丝裂原活化蛋白激酶.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第九章,丝裂原活化蛋白激酶,信号转导通路,丝裂原活化蛋白激酶,(,mitogen,-activated protein,kinase,MAPK,),Ser/,Thr,蛋白激酶,受细胞外刺激而激活,在所有真核细胞中高度保守,通路组成,三级激酶模式,调节多种重要的细胞生理,/,病理过程,本章主要内容：,MAPK,信号通路的成员,MAPK,的,蛋白结构,MAPK,通路模式,MAPK,的激活,MAPK,信号转导通路间的关系,一、,MAPK,信号通路的成员,MAPK,是信号从,细胞表面核内,的重要,转递者,。,已鉴定的,(,据,1999,的统计,),：,MAPK,激酶激酶,(MKKK)14,种,MAPK,激酶,(MKK)7,种,MAPK 12,种,MKKK(MAP,Kinase Kinase Kinase,),亚族：,MKK(MAP,Kinase Kinase,),亚族：,MAPK(MAP,Kinase,),亚族：,二、,MAPK,的蛋白结构,（一）,MAPK,的一级结构,苏氨酸磷酸化位点与其他蛋白激酶同源，酪氨酸磷酸化位点是,MAPK,独特的。,磷酸化位点的三肽模体,T,X,Y,ERK,和,ERK5,T,E,Y,p38,T,G,Y,JNK,T,P,Y,三肽模体位于,L12,各亚族,L12,长度不同,活化唇,(activation lip),各亚族都具有,12,个保守亚区,真核细胞蛋白激酶超家族区分标志之一,家族成员之间具有较高的同源性,MAPK,其他名称,与,ERK2,的同源性,%,同一亚族成员序列相似性,%,ERK1,p44 MAPK,88,ERK2,p42 MAPK,100,ERK3,p62 rat ERK3,43,100,ERK3,human ERK3,42,74,JNK1,SAPK,40,87,JNK2,SAPK,41,100,JNK3,SAPK,40,88,哺乳动物,MAPK,哺乳动物,MAPK,MAPK,其他名称,与,ERK2,的同源性,%,同一亚族成员序列相似性,%,ERK2,p42 MAPK,100,p38,p38 CSBP,50,100,p38,p38-2,47,75,p38,ERK6 SAPK3,44,62,p38,SAPK4,42,64,ERK5,BMK1,51,ERK7,41,（二）,MAPK,的二级结构和超二级结构,以,ERK2,为例,N,端域,主要由,折叠和,2,个,螺旋组成,（,1109,和,320358,位氨基酸残基）,C,端域,螺旋，含,磷酸化唇,和,MAPK,插 入，,催化环,（,Arg-147152),（,110319,位氨基酸残基）,交界处的裂隙,ATP,结合位点,（,三）,MAPK,的空间结构特征,大体结构：,非常相似,底物结合口袋的结构特征：,无活性时被阻断，有活性时暴露出。,ATP,结合位点的结构特征：,大小、形状、疏水性和电荷等不同,磷酸基团结合位点：,4,个保守位点,三、,MAPK,通路模式,四、,MAPK,的激活,MAPK,激活机制的发现,重要的实验观察：,20,世纪,80,年代，观察到当,GF,刺激时，,Tyr,被磷酸化的主要蛋白为,42kDa,佛波酯醇刺激时，产生同样的蛋白,胰岛素,RTK,催化,Ser/,Thr,蛋白激酶,胰岛素刺激，产生,Thr,和,Tyr,双磷酸化的,42kDa,蛋白,MAPK,的激活机制,活性部位位于两个折叠域的界面,是通过,Thr,和,Tyr,的双位点同时磷酸化而被激活,例：,ERK2,Tyr-185,Thr-183,pY185,解除,L,12,对底物结合的阻断,MAPK,是,Pro,指导的蛋白激酶,对于,ERK2,来说，其底物的一般保守性序列为,Pro-X-Ser/,Thr,-Pro,活化环中,Tyr,-185,和,Thr,-183,的磷酸化，,引起该环重新折叠，与,Arg,结合位点相互作用,酸性氨基酸替代，不导致组成性活化,MAPK,的点突变不影响其活性,五、酵母,MAPK,通路,酿酒酵母,已鉴定出,5,条,单倍体的交配途径,浸润性生长通路,细胞壁重构通路,双组分渗透压感受器通路,Sho1,渗透压感受器通路,（,一）酵母菌中,MAPK,模式的组成和作用,酿酒酵母,：,4,种,MKKK,4,种,MKK,6,种,MAPK,其中，,4,种参加明确的,5,种,MAPK,通路,2,种,(SMK1,YKL161C),参加未知的,MAPK,通路,3,个成员通过与支架蛋白结合而联在一起,（,二）单倍体酵母与交配有关的通路,酿酒酵母的,2,种交配型,(,单倍体,),：,a,细胞型和,细胞型,2,种性信息素：,a,因子和,因子,7,次跨膜受体：,Ste3,和,Ste2,异三聚体,G,蛋白：,Gpa1,亚基,Ste4,亚基,Ste18,亚基,Ste2 receptor,酿酒酵母的交配通路,ste,：,不育基因,Ste5,：,支架蛋白,Ste12,：,转录因子,支架蛋白,(Scaffold protein),其主要功能是将其他蛋白质结合在一起，促进它们相互作用,。,将细胞信号通路中的各种信号分子结合在一起，形成复合物,起生理性隔室化的效应,从而防止该通路与其他通路发生交联,含有许多蛋白结合域,（三,）,浸润通路,缺乏氮源,形态改变,假菌丝：,缺乏氮源时，椭圆型的双倍酵母进行不对称的细胞分裂以产生一个细而长的子细胞，后者又不断产生长的子细胞。由于母细胞与子细胞仍然相连，因此这种单级分裂方式的不断重复将产生由延长的细胞组成的丝状物,。,KSS1,：,丝状生长所需要,(,单倍体，双倍体,),注：,未被,Ste7,激活时，是浸润生长的抑制物，被,Ste7,激活时，刺激浸润生长。,FUS3,和,KSS1,的,鉴别：,刺激激活的条件不同,FUS3,信息素,KSS1,缺乏氮源,表达不同,FUS3,单倍体细胞中,KSS1,单倍体细胞和双倍体细胞中,对浸润生长的调节作用,FUS3,抑制,KSS1,刺激,（四）细胞壁重构通路,酵母的,生长依赖于有效的细胞壁重构,PKC1,：,MKKKK,MKK1,和,MKK2,的重叠作用意义不清,（五）渗透压感受器和应激通路,酿酒酵母的,2,种渗透压感受器：,“,双组分”,渗透压感受器,低,渗透压条件下激活,膜,渗透压感受器,高,渗透压条件下激活,2,种渗透压感受器对,MAPK,通路的调节 作用不同,1.,“,双组分”,渗透压感受器,“,双组分”,转导体系通常见于原核细胞,“,双组分”,转导体系的组成,感受器分子,胞外区,+,胞质,His,激酶域,+,反应,-,调节分子,接受,域,+DNA,结合域,是一种,His-Asp,磷酸化体系,“,双组分”,转导体系在哺乳类尚未鉴定出,“,双组分”,转导过程,感受器蛋白活化,胞质,激酶域,的,His,磷酸化,反应,-,调节分子接受,域 的,Asp,磷酸化,启动输出功能，即,转录激活作用,酵母,“双组分”,渗透压感受器：,由,3,种蛋白组成,Sln1+Ypd1+Ssk1,两个相连的“双组分”体系,第一个,Sln1(,His,激酶域,和,接受域,),第二个,Ypd1(,His,激酶域,),+,Ssk1,(,接受域,),在,低渗透压,条件下,Sln1,是有活性的,Ssk1,是无活性的,HOG1,也无活性,在,高渗透压,条件下,Sln1,是无活性的,Ssk1,是有活性的,HOG1,也有活性,2.,Sho1,依赖的,渗透压感受器,Sho1,：,跨膜蛋白,渗透压感受器,结构,：,4,个跨膜,