1、2734Central South Pharmacy.October 2023,Vol.21 No.10 中南药学 2023 年 10 月 第 21 卷 第 10 期覆盆子及其易混品桉叶悬钩子的鉴别邓雯姬,杨洁瑜(广州市药品检验所,广州510160)摘要:目的探究覆盆子及其易混品桉叶悬钩子的生药特征,为有效区分两者提供依据。方法采用体式显微镜对两者聚合果和小核果的构造特征进行观察,并通过显微镜对两者横切面和粉末显微特征展开比较。结果覆盆子宿萼短于聚合果,小核果顶端密被茸毛表面有横纹,非腺毛短而平直;桉叶悬钩子无宿萼基部中心深凹,小核果表面无横纹全身密被茸毛,非腺毛长而弯曲。结论本法可用于鉴别覆
2、盆子与桉叶悬钩子,有效避免市场混用误用。关键词:覆盆子;桉叶悬钩子;生药学特征;鉴别中图分类号:R283文献标识码:A文章编号:1672-2981(2023)10-2734-04doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2023.10.029Identification of Rubus chingii Hu and Rubus eucalyptus FockeDENG Wen-ji,YANG Jie-yu(Guangzhou Institute for Drug Control,Guangzhou 510160)Abstract:Objective To determine
3、the pharmacognostic characteristics of Rubus chingii Hu and Rubus eucalyptus Focke to provide reference for their identification.Methods The structural characteristics of the aggregate fruit and drupes were explored by stereomicroscopy.The characteristics of the tissue and powder were observed by op
4、tical microscope.Results The persistent calyx of Rubus chingii Hu was shorter than that of the aggregate fruit.The drupe with surface striation was covered with villus on the top,and the non-glandular hair was short and straight.The base of Rubus eucalyptus Focke was deeply recessed without persiste
5、nt calyx.The drupe without surface striation was covered with whole villus,and the non-glandular hair was long and winding.Conclusion This method can identify of Rubus chingii Hu and Rubus eucalyptus Focke and effectively avoid the mixed and misuse of both.Key words:Rubus chingii Hu;Rubus eucalyptus
6、 Focke;pharmacognostic characteristics;discrimination作者简介:邓雯姬,女,主管中药师,主要从事药品质量检验及研究,email:覆盆子(Rubus chingii Hu)始载于 神农本草经,原药材为蔷薇科的华东覆盆子,以其果实入药,主要分布在江西、浙江、安徽等地,是益肾固精常用的中药材1-2。覆盆子主要成分为黄酮类、甾类和萜类,这类物质临床药理作用多为抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化3-5。此外覆盆子还含有酚酸活性成分6,中医理论记载性味酸能缩、能涩,固临床上治疗漏尿遗尿、阳痿遗精效果显著7。由于用药范围广,市场需求量大,其采收和临床应用常出现易混品
