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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,项目一 分光光度法分光光度法测定微量铁含量,第1页,当一束平行单色光经过均匀而透明溶液时部分光被溶液所吸收，所以透过溶液光通量降低。设入射光通量为0，经过溶液后透射光通量为tr，则比值tr/0表示溶液对光透射程度，用符号表示，其值能够用小数或百分数表示：=tr/0,透射比倒数对数表示溶液对光吸收程度，用A表示，即,A=lg0/tr=-lg。,当入射光全部透过溶液时tr=0，=1（或100%），即A=0；,当入射光全部被溶液吸收tr=0，=0，即A。,分光光度计应用原理-郎伯-比尔定律,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第2页,理论推导和实践都证实：一束平行单色光垂直入射经过一定光路长度均匀溶液，即当入射光通量一定时溶液吸光度与吸光物质浓度及光路长度乘积成正比，这就是光吸收定律又称,朗伯-比尔定律,，即：,A=Kbc,式中 b吸收池内溶液光路长度，cm；,c溶液中吸光物质浓度；,K吸光系数。,当溶液浓度用物质量浓度（mol/L）表示，吸收池溶液液层厚度以厘米（cm）表示时，对应百分比常数K称为摩尔吸光系数，以表示，其单位为L/(molcm),项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第3页,分光光度计仪器结构,仪器组成结构：,光源单色器吸收池检测器信号显示系统,图3-1-2 分光光度计基本组成,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第4页,光源：,供给符合要求入射光。,可见光源：钨丝灯、卤钨灯；,紫外光源：氢灯、氘灯等。,单色器：,把光源发出连续光谱分解成单色光，并能准确方便地“取出”所需要某一波长光。单色器组成：单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统组成。棱镜单色器、光栅单色器。,吸收池规格：,0.5、1、2、3cm；材质：玻璃和石英。,检测器：,利用光电效应将透过吸收池光信号变成可测电信号。,信号显示系统：,将检测器电信号经过放大后，以一定形式显示，方便计算和统计。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第5页,721分光光度计使用方法,图3-1-3 721分光光度计结构,吸收池暗箱,灵敏度选择钮,波长调整器,0%T电位调整器,100%T电位调整器,检流计标尺,波长显示窗,电源开关,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第6页,图3-1-5 检流计标尺刻度,721分光光度计使用方法,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第7页,图3-1-4 波长调整器,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第8页,721分光光度计操作流程,检验仪器个调整钮起始位置是否正确，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位置，预热20min后，选择须用单色光波长和对应灵敏度档，用“0%”电位调整器调整电表T=0%。,盖上样品室盖，拉动吸收池拉杆，使参比溶液池置于光路上，调整“100%”调整器，使电表指针指在T=100%。,重复进行打开样品室盖，调整“0%”，盖上样品室盖，调整“100%”操作至仪器稳定。,盖上样品室盖，拉动吸收池拉杆，使样品溶液池置于光路上，读取吸光度值，读数后应马上打开样品室盖。,测量完成，取出吸收池，洗净后倒置于滤纸上晾干，个旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，拔下电源插头。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第9页,721分光光度计操作流程,注意事项,样品配好后过10分钟后再测定（为何？）。,拿比色皿时，应拿比色皿毛玻璃面，不要碰比色皿透光面，以免沾污。,清洗比色皿时，普通先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用盐酸-乙醇混合洗涤液（12）浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强洗涤液洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它透光面。