区,+,C-,末端胞质区,(,含,SH3,域,),在,高渗透压,条件下,Sho1,感受高渗透,Sho1,激活,Ste11,Pbs2,发挥支架蛋白的作用,Pbs2,含有多聚脯氨酸富集区,3.,裂殖酵母菌中的,渗透压感受通路和,应激通路,环境应激时激活,2,个相关的,MAPK,通路,WIK/WIS/SPC1,通路,WIN1/WIS/SPC1,通路,(,在,渗透压应激时,起主要作用,),上游调节因子,Mcs4,是,Ssk1,蛋白的同源物,ATF1,是,SPC1,的主要核内底物,SPC1,只有经磷酸化后才能入核,热休克和氧,应激时,SPC1,磷酸化激活，但不需要,WIS,的,作用。,Pyp1,使,SPC1,脱,磷酸化,（六）芽孢形成通路,芽孢形成：,是指将单倍体核包装入芽孢的过程,包括减数分裂。,仅发生在双,倍体,由饥饿诱发,芽孢形成过程：,减数分裂,双层膜的原孢子壁包裹单层核膜的,4,个单倍体,从原孢子壁的双层间隙沉积孢子壁。,孢子壁的组成：,共,4,层：,第一、二层：同植物细胞壁,第三层：孢子特异性的结构,聚乙酰氨基葡糖,+,聚氨基葡萄糖,第四层：电子密集层,双酪氨酸包被,从以上酵母,MAPK,通路的研究中看到,:,MAPK,通路是一个连续的蛋白激酶激活的途径,MAPK,的主要底物为转录因子,MAPK,通路受不同的上游因子调节,信号转导是高度特异的,某一种蛋白成员存在于数种通路时,支架蛋白起着隔室化的作用,六、哺乳动物,MAPK,通路,哺乳动物,MAPK,通路不同于酵母,:,多种,MAPK,通路可被一种受体型所激活,MAPK,的主要底物包括转录因子、胞 质蛋白质,、细胞骨架、蛋白激酶和磷脂酶,已鉴定出,4,条,MAPK,通路,MAPK,有,多种亚族和多种不同的剪接体,（一）,ERK,通路,研究得最为透彻,ERK,的,MAPK,有,5,种,(15),它们分属于不同的亚族,ERK1,和,ERK2(ERK1/2),研究得最为透彻 为细胞内主要的,MAPK,ERK3,存在于细胞核,ERK4,通过,Ras,依赖性通路而被激活,1.ERK1/2,通路中,MKKK,许多受体通过活化,Ras,激活,ERK1/2,通路,Raf,:,是该,通路中的重要的,MKKK,亚型,:,有,3,种,A,-,Raf,、,B-,Raf,、,Raf1,组成,:,含,3,个结构域,C,-,末端的激酶域,富含,Cys,的调节域,含,Ras,结合位点的,调节域,表达,:,Raf1,在体内广泛表达,而,A-,Raf,和,B-,Raf,表达方式严格,如,B-,Raf,主要在神经组织中表达,激活,:,酶水平的调节较复杂,主要包括,2,个过程,:,一是结合于,GTP-,Ras,二是,磷酸化,(,一簇,Ser338,Ser339,Tyr340,Tyr341),Raf1,对于,H-,、,K-,和,N-,Ras,显示应答,B-,Raf,可被,Rap1a,活化,TC21,能够与,Raf1,和,B-,Raf,相互作用，激活它们。,上游激酶的调节,:,已知磷酸化,Raf1,的,激酶有,Src,、,PAK,、,PKC,及其他蛋白激酶,其他的磷酸化位点,Ser259,和,Ser621,调节,Raf1,与,14-3-3,蛋白结合，稳定其活性。不过，,14-3-3,蛋白也可能抑制,Raf,活性。抑制性的磷酸化位点是由,Akt,(,Ser259),和,PKA,催化的。,抑制,：,RKIP,可干扰,Raf,-MEK,的,结合，抑制后者磷酸化和活化。