7、混淆误用的情况。目前已有很多研究对覆盆子的易混品进行鉴别,如绵果悬钩子8、山莓9、树莓10、毛栓莓11等。但未有对其易混品桉叶悬钩子相关的研究。桉叶悬钩子 Rubus eucalyptus Focke,药材名为软覆盆子,来源于蔷薇科植物的干燥果实,主要分布陕西、甘肃、四川等地。现收载于四川省中药材标准(2010 年版),但该标准仅对软覆盆子的整体性状及粉末显微特征进行鉴别,且以文字形式记载。本文运用体式显微镜比较覆盆子及软覆盆子的外观形态和内在结构的区别,并采用光学显微镜观察两者横切面和粉末的显微特征,从宏观到微观对两者开展比较研究,为两药的鉴别提供参考依据。1材料1.1仪器富士 S8100
8、数码相机(日本富士公司);奥2735中南药学 2023 年 10 月 第 21 卷 第 10 期Central South Pharmacy.October 2023,Vol.21 No.10 林巴斯 BX53 型显微镜和奥林巴斯 SZ61 型体式显微镜(日本奥林巴斯株式会社)。1.2药材收集了不同产地的样品,经鉴定分别为蔷薇科植物华东覆盆子 Rubus chingii Hu的干燥果实和蔷薇科植物桉叶悬钩子 Rubus eucalyptus Focke的干燥果实,具体信息见表 1。表 1样品信息 Tab 1Information of samples编号药材产地编号药材产地1-1覆盆子浙江2-
9、1桉叶悬钩子陕西1-2覆盆子江西2-2桉叶悬钩子甘肃1-3覆盆子安徽2-3桉叶悬钩子四川2方法2.1性状鉴别2.1.1药材表面性状药材除去杂质后,选取不同规格大小置于附有标尺的拍摄台上,日光下观察其自然形态,并用数码相机记录外观特征。2.1.2聚合果表面特征选取中等大小具有代表性的药材置于在载物台上,应用体式显微镜观察药材不同面(正面、底面、顶面、横切面)的性质特征,并用数码成像系统记录影像数据。2.1.3小核果表面特征摘取中等大小具有代表性的小核果,应用体式显微镜观察药材不同面(正面、外侧面、内侧面、横切面)的性质特征,并用数码成像系统记录影像数据。2.2显微鉴别2.2.1横切面鉴别药材泡水
10、软化后,用吸水纸擦掉附在药材表面的水分,将药材固定于切割板上,用刀片进行切制。切制后的薄片放置载玻片上,用滴管滴加少量水合氯醛,稍放置,置于加热板上透化,该步骤重复 1 2 次,冷却至室温后用稀甘油封片,置于奥林巴斯 BX53 型显微镜下观察并用数码成像系统记录特征。2.2.2粉末鉴别取粉碎后的药材过五号筛,蘸取细粉于载玻片上均匀展开,按“2.2.1”项下透化步骤操作,冷却后盖上盖玻片,置于奥林巴斯 BX53型显微镜下观察并用数码成像系统记录特征。3结果3.1性状特征3.1.1聚合果特征覆盆子整体为黄绿或淡棕色,表面密被灰白色茸毛,由众多半月形的小核果聚合而成,聚合果手摸有茸毛感,呈类圆锥形,
11、高 0.6 1.3 cm,直径 0.6 1.1 cm。质轻较硬。气味偏酸、涩。体式显微镜下,正面观察覆盆子聚合果,呈类圆形或类三角形;底面观中心凹入,残存萼片,宿萼短于聚合果,下有果梗痕;顶面观呈类圆形。横切面类圆形,中部花托类圆形,其四周围绕众多小核果。详见图 1A。桉叶悬钩子与覆盆子相似,大小规格相等,为灰绿色或灰褐色类圆锥形的聚合果,表面密被灰白色茸毛,有棕褐色花丝附着表面,高0.5 1.3 cm,直径 0.4 1.5 cm。质轻较硬,手摸茸毛感,气味酸涩。体式显微镜下正面观多呈类圆三角形;底面观中心深凹成孔,无萼片;顶面观呈类圆形。横切面类圆形,密被茸毛,花托中空,四周围绕众多小核果。