每次做完试验时，应马上洗净比色皿。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第10页,比色皿应用测试样品充分洗涤（34次），以免改变有色溶液浓度。比色皿中试样装入量应为2/33/4之间。另外，在测定一系列溶液吸光度时，通常都按由稀到浓次序测定，以减小测量误差。,比色皿应轻拿轻放，以免打坏。,比色皿不能单个调换。,比色皿加入样品后，其外表面应用擦镜纸或细软吸水纸吸干后放入比色架，以保护透光面。,在实际分析工作中，通常依据溶液浓度不一样，选取液槽厚度不一样比色皿，使溶液吸光度控制在0.20.8。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第11页,UV-754C型分光光度计使用方法,图3-1-8 UV-754C型紫外可见分光光度计,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第12页,UV-754C型分光光度计操作流程,插上电源，打开开关，仪器自检 显示器显示“754”后，数字显示出现“100.0”，表明仪器经过自检程序，此时仪器进入“0100%”，“连续”和“自动”状态(打印系统处于自动打印状态)；,打开试样室盖，按“A/T/C/F”键，选择“T%”状态，选择测量所需波长，预热30分钟；,开始测量时要先调整仪器零点，方法为：保持在“T%”状态，当关上试样室盖时，屏幕应显示“100.0”，如否，按“OA/100%”键；打开试样室盖，屏幕应显示“000.0”，如否，按“0%”键，重复23次，仪器本身零点即调好，能够开始测量；,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第13页,用参比液润洗一个比色皿，装样到比色皿3/4处（必须确保光路经过被测样品中心），用吸水纸吸干比色皿外部所沾液体，将比色皿光面对准光路放入比色皿架，用一样方法将所测样品装到其余比色皿中并放入比色皿架中；,将装有参比液比色皿拉入光路，关上试样室盖，按“A/T/C/F”键，调到“ABS”，按“OA/100%”键，屏幕显示“0.000”，将其余测试样品依次拉入光路，记下测量数值即可（不可用力拉动拉杆）；,测量完成后，将比色皿清洗洁净（最好用乙醇清洗），擦干，放回盒子，关上开关，拔下电源，罩上仪器罩，并清扫卫生，方可离开。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第14页,微量铁测定原理,邻二氮菲和Fe,2+,在PH=39溶液中形成橙色络合物，铁含量在0.16g mL,-1,范围内恪守朗伯-比耳定律。邻二氮菲铁（）吸收曲线见下列图，由图可知，络合物最大吸收波长为520nm。显色前用盐酸羟胺将Fe,3+,全部还原为 Fe,2+,，然后加入邻二氮菲，调整酸度至适宜酸度范围，用分光光度法测定。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第15页,图3-1-12,邻二氮菲铁（）吸收曲线,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第16页,测 定 步 骤,仪器准备,采取721分光光度计，用1cm吸收池进行测定，测定前可对吸收池作配套性检验。,最大吸收波长确实定,以与样品溶液浓度靠近某一标准溶液作为样品，在可见光波长范围内，每隔10nm测定一次吸光度，在峰值附近每隔2nm测量一次，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制曲线，从而确定最大吸收波长。,标准曲线绘制,配制标准溶液系列，在确定最大吸收波长下分别测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作标准曲线。,样品测定,在与标准溶液测定相同条件下测定待测样品浓度，从标准曲线上获取样品溶液浓度。,项目一分光光度法,分光光度法测定微量铁,第17页,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第18页,电位分析法介绍,依据测量参数不一样，电化学分析法主要分为电位分析法、库仑分析法、极谱分析法、电导分析法及电解分析法等。,电位分析法是电化学分析法一个主要组成部分，它是利用物质电学及电化学性质进行分析一类分析方法。,电位分析法是将一支电极电位与被测物质活（或浓）度相关电极（称,指示电极,）和另一支电位已知且保持恒定电极（称,参比电极,）插入待测溶液中组成一个化学电池，在零电流条件下，经过测定电池电动势，进而求得溶液中待测组分含量方法。,以下将只对电位分析法进行介绍。