,2.ERK1/2,通路中,MKK(MEK),MEK1,和,MEK2,是该通路主要的,MEK,为双特异性蛋白激酶,通过两个残基的磷酸化而被激活,(Ser,或,Thr,)(,同,MAPK),突变可引起其活性增加,(,不同于,MAPK),酸性氨基酸替代，明显增加其活性,特异性较高，仅磷酸化少数底物,MEK4,可,磷酸化非,MAPK,MEK1,和,MEK2,含,3,个非酶,活性结构域,ERK1/2,结合位点,(D,域,),富含,Pro,结构域,核输出序列,(NES),MEK1,富含,Pro,域,NES,D,域,激酶域,MEK1,和,MEK2,的,上游调节因子,Raf,、,RTK,、非,RTK,、,GPCR,在转化细胞：,Ras,Raf1,MEK1,ERK1/2,在心肌细胞,A-,Raf,MEK1,ERK1/2,在,PC,细胞,B-,Raf,MEK1,ERK1/2,3.ERK1/2,蛋白激酶的作用底物及灭活,底物的保守性磷酸化位点模体为,Pro-,Lue-Ser/Thr-Pro,底物蛋白,胞质蛋白,:p90,S6K,、,cPLA,2,、,EGF,受体,细胞骨架,:MAP1,、,2,、,4,、,Tau,转录因子：,Elk-1,Ets-1,Sap1a,c-Myc,等,灭活,:,MKP-1,-3,-4,4.ERK1/2,通路的生物学功能,刺激细胞增殖,抑制细胞生长、分化,细胞周期调控,调控,MTOC,纺锤体的组装,促进细胞存活,某些情况下，与细胞死亡有关,（二）,JNK,信号转导,通路,1991,年鉴定出的新的,MAPK,与,ERK,有两点不同：,被紫外线辐射等细胞应激所激活,磷酸化,c-Jun,的氨基活化位点,故称之为,c-,J,un,N,-terminal,k,inase,(JNK),鼠的,同源物则被命名为,S,tress,a,ctivated,p,rotein,k,inase,(SAPK),。,之所以称为,SAPK,是,因为在应答各种刺激时，它们的活性增加。这些应激包括：,细胞因子,生长因子撤离,干扰,DNA,和蛋白合成的试剂,UV,辐射,热休克,反应活性氧,(ROS),高渗透压,JNK,信号转导,通路,是已知的应答最多样刺激的细胞信号转导途径之一,JNK,通过,Thr-Pro-Tyr,模体的磷酸化被激活,由,JNK,、,MAP2Ks,、,MAP3Ks,和,MAP4Ks,组成,细胞外配体应答的,JNK,通路照比细胞应激应答研究得较为清楚,JNK,：,人的,JNK,由,3,个基因,(,jnk1,jnk,2,和,jnk3,),编码,3,个基因转录产物的不同剪接产生,10,个,JNK,亚型,(46kDa,55kDa),JNK,家族成员间的激酶催化核心的同源性为,87%,同一基因编码的,46kDa,和,55kDa,亚型无明显的功能差异,JNK1,和,JNK2,广泛地在多种组织表达,JNK3,主要在神经组织表达,JNK1,和,JNK2,在激酶域的不同剪接体可改变,JNK,与它们底物的相互作用,不同的亚型受不同的调节,JNK,底物包括：,转录因子,c-Jun,Jun-D,ATF-2,ATF,Elk-1,Sap-1a,GABP,GABP,肿瘤抑制蛋白,p53,JNK,生理功能：,JNK1,和,JNK2,有,重叠功能，在免疫应答和胚胎发育中具有重要的调节作用。,JNK3,在,神经组织中有特异功能,1.JNK,信号,通路,MKK,和,MKKK,MKK(MAP2Ks),MKK,4,(SEK1/MEK4/JNKK1/SKK1),主要激活,JNK,，,但对,p38,也有活化作用,可能是个抑癌基因,胚胎发育所必需,使,细胞免于凋亡,不是惟一的激活剂,MKK7(MEK7/JNKK2/SKK4),特异地激活,JNK,，,而不激活,p38,或,ERK,与,MKK4,相关，属于哺乳动物细胞,MAPKK,超家族,与果蝇的,HEP(DJNK,的激活剂,),密切相关,MKK7,基因编码,6,个蛋白亚型,不同亚型应答不同的细胞外刺激和上游激酶,MKK4,与,MKK7,在人和鼠组织中广泛表达，但在不同的组织起表达的丰度不同,MKK4,与,MKK7,介导来自同一细胞外刺激的信号转导，但它们被不同,MAP3Ks,所激活。