 1 C O C I AN C I C HS,D U P ON TA,HE G YG,e ta l.N o v e l i n d u c i b l ea n t i b a c t e r i a lp e p t i d e s f r o mah e m i p t e r a ni n s e c t,t h es a p-s u c k i n gb u gP y r r h o c o r i sa p t e r u sJ.B i o c h e mJ,1 9 9 4,3 0 0(P t 2):5 6 7-5 7 5.1 2 F EHL B AUMP,B U L E TP,C HE R NY S HS,e t a l.S t r u c t u r e-a c t i v i t ya n a l y s i s o f t h a n a t i n,a 2 1-r e s i d u e i n d u c i b l e i n s e c t d e f e n s ep e p-t i d ew i t hs e q u e n c eh o m o l o g yt o f r o gs k i na n t i m i c r o b i a l p e p t i d e sJ.P r o cN a t lA c a dS c iUSA,1 9 9 6,9 3(3):1 2 2 1-1 2 2 5.1 3 S C HN E I D E R M,D O R NA.D i f f e r e n t i a l i n f e c t i v i t yo f t w oP s e u d o m o n a ss p e c i e sa n dt h e i mm u n er e s p o n s e i nt h em i l k w e e db u g,O n c o p e l t u s f a s c i a t u s(I n s e c t a:H e m i p t e r a)J.J I n v e r t e b rP a t h o l,2 0 0 1,7 8(3):1 3 5-1 4 0.1 4 KNA P P ED,P I AN T AV I GNAS,HAN S E NA,e t a l.O n c o c i n(V D K P P Y