12、详见图 1B。3.1.2小核果特征覆盆子小核果为黄棕色,高2.0 2.5 mm,直径 0.7 1.3 mm,表面有明显的横纹。正面观为半月形,整体网格状纹凹陷明显,具丝绢光泽,顶端钝圆密被茸毛,底部略尖较光滑。外侧面中央隆起有一棱线向两端弯曲,棱线上附着茸毛。内侧面光滑,几乎无茸毛。横切类椭圆形两端略尖,种子一枚,位于中心。种子半透明类椭圆形,约占小核果的三分之二。详见图 2A。桉叶悬钩子为灰绿色,表面密被众多灰白色长茸毛,附着棕色花丝,高 2.0 2.7 mm,直径0.9 1.5 mm,无横纹。正面观为半月形,网格状纹凹陷,全身密被茸毛。外侧面中央隆起有一棱线向两端弯曲,密被茸毛。内侧面茸毛
13、众多。断面类椭圆形两端略尖,种子一枚,位于中心。种子较小,半透明扁椭圆形。详见图 2B。3.2显微特征3.2.1横切面显微特征覆盆子外果皮表皮细胞呈类方形,外被角质层,单列切向延长,外缘波状弯曲。表皮细胞向外突起形成非腺毛。中果皮细胞数列,外侧细胞略切向延长,常见草酸钙簇晶。维管束外韧型,位于内果皮脊状突起的外侧,四周有纤维及网纹细胞围绕12。内果皮壁厚木化,为 20 余列纤维脊状突起,内外纤维层交错排列。种皮表皮细胞黄棕色,单列呈类方形。子叶细胞中含糊粉粒、草酸钙簇晶及脂肪油滴。胚乳细胞含大量脂肪油滴及糊粉粒(见图 3)。桉叶悬钩子外果皮表皮细胞呈类方形,单列切向延长,外被角质层。向外突起的
14、非腺毛长而弯曲。中果皮细胞数列,常见草酸钙簇晶。维管束外韧型,位于内果皮脊状突起的外侧,四周有纤维,网纹细胞偶见。内果皮壁厚木化,为 20余列纤维脊状突起,内外纤维层交错排列。种皮2736Central South Pharmacy.October 2023,Vol.21 No.10 中南药学 2023 年 10 月 第 21 卷 第 10 期表皮细胞黄棕色,单列呈类方形。子叶细胞中含糊粉粒、草酸钙簇晶及脂肪油滴。胚乳细胞含大量脂肪油滴及糊粉粒(见图 3)。3.2.2粉末显微特征覆盆子粉末呈棕黄色。非腺毛长 60 450 m,多为单细胞,壁厚木化,长 60 450 m,表面具双螺纹,常见非腺毛
15、脱落,基部表面观似石细胞呈类圆形,残留于表皮层,直径约 25 m。草酸钙簇晶棱角明显,单个散落或存在中果皮细胞中,直径 18 50 m。网纹细胞直径 5 26 m,表面观长梭形或椭圆形。果皮纤维无色或黄色,纵横交错或斜向排列成片存在。种皮表皮细胞无色或淡黄色,类多角形壁薄细波状弯曲,多成片存在,有的胞腔可见浅棕色颗粒状物。子叶细胞无色或黄色,富含脂肪油滴和糊粉粒,并可见细小簇晶(见图 4)。桉叶悬钩子粉末灰绿色。非腺毛壁厚木化,胞腔线形或不明显,表面无螺纹。其大多碎断,长60 1000 m,平直或弯曲,常脱落残留形如石细胞状的基部埋于表皮层。草酸钙簇晶棱角明显,单个散落或存在中果皮细胞中,直径
16、 15 50 m。网纹细胞直径520 m,表面观长梭形或椭圆形。果皮纤维无色或黄色,纵横交错或斜向排列成片存在。种皮表皮细胞无色或淡黄色,类多角形壁薄细图 3样品横切图Fig 3Cross-cutting characteristics of samplesA.覆盆子(Rubus chingii Hu);B.桉叶悬钩子(Rubus eucalyptus Fo-cke);1.非腺毛(non-glandular hair);2.外果皮细胞(epicarp cell);3.中果皮细胞(mesocarp cell);4.外韧型维管束(4a.韧皮部;4b.木质部)out tough vascular b
17、undle(4a.phloem;4b.xylem);5.网纹细胞(reticulate cell);6.内果皮纤维(6a.外层;6b.内层)endocarp fiber(6a.outer;6b.inner);7.种皮细胞(testa cell);8.胚乳细胞(endossperm cell);9.子叶细胞(cotyledon cell)图 4样品粉末显微图Fig 4Powder characteristics of samplesA.覆盆子(Rubus chingii Hu);B.桉叶悬钩子(Rubus eucalyptus Fo-cke);1.非腺毛(non-glandular hair);