,同,MEK1/2,，,用酸性氨基酸置换磷酸化位点的氨基酸，可增加其激酶活性。,MEKK(MAP3Ks),包括：,MEKK14,、,ASK1/MAPKKK5,MAPKKK6,、,TAK1,Tpl-2,、,MLK2/MSK,MLK3/SPRK/PTK1,MUK/DLK/ZPK,LZK,MEKKs,(,M,APK/,E,RK,k,inase,k,inases,),因与酵母的,STE11,同源而被克隆,首先鉴定出的激活,JNK,的,MAP3K,是,MEKK1,目前已克隆的,4,种称为,MEKK14,在蛋白,C-,末端具有同源的激酶域，而它们的,N-,末端几乎无同源性,MEKK1,和,4,与,G,蛋白,Cdc42,和,Rac,相互作用,MEKK1,还可结合,Ras,MEKKs,也,调节其他细胞信号转导途径,MEKK13,激活,ERK,通路,MEKK34,激活,p38,通路,TAK1,(,T,GF-,-,a,ctivated,k,inase,),因其在芽殖酵母中具有回补,STE11,突变体缺失的功能而被克隆,N-,端具有激酶域,C-,末端与,TAB1/2,相互作用,被,TGF-,、,IL-1,、,神经酰胺,、,UV,激活,可直接激活,IKK,和,NF-,B,转录活性,ASK1/MAPKKK5 ASK2/MAPKKK6,(,A,poptosis,s,ignal-regulating,k,inase1),应用,PCR,技术而被鉴定出,激酶域位于蛋白分子的中间,ASK1,MKK4 JNK,ASK1,MKK3 p38,被,TGF-,、,FasL,激活,诱导凋亡,ASK2/MAPKKK6,ASK1,的,相关激酶,(,鼠的,同源物是,ASK2),应用酵母双杂交技术而被鉴定出,整个分子与,ASK1,的同源性为,45%,但激酶域的同源性高达,82%,与,MEKK14,的,同源性约为,40%,仅能较弱地激活,JNK,，,但并不能,激活,p38,Tpl-2/cot,(,T,umor,p,rogression,l,ocus,2,),最初作为原癌基因而被克隆,与人的,cot,基因,约有,90%,的相同性,与其他的,MAP3K,约有,30%,的相同性,Tpl-2,MEK1 ERK,Tpl-2,MKK4 JNK,参与,NF-,B,的激活,MLK,s,(,M,ixed,l,ineage,k,inase,),该家族激酶的特点：,催化域具有,Tyr,和,Ser/,Thr,两种蛋白激酶的结构特点,N-,端含有,SH3,模体,C-,端有,Pro,富集区,C-,端附近有亮氨酸拉链,MLK2/MST,(,m,ammalian,ST,E 20-like),MLK2,MEK4 JNK,MLK2,MKK7 JNK,对,p38,和,ERK,的作用较弱,含有,Cdc42,和,Rac,的结合位点,MLK3/SPRK/PTK,MLK3,MKK4 JNK,MLK3,MKK3/6 p38,对,ERK,无作用,MUK/DLK/ZPK/LZK,(,M,APK-,u,pstream,k,inase,),(,d,ual,l,uecine,zipper-bearing,k,inase,),(,luecine,z,ipper-,p,rotein,k,inase,),(,l,uecine,z,ipper-bearing,k,inase,),MUK,MEK7 JNK,LZK,激活,JNK,MAP4Ks,STE20,相关激酶,N-,端具有,STE20,样的催化域,中间至少有,2,个,Pro,富集域,C-,端有,CNH,域,是,JNK,强的,特异性激活剂,GCK,(,g,erminal,c,enter,k,inase,),KHS,(,k,inase,h,omologous to,S,TE20,),GCKR,(,GCK,-,r,elated,kinase,),GLK,(,G,CK,l,ike,k,inase,),TAO1,(,T,housand,a,nd,o,ne amino acid,protein,kinase,),应用,PCR,方法从大白鼠脑的,cDNA,文库中鉴定出。