气相色谱的定性和定量分析.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,分析化学教研室,气相色谱的定性和定量分析,(1),一、实验目的,1.,加深理解色谱分离分析的原理，学习计算色谱峰的分辨率、理论塔板数等。,2.掌握根据保留值、用已知纯物质对照定性的分析方法。,3.掌握用归一化法定量测定混合物各组分的含量。,二.方法原理,气相色谱法能否很好地完成所给定物质的分离，主要取决于色谱峰间的相对距离及色谱峰的扩宽程度，前者与固定相的选择有关，后者是柱子的设计情况及其操作条件的结果，与柱效能有关。,对一个混合试样成功的分离，是气相色谱法完成定性及定量分析的前提和基础。衡量一对色谱峰分离的程度可用分离度R表示：,式中t,R,2,，Y,2,和t,R,1,，Y,2,分别是两个组分的保留时间和峰底宽，当R=1.5时，两峰完全分离；当R=1.0时，98%的分离。在实际应用中，R=1.0时一般可以满足。,柱效能指标用理论塔板数n表示，而将每一塔板数对应的柱长用H表示：,显然，柱效越高，n值越大，H则越小。理论塔板数n反之是一个估算柱效能的理论概念，并不能用来作为柱分离能力的绝对量度。而只能将它用来比较类似（或标准）的柱子，衡量它们的装填情况，n可由下式从色谱图上求得：,t,R,是样品的保留时间，Y,1/2,是色谱峰的半宽度,而只能将它用来比较类似（或标准）的柱子，衡量它们的装填情况，n可由下式从色谱图上求得：,色谱柱:邻苯二甲酸二壬酯（15%DNP）,载气流速（N2)：4.,为什么要测定定量校正因子？,试根据混合试液各组分及固定液的性质，解释各组分的流出次序。,并将各开关旋钮旋至最低档处。,色谱图上每一个峰所代表的物质。,掌握根据保留值、用已知纯物质对照定性的分析方法。,并将各开关旋钮旋至最低档处。,手工测量则首先测量峰高h和半峰宽Y12，然后按下式计算：,如何选择适当的桥电流和载气种类以提高热导池检测器的灵敏度？,在实际工作中采用何种方法，应根据它们各自的特点加以选择。,检测器（TCD）：120；,在一定的色谱条件下，组分的质量 m或其在流动相中的浓度，与检测器的响应讯号峰面积A或峰高h成正比：,气相色谱的定性和定量分析(1),在色谱系统中，下列因素将影响理论塔板数：,进样系统，包括气化室的体积、温度以及进样时的速度和进样量；,检测器的池体积；,柱子的性能。,色谱图上每一个峰所代表的物质。在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留值。因此，在相同的色谱操作条件下，通过比较已知纯样和未知物的保留参数或在固定相上的位置，即可确定未知物为何种物质。,在一定的色谱条件下，组分的质量 m或其在流动相中的浓度，与检测器的响应讯号峰面积A或峰高h成正比：,m,=f,i,A,i,式中f,i,称为绝对校正因子。上式是色谱定量的依据。不难看出，响应信号A及 校正因子的正确测量直接影响定量分析的准确度,。,色谱柱:邻苯二甲酸二壬酯（15%DNP）,检测器的池体积；,高纯氮气（带减压阀的氮气）,载气流速（N2)：4.,归一化法定量前提条件是什么？本实验中进样量是否需要非常准确?为什么?,进样系统，包括气化室的体积、温度以及进样时的速度和进样量；,气相色谱法能否很好地完成所给定物质的分离，主要取决于色谱峰间的相对距离及色谱峰的扩宽程度，前者与固定相的选择有关，后者是柱子的设计情况及其操作条件的结果，与柱效能有关。,不难看出，响应信号A及 校正因子的正确测量直接影响定量分析的准确度。,色谱图上每一个峰所代表的物质。,检测器（TCD）：120；,认真阅读气相色谱仪操作说明，在教师指导下,按照下 列色谱条件开启色谱仪。,在实际工作中采用何种方法，应根据它们各自的特点加以选择。,而只能将它用来比较类似（或标准）的柱子，衡量它们的装填情况，n可由下式从色谱图上求得：,并将各开关旋钮旋至最低档处。,为什么要测定定量校正因子？,环己烷,苯,甲苯(色谱纯),理论塔板数n反之是一个估算柱效能的理论概念，并不能用来作为柱分离能力的绝对量度。,由于峰面积的大小不易受操作条件如柱温，流动相的流速，进样速度等因素影响，故峰面积更适定量分析的参数。测量峰面积的方法分为手工测量和自动测量两大类。现代色谱仪中一般都配有准确测量色谱峰面积的电学积分仪。手工测量则首先测量峰高h和半峰宽Y,12,，然后按下式计算：,A,Y,12,当峰形不对称时，则：,A,（Y+Y）,常用的定量分析方法有归一化法、内标法和标准曲线法。在实际工作中采用何种方法，应根据它们各自的特点加以选择。,归一化法是将样品中所有组分的含量之和按100%计算，以它们相应的色谱峰面积或峰高（响应信号）为定量参数，通过下式计算各组分的质量分数：,1.102M气相色谱仪，热导池检出器、色谱工作站（N2000）,2.高纯氮气（带减压阀的氮气）,3.色谱柱:邻苯二甲酸二壬酯（15%DNP）,4.注射器:1L,5.环己烷,苯,甲苯(色谱纯),1.,认真阅读气相色谱仪操作说明，在教师指导下,按照下 列色谱条件开启色谱仪。,色谱条件：,柱温（恒温）:110；检测器（TCD）：120；汽化室：125；载气流速（N2)：4.6圈；进样量：0.3L（混合物为0.9L）。,2.内容,0,的测定。,b.环己烷、苯、甲苯纯样品保留时间的测定。,c.混合试液的分析。,3,.,实验完毕，依次关闭记录仪、热导池桥电流、将温度设置开关归零，待温度降至室温后，关闭主机电源，最后关闭载气。并将各开关旋钮旋至最低档处。,五 结果处理,1.将混合物各组分的保留时间与纯物质各组分对照进行定性分析。,2.依据峰面积定量，用归一化法计算混合物中各组分的质量分数，并与工作站计算数据比较。,环己烷,苯,甲苯,1,.归一化法定量前提条件是什么？本实验中进样量是否需要非常准确?为什么?,2.试根据混合试液各组分及固定液的性质，解释各组分的流出次序。,3.102M型气相色谱仪的操作次序。,4.为什么要测定定量校正因子？,5.使用热导池检测器时，能否先接通电源，再开启载气？为什么？3,6.如何选择适当的桥电流和载气种类以提高热导池检测器的灵敏度？,7.为什么氢气作载气比用氮气载气灵敏度高？,