生物分离工程试题答案.doc

1.生物产品的分离包括 不溶物的去除，产物分离，纯化和精制。 2.发酵液常用的固液分离方法有 离心 和 过滤 等。3.离心设备从形式上可分为 管式，套筒式，碟片式 等型式。4.膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 微滤膜，超滤膜，纳滤膜 和 反渗透膜；5.多糖基离子交换剂包括 葡聚糖离子交换剂 和 离子交换纤维素 两大类。6.工业上常用的超滤装置有 板式，管式，螺旋卷式 和 中空纤维式7.影响吸附的主要因素有 吸附剂的性质，吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐浓度 ，吸附物浓度 和 吸附剂用量8.离子交换树脂由 载体，活性基团 和 可交换离子 组成。9.电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂；甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂；TEMED的作用是 增速剂；10.影响盐析的因素有 溶质种类，溶质浓度，pH值 和 温度；11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 自然起晶法，刺激起晶法 和 晶种起晶法；12.简单地说，离子交换过程实际上只有 外部扩散，内部扩散 和 化学交换反应 三个步骤；13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为Qq0C/(k+C)14.反相高效液相色谱的固定相是 非极性 的，而流动相是 极性 的；常用的固定相有 C18 和 C8；常用的流动相有 甲醇 和 乙睛；15.超临界流体的特点是与气体有相似的 粘度（扩散系数） ，与液体有相似的 密度； 16.离子交换树脂的合成方法有 共聚（加聚） 和 均聚（缩聚）两大类； 17.常用的化学细胞破碎方法有 渗透压冲击，增溶法，脂溶法，酶消化法 和 碱处理法；18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其等 电点（pI）的不同；19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 pH梯度 和 离子强度（盐）梯度；20.晶体质量主要指 晶体大小，晶体性状 和 晶体纯度 三个方面；4. 亲和吸附原理包括 吸附介质的制备，吸附 和 洗脱 三步。11.根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱 和 凝胶色谱。12.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度的Cohn方程为 lgSKsI；当 保持体系温度、pH值不变，仅改变溶液离子强度进行的盐析操作 称为Ks盐析法；当 保持离子强度不变，改变温度、pH值进行的盐析操作 称为盐析法。13.过饱和溶液的形成方式有：热饱和溶液冷却，蒸发溶剂，真空蒸发冷却，化学反应结晶 和 盐析。14. 蛋白质分离常用的色谱法有 金属螯合色谱 ，共价色谱 ， 离子交换色谱 和 疏水作用色谱。17. SDS PAGE电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待分离蛋白的 电荷 和 分子形状 差异，而将 分子量 作为分离的依据。19.高效液相色谱分离方法中，液-液色谱是以 液体 作为流动相；以 固定在固相载体表面的液体 作为固定相。20. 常用的蛋白质沉析方法有 盐析，等电点沉析 和 有机溶剂沉析。1.在细胞分离中，细胞的密度S越大，细胞培养液的密度L越小，则细胞沉降速率越大。2.表示离心机分离能力大小的重要指标是C。A.离心沉降速度B.转数C.分离因数D.离心力3.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作用。4.简答：对微生物悬浮液的分离（过滤分离），为什么要缓慢增加操作压力？5.判断并改错：在恒压过滤中，过滤速率会保持恒定。（）改：不断下降。6.简答：提高过滤效率的手段有哪些?7.判断并改错：生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。()改：更易破碎。8.简答：采用哪种方法破碎酵母能达到较高的破碎率？9.简答：蛋白质复性收率低的主要原因是什么？10.简答：常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。11.B可以提高总回收率。A.增加操作步骤B.减少操作步骤C.缩短操作时间D.降低每一步的收率12.重力沉降过程中，固体颗粒不受C的作用。A.重力B.摩擦力C.静电力D.浮力13.过滤的透过推动力是D。A.渗透压B.电位差C.自由扩散D.压力差14.在错流过滤中，流动的剪切作用可以B。A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度B.减轻浓度极化，但降低凝胶层的厚度C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度D.加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度15.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间A相互作用的结果。A.疏水性B.亲水性C.氢键D.静电16.判断并改错：原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。()改：原料目标产物的浓度越低。17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用D手段，可以提高沉降速度。A.调整pHB.加热C.降温D.加盐或絮状剂18.撞击破碎适用于D的回收。A.蛋白质B.核酸C.细胞壁D.细胞器19.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。20.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作步骤。21.评价一个分离过程效率的三个主要标准是：浓缩程度分离纯化程度回收率。22.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。23.差速区带离心的密度梯度中最大密度B待分离的目标产物的密度。A.大于B.小于C.等于D.大于或等于24.简答：管式和碟片式离心机各自的优缺点。25.单从细胞直径的角度，细胞越小，所需的压力或剪切力越大，细胞越难破碎。 1.防止蛋白质沉淀的屏障有 蛋白质周围的水化层 和 双电层 。 2.判断：当蛋白质周围双电层的点位足够大时，静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力，使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。（） 3.降低蛋白质周围的 水化层 和 双电层 厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。 3 4.常用的蛋白质沉淀方法有： 盐析 沉淀， 等电点 沉淀， 有机溶剂 沉淀。 5.判断并改错：蛋白质水溶液中离子强度在生理离子强度（0.150.2molkg-1）之外，蛋白质的溶解度降低而发生沉淀的现象称为盐析。（）改：离子强度处于高离子强度时。 6.在Cohn方程中，logS=-KsI中，盐析常数Ks反映 C 对蛋白质溶解度的影响。 A.操作温度 B.pH值 C.盐的种类 D.离子强度 7.在Cohn方程中，logS=-KsI中，常数反映 B 对蛋白质溶解度的影响。 A.无机盐的种类 B.pH值和温度 C.pH值和盐的种类 D.温度和离子强度 8.Cohn方程中，Ks越 大 ，值越 小 ，盐析效果越好。 9.蛋白质溶液的pH接近其等电点时，蛋白质的溶解度 B 。 A.最大 B.最小 C.恒定 D.零 10.蛋白质溶液的pH在其等电点时，蛋白质的静电荷数 为0 。 11.判断并改错： 在高离子强度时，升温会使蛋白质的溶解度下降，有利于盐析沉淀，因此常采用较高的操作温度。（）改：只在离子强度较高时才出现。 12.判断并改错： 利用在其等电点的溶液中蛋白质的溶解度最低的原理进行分离，称为等电点沉淀，而不必考虑溶液的离子浓度的大小。（）改：在低离子强度条件下。 13.等电点沉淀的操作条件是 低离子强度 和 pH=pI 。 14.判断并改错： 无论是亲水性强，还是疏水性强的蛋白质均可采用等电点沉淀。（）改：适用于疏水性强的蛋白质(酪蛋白)。 15.有机溶剂沉淀时，蛋白质的相对分子质量越 大 ，则有机溶剂用量越 少 ；在溶液等电点附近，则溶剂用量越 少 。 16.变性活化能 A 的蛋白质可利用热沉淀法分离。 A.相差较大 B.相差较小 C.相同 D.相反 17.在相同的离子强度下，不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同，一般离子半径 A 效果好。 4 A.小且带电荷较多的阴离子 B.大且带电荷较多的阴离子 C.小且带电荷较多的阳离子 D.大且带电荷较多的阳离子 18.盐析沉淀时，对 A 蛋白质所需的盐浓度低。 A.结构不对称且高分子量的 B.结构不对称且低分子量的 C.结构对称且高分子量的 D.结构对称且低分子量的 19.盐析常数Ks随蛋白质的相对分子量的 增高 或分子结构的 不对称 性而增加。