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第19页,参比电极和指示电极,从标准上讲，测量了电极电位就能够依据能斯特方程求出参加电极反应离子活度(或浓度)。实际上，单一电极电位是无法直接测量。在电位分析法中，需要以一支电位恒定且已知电极作参比，然后测量两个电极间电位差，从而求出待测电极电位。,指示电极：,能指示被测离子活度(或浓度)改变电极；,参比电极：,电极电位恒定且不受待测离子影响电极。,在电位分析法中应用参比电极和指示电极有很各种，以下将介绍几个惯用指示电极和参比电极。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第20页,1、指示电极,金属电极：,把能够发生可逆氧化还原反应金属，插入此金属离子溶液中即组成金属电极，其电极电位改变能准确地反应溶液中金属离子活度(或浓度)改变。比如银电极不单可应用于测定银离子浓度，而且可用于滴定过程中，比如因为沉淀或配位等反应而能引发银离子浓度改变电位滴定。,金属电极使用前应对其表面作彻底清洗。清洗方法是，先用细砂纸打磨，随即再分别用自来水和蒸馏水清洗洁净。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第21页,惰性金属电极：,在氧化还原电对中若氧化态和还原态都是离子状态，则需用惰性金属如铂(Pt)或金(Au)，插人其中组成电极，此电极电位能指示出溶液中氧化态和还原态活度(或浓度)比值。惰性电极并不参加电极反应，只作为氧化还原反应变换电子场所。在氧化还原滴定中，铂电极应用很多。,铂电极使用前要用硝酸(1+1)溶液浸泡数分钟，再分别用自来水和蒸馏水清洗洁净。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第22页,pH玻璃电极：,主要部分是电极下端球泡，球泡是特殊成份玻璃制成薄膜，泡内装有pH值一定缓冲溶液(通常为0.1mol/LHCl溶液)，溶液中插一支银-氯化银电极作内参比电极，这么就组成了pH玻璃电极。pH玻璃电极中内参比电极电位是恒定，与待测测液pH值无关。pH玻璃电极需要和参比电极配合使用。,现在在测定溶液pH时，普通惯用pH复合电极，它是将指示电极和参比电极组合在一起塑料壳可充式复合电极。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第23页,离子选择性电极：,离子选择性电极是一个以电位法测量溶液中某种特定离子活度指示电极。离子选择性电极种类很多，pH玻璃电极就是含有氢离子专属性经典离子选择性电极。各种离子选择性电极结构随敏感膜不一样而略有不一样。但普通都由敏感膜及其支持体、内参比溶液（含有与待测离子相同离子）、内参比电极(AgAgCl电极)等。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第24页,2、参比电极：,作为电位参比标准参比电极，要求电极电位稳定性和重现性好，而且轻易制备。电位分析中惯用参比电极是饱和甘汞电极和银氯化银电极。,饱和甘汞电极(SCE)：,它是由纯汞、Hg,2,Cl,2,Hg混合物和KCl溶液组成。电极下端与溶液接触部分是熔结陶瓷芯或玻璃砂芯等多孔物质。,在一定温度下甘汞电极电位决定于氯化钾溶液浓度，当Cl,-,浓度一定时，其电极电位值是一定。最惯用甘汞电极氯化钾溶液为饱和溶液，所以称为饱和甘汞电极（简称SCE）,其电位值为0.2438V(25)。,SCE仅能在低于80左右温度下使用。当试液中含有Cl,-,或Ag,+,时，惯用KNO,3,盐桥将甘汞电极与试液连接。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第25页,银氯化银电极：,在金属银丝或银片表面镀一层氯化银，仅在饱和氯化钾溶液中，就制得你所需要银氯化银电极。,电极电位决定于氯离子浓度，在25时饱和KCl溶液中，电极电位为0.197V。,银-氯化银电极常在pH玻璃电极和其它各种离子选择性电极中用作内参比电极。因为银氯化银电极在高达275左右温度下仍能使用，而且有足够稳定性，所以可在高温下替换甘汞电极。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第26页,pHS-3F酸度计使用,1mV-pH按键开关,2“温度”调整器,3“斜率”调整器,4“定位”调整器,5电极架座,6U型电极架立杆,7电极夹,8玻璃电极输入座,9数字显示器,10调零电位器,11甘汞电极接线柱,12电源插座,13电源开关,14保险丝,（1）仪器基本结构：,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第27页,（2）pHS-3F酸度计校正方法(二点校正法),制备两种标准缓冲溶液，使其中一个pH值大于并靠近试液pH值，另一个小于并靠近试液pH值。