东北财经大学《生物化学与分子生物学实验》2024 - 2025 学年第一学期期末试卷.pdf

（第第 1 1 页页 ）东北财经大学生物化学与分子生物学实验2024-2025 学年第一学期期末试卷 学院 专业/班级 学号 姓名 题 号 一 二 三 四 五 六 七 八 总分 阅卷 教师 得 分 一、单项选择题（总共 10 题，每题 3 分，每题只有一个正确答案，请将正确答案填写在括号内）1.下列哪种实验技术可用于蛋白质的定量分析？（）A.SDS-PAGE B.Western blot C.Bradford 法 D.聚合酶链式反应 2.在 DNA 提取实验中，常用的蛋白酶 K 的作用是（）。A.水解蛋白质 B.降解 RNA C.沉淀 DNA D.促进 DNA 溶解 3.以下哪种方法可用于检测 DNA 片段的大小？（）A.紫外分光光度法 B.凝胶过滤层析 C.琼脂糖凝胶电泳 D.离子交换层析 4.进行蛋白质电泳时，SDS 的作用是（）。A.使蛋白质带上负电荷 B.破坏蛋白质的二级结构 C.增加蛋白质的溶解度 D.以上都是 制卷人签名制卷人签名：制卷日期制卷日期：审核人签名：审核人签名：审核日期：审核日期：装 订线 （第第 2 2 页页 ）5.下列关于 PCR 反应体系的描述，错误的是（）。A.需要模板 DNA B.需要引物 C.需要核糖核苷酸 D.需要 Taq 酶 6.在酶活性测定实验中，为了准确测定酶活性，下列哪种做法是正确的？（）A.反应体系中底物浓度应过量 B.反应体系中酶浓度应过量 C.反应时间越长越好 D.反应温度越高越好 7.用于分离细胞器的常用方法是（）。A.差速离心法 B.密度梯度离心法 C.凝胶过滤法 D.离子交换法 8.下列哪种物质可作为蛋白质印迹实验中的封闭剂？（）A.脱脂奶粉 B.SDS C.溴酚蓝 D.乙醇 9.在 DNA 测序实验中，常用的方法是（）。A.Sanger 法 B.化学裂解法 C.焦磷酸测序法 D.以上都是 10.进行蛋白质纯化时，离子交换层析的原理是基于蛋白质的（）。A.分子量大小 B.电荷性质 C.疏水性 （第第 3 3 页页 ）D.亲和力 二、多项选择题（总共 5 题，每题 4 分，每题有两个或两个以上正确答案，请将正确答案填写在括号内，多选、少选或错选均不得分）1.下列哪些实验技术可用于蛋白质的分离纯化？（）A.离子交换层析 B.凝胶过滤层析 C.亲和层析 D.疏水层析 2.在核酸杂交实验中，常用的探针标记方法有（）。A.放射性标记 B.荧光标记 C.酶标记 D.化学发光标记 3.下列关于 PCR 反应的描述，正确的是（）。A.包括变性、退火、延伸三个步骤 B.反应体系中需要 dNTP C.引物的设计对 PCR 反应的特异性很重要 D.可以用于扩增特定的 DNA 片段 4.进行蛋白质免疫印迹实验时，需要用到的试剂有（）。A.一抗 B.二抗 C.底物显色剂 D.封闭剂 5.下列哪些方法可用于检测蛋白质与 DNA 的相互作用？（）A.凝胶迁移实验 B.染色质免疫沉淀实验 C.酵母双杂交实验 D.表面等离子体共振技术 三、判断题（总共 10 题，每题 2 分，请判断下列说法的对错，正确的打“”，错误的打“”）（第第 4 4 页页 ）1.SDS-PAGE 可以分离不同分子量的蛋白质，但不能确定蛋白质的分子量大小。（）2.在 DNA 提取过程中，加入氯仿的目的是使蛋白质变性沉淀。（）3.PCR 反应中，退火温度越高，引物与模板的结合特异性越强。（）4.蛋白质印迹实验中，一抗和二抗都需要与靶蛋白具有特异性结合。（）5.酶活性测定实验中，反应体系的 pH 值对酶活性没有影响。（）6.密度梯度离心法可以根据物质的密度差异进行分离。（）7.核酸杂交实验中，探针与靶核酸的杂交是基于碱基互补配对原则。（）8.蛋白质纯化过程中，纯度越高，蛋白质的活性也越高。（）9.DNA 测序实验中，Sanger 法是通过电泳分离不同长度的 DNA 片段来确定序列。（）10.酵母双杂交实验可以检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用。（）四、简答题（总共 3 题，每题 10 分，请简要回答下列问题）1.请简述 SDS-PAGE 实验的基本原理和操作步骤。2.简述 PCR 反应的原理及其在分子生物学研究中的应用。3.说明蛋白质免疫印迹实验的原理、主要步骤及应用。五、实验设计题（总共 1 题，20 分，请设计一个实验方案）设计一个实验，从细胞中提取总 RNA，并进行反转录合成 cDNA，然后利用 PCR 技术扩增一个特定的基因片段。请详细描述实验步骤、所需试剂及仪器，并说明如何验证扩增产物的特异性。