,主要在脑和睾丸中表达,激酶域与其他,STE20,相关激酶的同源性约,45%,主要激活,MKK3,HPK1,(,h,ematopoietic,p,rogenitor,k,inase,),主要在造血细胞中表达,含有,4,个,Pro,富集域,与连接物蛋白相互作用,受,酪氨酸蛋白激酶调节,主要激活,JNK,，,不是,ERK,和,p38,在,TGF-,诱导的,JNK,激活中是,TAK,的上游,支架蛋白：,在哺乳动物细胞中了解有限,JIP1,(,J,NK-interacting,p,rotein 1),应用酵母双杂交筛选出,主要结合,JNK,，,不是,ERK,和,p38,抑制,JNK,的核转位,结合,MKK7,与,MLK,家族、,HPK1,相互作用,（,三）,p38,信号转导通路,p38,最初作为,LPS,刺激产生的酪氨酸磷酸蛋白而被鉴定出,p38,与,酵母,HOG1,具有明显的同源性,p38,是,细胞抑制性抗炎药的靶分子,双磷酸化三肽模体,Thr-Gly-Tyr,不同亚型的表达、激活和特异性不同,亚型之间有重叠的、不同的生理作用,p38,的表达：,p38,：,白细胞、肝、脾、骨髓中等高表达,p38,：,脑和心中高表达,p38,：,主要在骨骼肌中表达,p38,：,肺、肾、肠及内分泌器官中高表达,注：,p38,和,p38,具有不同的剪接体,例：,Mxi,缺少,80,氨基酸残基的,p38,p38,的结构：,N-,末端、,C-,末端延伸短，与已知其他激酶无同源性,(p38,家族成员和,JNK,亚型除外,),相似于,ERK2,，,但活化环构象差异明显,ATP,结合位点相对开放,磷酸化唇序列,比,ERK2,短,6,个氨基酸残基,1.p38,信号转导通路的,MKK,和,MKKK,MEKs,:,MEK3,和,MEK6,是细胞中,p38,激活的主要激酶。,不同的,MEK,选择性地激活不同的亚型,MEK6,共同的激活剂,MEK3,激活,p38,MEKKs,:,MEKK13,参与,p38,激活,MEKK1,MEK4,p38(3T3,细胞,),MEKK3,MEK3,p38(,转化细胞,),MLK,家族的,4,个成员参与,p38,激活,其他激酶,Tp12,ASK,TAK,MLK,家族成员含有,3,个结构域：,SH3,域,亮氨酸拉链,小分子,G,蛋白结合域,参与,p38,激活的,4,个成员是：,MUK/ZPK/DLK,MTK1/MEKK4,MLK2/MST,MLK3/PTK/SPRK,上游调节因子：,Rac,、,Cdc42,、,Rho,家族,的小分子,GTPase,是,p38,途径的较强的调节因子。,Rac/Cdc42 PAK p38,来自细胞表面的活化：,异三聚体,G,蛋白可激活,p38,途径，但激活机制因细胞不同而异。