18、2.网纹细胞(reticulate cell);3.子叶细胞(cotyledon cell);4.非腺毛基部残基(non-glandular hair foot residues);5.草酸钙簇晶(calcium oxalate cluster);6.果皮纤维(pericarp fiber);7.种皮表皮细胞(seed coat cell);8.花粉粒(pollen grain)图 1样品性状特征图Fig 1Characteristics of samples A.覆盆子(Rubus chingii Hu);B.桉叶悬钩子(Rubus eucalyptus Focke);依次为正面、底面、顶面
19、、横切面(front;basic;top and cross view successively)图 2小核果特征图Fig 2Characteristics of Fructus A.覆盆子(Rubus chingii Hu);B.桉叶悬钩子(Rubus eucalyptus Focke);依次为表面特征、正面、外侧面、内侧面、横切面)(surface character;front;outer side;inner side and cross view successively);1.非 腺 毛(non-glandular hair);2.外 果 皮(epicarp);3.内 果 皮(en
20、docarp);4.种子(seed)2737中南药学 2023 年 10 月 第 21 卷 第 10 期Central South Pharmacy.October 2023,Vol.21 No.10 波状弯曲,多成片存在,有的胞腔可见浅棕色颗粒状物。子叶细胞无色或黄色,富含脂肪油滴和糊粉粒,并可见众多细小簇晶散在。花粉粒黄棕色,类圆形,壁微厚内含颗粒状物(见图 4)。4讨论覆盆子为常用的补益中药,标准收载于 中国药典,其易混品较多。相关文献主要在鉴别绵果悬钩子、山莓、树莓等,目前暂无文献研究其易混品桉叶悬钩子。桉叶悬钩子现收载于四川省中药材标准(2010 年版),但该标准仅为文字描述,且无桉
21、叶悬钩子显微横切面鉴别。本文补充了桉叶悬钩子显微横切面的研究,并提供了丰富的外观形状、内在结构、粉末特征等彩图。通过研究比较发现,两者性状鉴别要点为:覆盆子聚合果基面观中心微凹入,残存萼片,宿萼短于聚合果,下有果梗痕,断面实心;小核果表面有横纹,顶端密被茸毛,底部较光滑无毛。而桉叶悬钩子基面观中心深凹成孔,无萼片,断面中空;小核果表面无横纹,全身密被茸毛。横切显微特征,覆盆子外韧型维管束四周围绕网纹细胞;而桉叶悬钩子外韧型维管束偶见网纹细胞。粉末显微特征,覆盆子非腺毛较短且平直,表面有螺纹;桉叶悬钩子非腺毛长而弯曲,无螺纹。桉叶悬钩子显微粉末特征虽含花粉粒,但 本草纲目13记载“覆盆以四五月熟
22、”,现代相关研究14也指出覆盆子的最佳采收期为 4 5 月,而4 5 月正为桉叶悬钩子的花期,故花粉粒不能作为区别两者的要点。两者差异区别要点见表 2。表 2覆盆子和桉叶悬钩子鉴别要点 Tab 2Characteristics identification of Rubus chingii Hu and Rubus eucalyptus Focke药材性状特征显微特征聚合果小核果横切特征粉末特征覆盆子宿萼短于聚合果,基部中心凹入,断面实心表面有横纹,茸毛主要密被背部,腹部无毛外韧型维管束四周围绕网纹细胞非腺毛长60450 m,多平直,表面有螺纹桉叶悬钩子无宿萼,基部中心深凹成孔,断面中空表面无
23、横纹,全身密被茸毛外韧型维管束四周偶见网纹细胞非腺毛长可达1000 m,多弯曲,表面无螺纹本文通过研究覆盆子及与其易混淆品桉叶悬钩子的生药学特征,比较两者外观性状、内在构造和显微特征的区别点,研究结果为桉叶悬钩子的鉴别提供了依据,有利于提高软覆盆子的质量标准,也为鉴别覆盆子及与其易混淆品桉叶悬钩子提供依据。此外,本文运用体式显微镜和光学显微镜,达到了图像化描述的效果。通过数字图像化能更好地了解药材外观形状及内在结构,对智能识别药材有重要意义。参考文献1 中国药典 2020 年版.一部S.2020:399-400.2 程丹,李洁,周斌,等.覆盆子化学成分及药理作用的研究进展J.中药材,2012,
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