先用一个标准缓冲溶液与电极组成工作电池，将温度赔偿调整器调至标准缓冲溶液温度处，将“斜率”调整器顺时针旋到底，然后调整“定位”调整器，使仪器显示标准缓冲溶液在该温度下pH值；保持“定位”调整器不动，再用另一个标准缓冲溶液与电极组成工作电池，调整温度赔偿钮至溶液温度处，调整“斜率”调整器使显示器上显示当前缓冲溶液pH值，若调不到，应重复上面定位操作，此时仪器即可使用。,保持“定位”、“斜率”调整器不动，即可测定待测溶液pH值。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第28页,图3-2-3 溶液pH测定装置,溶液pH值测定装置,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第29页,应用实例溶液pH测定,一、训练目标：,1会正确选择使用电极和标准缓冲溶液进行溶液pH值测定。,2会熟练使用酸度计，并到达在2h内完成溶液pH值测定工作。,二、仪器和试剂,1仪器：,酸度计、,pH玻璃电极,饱和甘汞电极(一支),100mL烧杯(4个),洗瓶,水银温度计(0100，一支),2试剂：,25时pH值为4.00、6.86和9.18标准缓冲溶液,两种未知pH值试液。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第30页,三、操作步骤,1.完整阅读这一训练各项要求和仪器使用说明书。,2.酸度计使用前准备(以pHS3F为例)。,（1）把酸度计三芯电源插头插入220V交流电源座(pHS3F)酸度计电源插口电源开关位置均在仪器后左角)，接通电源开关(向上)，预热20min。,（2）置选择按键开关于“mV”位置(注意：此时暂不要把玻璃电极插入输入座内)，若仪器显示不为“000”，可调整仪器后右角“调零”电位器，使其显示为正或负“000”，然后锁紧电位器。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第31页,3pH玻璃电极检验、处理和安装,（1）依据被测溶液大致pH值(可使用pH试纸试验确定)选择适当型号pH玻璃电极(已在蒸馏水中浸泡24h以上)。,（2）仔细检验所选电极球泡是否有裂纹；内参比电极是否装入内参比溶液内；参比液内是否有气泡。若有裂纹或内参比电极未浸入内参比液者不能使用。参比液内有气泡应稍晃动，除去气泡。,（3）将所选择pH玻璃电极用蒸馏水冲洗后固定在电极夹上，球泡高度略高于甘汞电极下端。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第32页,4甘汞电极检验、处理和安装,（1）取下甘汞电极下端和上侧小胶帽。,（2）检验电极内饱和氯化钾溶液液位是否适当，电极下端是否有少许氯化钾晶体，若液位低或无晶体应由上测小口补加饱和KCl溶液和少许氯化钾晶体。,（3）检验甘汞电极外管饱和KCl溶液中是否有气泡，若有赶走气泡；检验电极下端瓷芯是否堵塞，氯化钾溶液是否能缓缓从下端陶瓷芯渗出。检验方法是：先将瓷芯外部擦干，然后用滤纸贴在瓷芯下端，如有溶液渗出，滤纸上有湿印，则证实瓷芯毛细管未堵塞。,（4）用蒸馏水清洗电极外部，滤纸吸干后，置电极夹上，电极下端略低于玻璃电极球泡下端。,（5）将甘汞电极导线接在仪器后右角甘汞电极接线柱上，把玻璃电极引线插入仪器后右角玻璃电极输入座。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第33页,5校正酸度计(二点校正法),（1）将选择校键开关置“pH”位置。,（2）取一洁净烧杯(100mL)，用pH=6.86标准缓冲溶液洗涤三次，倒入50mL左右该标准缓冲溶液。,（3）测量标准缓冲溶液温度，调整“温度调整器，使所指示温度刻度为标准缓冲溶液温度。,（4）将电极插入标准缓冲溶液中。小心轻摇几下试杯，以促使电极平衡。,（5）将”斜率”调整器顺时针，旋足，调整“定位”调整器，使仪器显示值为此温度下该标准缓冲溶液pH值。,（6）将电极从标准缓冲溶液中取出，移去试杯，用蒸馏水清洗二电极，用滤纸吸干。另取一洁净烧杯，用另一个与待测试液pH值相靠近标准缓冲溶液荡洗三次后，倒入50mL左右该标准缓冲溶液。,（7）将电极插入溶液中，小心轻摇几下试杯，使电极平衡。,（8）调整“斜率”调整器，使仪器显示值为此温度下该标准缓冲溶液pH值。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第34页,6测量待测试液pH值,（1）移去标准缓冲溶液，清洗电极，并用滤纸吸干。,（2）取一洁净烧杯，用待测试液荡洗三次后倒人50mL左右试液。,（3）用水银温度计测量试液温度，并将温度调整器置此温度位置上。,（4）将电极插入被测试液中，轻摇试杯使溶液均匀，待数字显示稳定后读取并统计被测液pH值。,（5）按5、6步骤测量另一未知试液pH值。