,M,1,-,乙酰胆碱受体,-Gq/11,M,2,-,乙酰胆碱受体,-,Gi,-,肾上腺素受体,-Gs(HEK293,细胞,),1A-,肾上腺素受体,-Gs(PC12,细胞,),-,肾上腺素受体,-,Gi,(ARVM,细胞,),激活,p38,途径的物理、化学应激：,氧化应激,(,巨噬细胞,),低渗压,(HEK293,细胞,),紫外线辐射,(PC12,细胞,),低氧,(,牛肺动脉成纤维细胞,),循环扩张,(,肾小球膜细胞,),亚,细胞定位：,细胞核、胞质,(,免疫荧光显微镜,),应激反应，如心肌缺血、低氧时，,胞质 核,p38,的,抑制剂：,吡啶咪唑,结合于,ATP,结合位点延伸袋,p38,敏感,p38,不敏感,2.p38,蛋白激酶的作用底物和灭活,作用底物,:,细胞骨架,细胞应激,微管相关蛋白,(,tau,),stathmin,(,癌蛋白,18,）,细胞质蛋白,刺激血小板,cPLA,2,血管紧张素,Na,+,/H,+,交换体,转录因子,ATF1/2,(,a,ctivation,t,ranscription,f,actor,1/2,),CHOP10,(,C,/EBP-,ho,mologus,p,rotein,10,),MEF2C,(,m,yocyte,e,nhancer,f,actor,2C,),Max,(,m,yc,a,ssociated factor,X,),MAPKAPK 2/3,MNK1/2,(,M,APK-i,n,teracting,k,inase,1/2,),PRAK,(,p,38-,r,egulated/,a,ctivated,k,inase,),p38,蛋白激酶灭活：,蛋白激酶磷酸酶,M3/M6,3.p38,信号转导通路的功能,主要参与应激反应，此外,血细胞细胞因子的生成,(,单核细胞：,IL-1,，,TNF-,),细胞凋亡,免疫反应调控,p38,亚型的作用：,p38,：,特异地参与,LPS,介导的细胞反应,如黏附、,NF-,B,活化、,TNF-,合成,诱导凋亡,p38,：,促进细胞存活,总之，,p38,在,细胞增殖、分化和生存过程中起作用。,（,四）,MKK5/ERK5,通路,ERK5,(BMK,big,mitogen,-activated,kinase,),：,MAPK,家族中分子量最大的成员,故有,BMK,之称,与,ERK2,有,52%,的同源性,双磷酸化三肽模体为,TEY,MEK,：,MEK5(,两种亚型,),活化和上游调节因子,生长因子,应激,(,如氧化应激、高渗透压,),血清,Src,和,Ras,是,ERK5,信号转导途径的调节因子,GPCR(Gq,和,G12/13),也调节,ERK5,活性,MKKK MEKK3,、,Tpl-2,ERK5,的,作用底物：,MEF2,家族,(A,C,D),Ets,样,转录因子,Sap1a,(,s,erum response factor,a,cessory,p,rotein,1a,),抑制剂：,无特异性的抑制剂,MKP1/3,使,MEK5,脱磷酸,高浓度,PD98059,和,U0126,抑制,MEK5,活性,（五）孤儿,MAPK,1.ERK3,亚型,研究最少,分为,ERK3,和,ERK3,(74%,同源性,),单一磷酸化位点,(Ser),组成性定位于核,2.ERK7,亚型,催化区与,ERK2,有,40%,的同源性,双磷酸化三肽模体,Thr-Glu-Tyr,具有自我调节功能,氯通道相关蛋白可与非催化区结合,(,c,h,l,oride,i,ntracellular,c,hannel protein 3,CLIC3),2.NLK,(,N,emo,-,l,ike,k,inase,),催化区与,ERK2,有超过,45%,的同源性,缺少,Tyr,磷酸化位点,Lit-1(,线虫的同源体,),是,Mom-4(,蠕虫,TAK1,的同源体,),的下游,下调,Wnt,信号,2.MOK,(,M,APK/MAK/MRK,o,verllaping,k,inase,),与,ERK2,有,30%,的同源性,双磷酸化位点,佛波酯醇和,OA,增加其活性,相关激酶,MAK(,m,ale germ cell,a,ssociated,k,inase,),MRK(,M,AK-,r,elated,k,inase,),