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第35页,7结束工作,（1）关闭电源开关，拔出电源插头。,（2）取出玻璃电极用蒸馏水清洗于净后浸泡在蒸馏水中。,（3）取出甘汞电极用蒸馏水清洗，用滤纸吸干，套上小帽存放在盒内。,（4）清洗试杯，晾干后妥善保留。,（5）用于净抹布擦净工作台，罩上仪器罩，填写仪器使用统计。,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第36页,图3-2-4 溶液中氟离子测定装置,溶液中氟离子测定装置,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第37页,图3-2-5 电位滴定法装置图,电位滴定法测定装置,项目二 电化学分析法 溶液pH测定,第38页,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第39页,色谱分离基本原理,色谱分离基本原理是试样组分经过色谱柱时与填料之间发生相互作用，这种相互作用大小差异使各组分分离而按照先后次序从色谱柱后流出。这种在色谱柱内不移动、起分离作用填料称为固定相。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第40页,气相色谱仪基本组成,图3-3-1,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第41页,气相色谱仪基本组成,气相色谱仪主要有气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统、温度控制系统组成。各部分功效以下：,气路系统：,作用是提供连续运行且含有稳定流速与流量载气与其它辅助气体。主要由钢瓶、减压阀、净化器、稳压阀、稳流阀等部件组成。,进样系统：,作用是将样品定量引入色谱系统，并使样品有效地气化，然后用载气将样品快速“扫入”色谱柱。主要包含进样器和气化室。,分离系统：,主要由柱箱和色谱柱组成，其中色谱柱是关键，主要作用是将多组分样品分离为单一组分样品。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第42页,检测系统：,其作用是将经色谱柱分离后次序流出化学组分信息转变为便于统计电信号，然后对被分离物质组成和含量进行判定和测量，是色谱仪“眼睛”。主要有FID检测器与TCD检测器。,数据处理系统,：最基本功效是将检测器输出模拟信号随时间改变曲线，即将色谱图绘制出来。当前使用较多是色谱数据处理机与色谱工作站。,温度控制系统,：在气相色谱测定中，温度控制（主要对色谱柱、气化室与检测器三处温度进行控制）是主要指标，它直接影响柱分离效能、检测器灵敏度和稳定性。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第43页,气相色谱仪使用流程,1准备工作：检验全部气路与仪器连接是否漏气，气体压力是否足够。,2打开氮气钢瓶压力阀，使其分压阀压力在0.20.3 Mpa，使用FID检测器时同时要打开空气钢瓶压力阀（或空气压缩机），分压阀压力在0.40.5Mpa，打开氢气钢瓶压力阀，分压阀压力在0.20.3Mpa。,3开色谱仪电源开关,4开工作站：打开电脑电源，双击在线分析工作站图标,从菜单中选择或编辑方法。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第44页,5设置测定样品所需色谱条件，待基线稳定、各指标到达设定值并显示“Ready”时进行检测。,6进样：,（1）手动进样：分别用溶剂和样品润洗进样器针头34次，取12L进样，用鼠标点击“开始分析”（或用遥控直接操作），开始样品分析。,（2）自动进样：设置自动自进样程序，运行自动进样程序，仪器自动进入分析状态。,7关机：试验完成，调用关机程序，运行关机程序，待检测器温度、进样口温度、柱箱温度降到设定温度（40）时，关闭工作站窗口，退出工作站。关闭电脑，关闭仪器电源，关闭气体阀门。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第45页,气相色谱法基本知识,色谱相关概念：,1、色谱图：,是指色谱柱流出物质经过检测器体统时所产生响应信号对时间或流动相流出体积曲线图。,2、基线：,当没有组分进入检测器时，色谱流出曲线是一条之反应仪器噪声随时间改变曲线，称为基线。,3、色谱峰,当有组分进入检测器时，检测器输出信号随检测器中组分浓度改变而改变，直至组分全部离开检测器，此时绘出曲线称为色谱峰。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第46页,4、峰高和峰面积,峰高（h）是指峰顶到基线距离。,峰面积（A）是指每个组分流出曲线与基线间所包围面积。,峰高或峰面积是气相色谱法进行定量分析依据。,图3-3-12 保留时间,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第47页,5、保留值,保留值是用来描述各组分色谱峰在色谱图中位置，在一定条件下，组分保留值含有特征性，是气相色谱定性参数。通惯用时间或用将组分带出众谱柱所需载气体积来表示。,（1）保留时间：从进样到色谱柱后出现待测组分信号极大值所需要时间，以t,R,表示。,（2）保留体积：从进样开始到出现峰极大值所流过载体体积，以V,R,表示。,二者之间关系以下，其中F,0,为载气平均流速。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第48页,图3-3-13 色谱峰图,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第49页,气相色谱定性定量方法,色谱定性分析,1 保留时间定性 在一定色谱系统和操作条件下，每种物质都有一定保留时间，假如在相同色谱条件下，未知物保留时间与标准物质相同，则可初步认为它们为同一物质。为了提升定性分析可靠性，还可深入改变色谱条件（分离柱、流动相、柱温等）或在样品中添加标准物质，假如被测物保留时间依然与标准物质一致，则可认为它们为同一物质。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第50页,2 保留指数定性,在气相色谱中，能够利用文件中保留指数数据定性。保留指数随温度改变率还可用来判断化合物类型，因为不一样类型化合物保留指数随温度改变率不一样。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第51页,色谱定量分析,色谱定量分析依据是被测物质量与它在色谱图上峰面积（或峰高）成正比。数据处理软件（工作站）能够给出包含峰高和峰面积在内各种色谱数据。因为峰高比峰面积更轻易受分析条件波动影响，且峰高标准曲线线性范围也较峰面积窄，所以，通常情况是采取峰面积进行定量分析。,1.校正因子定量,绝对校正因子f,i,：,单位峰面积所对应被测物质浓度（或质量），即,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第52页,样品组分峰面积与相同条件下该组分标准物质校正因子相乘，即可得到被测组分浓度。绝对校正因子受试验条件影响，定量分析时必须与实际样品在相同条件下测定标准物质校正因子。,相对校正因子f:,某物质i与一选择标准物质s绝对校正因子之比。即,相对校正因子只与检测器类型相关，而与色谱条件无关。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第53页,2.归一化法,归一化法是将全部组分峰面积A分别乘以它们相对校正因子后求和，即所谓归一，被测组分X含量能够用下式求得：,采取归一化法进行定量分析前提条件是样品中全部成份都要能从色谱柱上洗脱下来，并能被检测器检测。归一法主要在气相色谱中应用。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第54页,气相色谱仪应用实例,实例一：丁醇异构体混合物GC分离测定,方法原理,DNP柱对醇类有很好选择性，尤其是对四种丁醇异构体化合物分析，在一定色谱操作条件下，四种丁醇异构体化合物能够得到完全分离，而且分析时间短。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第55页,试验步骤,1.配制混合物试样 用一干燥洁净称量瓶分别称取0.5g异丁醇、0.6g仲丁醇、0.5g叔丁醇、0.5g正丁醇（称准至0.001g），混合均匀，备用。,2.色谱仪开机和调试,（1）连接电源及对应连线，接通载气H2，检验气路气密性。,（2）开启色谱仪，设置试验条件以下：柱温75、气化室温度160、热导池检测器桥电流150mA、载气流速为2030mlmin,-1,，衰减比1:1。,（3）按仪器操作步骤将仪器调整至可进样状态（待仪器电路和气路系统到达平衡，工作站基线平直后即可进样）。,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第56页,3.标准和未知试样分析测定,（1）清洗微量注射器，吸收混合试样0.6微升进样，利用工作站打印分析结果。,（2）按上述方法再进样分析测定两次。,（3）结束工作，试验完成后，清洗进样器。,（4）关桥电流，降低柱温，待柱温降至50再停顿通载气。,4.统计并处理数据,项目三 气相色谱法,丁醇异构体混合物GC分离测定,第57页,
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