抗核抗体检测及临床意义.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,抗核抗体检测及其意义,1,自身抗体定义,自身抗体,是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体。正常的免疫反应有保护性防御作用，对自身组织、成分不发生反应。,旦自身耐受的完整性遭到破坏，则机体视自身组织、成分为“异物”，而发生自身免疫反应，产生自身抗体。正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体，但不会发生疾病，但如果自身抗体的滴度超过某,水平，就可能对身体产生损伤，诱发疾病。,2,自身免疫性疾病相关自身抗体,抗核抗体谱（,ANAs,）,类风湿关节炎相关抗体,(RF,抗,CCP,等,),抗中性粒细胞胞浆抗体（,ANCA,）,抗自身免疫性肌炎谱,自身免疫性肝病相关抗体谱,抗磷脂抗体谱,3,抗核抗体谱（,ANAs,）,ANAs,抗核不溶成分,抗核可溶成分,（抗,ENA,）,抗染色体,DNA,蛋白,抗核仁抗体,抗,DNA,抗体,抗核小体抗体,抗组蛋白,H,1,H,2,A,H,2,B,H3,H4,抗,Sm,U,1,RNP,SSA,SSB,抗,Scl-70,Jo-1,PM-1,抗,rRNP,PCNA,.,dsDNA,ssDNA,抗着丝点抗体,（,ACA),抗,5sRNA,4,ANA,是一类能与多种细胞核抗原反应的自身抗体，许多自身免疫性疾病都可以出现阳性。如系统性红斑性狼疮,(SLE),、混合结缔组织病（,MTCD,）、干燥症,(SS,）、全身性硬皮症,(PSS,）。,ANA,测定在许多胶原病病人均可呈阳性，需进一步作抗,DNA,抗体和抗,ENA,抗体测定鉴别。,抗核抗体,(ANA),5,抗双链,DNA,抗体（抗,ds-DNA,抗体）,脱氧核糖核酸分为双链,DNA,（,dsDNA,）和单链,DNA,（,ssDNA,）两种。针对前者的自身抗体为系统性红斑狼疮的标记性抗体，而后者则见于多种风湿性疾病。,6,抗核提取物抗体，是抗小分子细胞核核糖核蛋白（,snRNPs,）和小分子细胞浆核糖核蛋白（,scRNPs,）的自身抗体，不含组蛋白。包括：抗,nRNP,抗体、抗,Sm,抗体、抗,SSA,抗体、抗,SSB,抗体、抗,Scl-70,抗体、抗,Jo-1,抗体等。对诊断和鉴别诊断有重要意义，与疾病严重程度和活动性无明显相关。,抗,ENA,抗体,7,抗中性粒细胞胞浆抗体（,ANCA,）,靶抗原为丝氨酸蛋白酶,PR3,、,MPO,等，是系统性血管炎的血清标记物。,ANCA,主要表现两种核型：胞浆型（,c-ANCA,）：主要与韦格氏肉芽肿血管炎有关；核周型（,p-ANCA,）主要见于血管炎、,Churg-Strass,综合症和少免疫沉积型节段坏死性肾小球肾炎和新月体肾炎。,8,ANA,检测方法,-IIF,法,ANA,滴度,ANA,核型,9,荧光显微镜下,ANA,的染色型别,均质型,颗粒型,核膜型,核仁型,着丝点型,胞浆型,混合型等,10,核均质型,11,核粗颗粒型,HEp-2,：间期细胞核呈颗粒样荧光，核仁阴性；分裂期细胞浓缩染色体阴性，染色体周围呈颗粒样荧光,肝片：肝细胞核呈颗粒样荧光。核仁阴性；荧光强度与,HEp-2,基本一致,靶抗原：,nRNP,、,Sm,12,核膜型,13,抗,dsDNA,检测方法,以,短膜虫,或,马疫锥虫,为底物的间接免疫荧光法,(IIF),短膜虫或马疫锥虫的动基体,内含有,天然纯,dsDNA,，未经,人工处理，不含,组蛋白与,ssDNA,，,抗原性纯一特异。,优点：,特异性好,14,抗,dsDNA,抗体临床意义,SLE,的血清特异性抗体,多有致病性（,IgG,型），与亲和力（高）有关,与,LN,（狼疮肾炎）和,SLE,疾病活动性相关，活动期达,90,可用于,SLE,疾病活动期判断药物疗效观察,与,SLE,急性皮疹,、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关,15,抗,ENA,抗体,e,xtractable,n,uclear,a,ntigen,可提取性核抗原,成分：,核酸与核蛋白，不含染色质成分,功能：参与细胞内,DNA,复制、,RNA,转录、蛋白翻译,合成,来源：无种属差异，有组织不均一性,理化特性：对,温度,和,RNA,酶,敏感,（,U1RNP,、,SS-A,）,意义：抗,ENA,抗体是,ANAs,中,范围最广,、,最为重要,的,一簇抗体，与,疾病活动性大多无相关,16,抗,ENA,抗体检测方法,免疫双扩散法,(ID),对流免疫电泳法,(CIE),免疫印迹法,(IBT),酶联免疫吸附法,(ELISA),蛋白芯片（,Protein chip,）,17,抗,RNP,抗体,高达,50,%,的,SLE,病人和,95,%,的,MCTD,病人血清中可检测到此抗体，典型的,MCTD,病人血清中可检测到高滴度的针对,Sm/RNP,免疫复合物的抗,-RNP,抗体，而往往检测不到抗,-Sm,抗体。,18,抗,Sm,抗体,30,%,的,SLE,病人可检测到抗,-Sm,抗体，在肾炎病人和某些中枢神经严重损伤的病人也可检测到。,19,抗,SSA,抗体,在,SLE,、风湿性关节炎（,RA,）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到,SS-A,抗体，此外在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（,NLE,）病人也可检测到。,20,抗,SSB,抗体,在,SLE,、风湿性关节炎,(RA,）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到,SS-B,抗体，在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（,NLE,）病人也可检测到。,SS-B,抗体一般与,SS-A,抗体同时出现。若病人血清中可检测到,SS-A,抗体而不伴有,SS-B,抗体的出现，此病人继发肾炎的风险较大。,21,22,23,抗,Jo-1,抗体,20-30,%,的多发性肌炎,/,皮肌炎，,30-40,%,的多发性肌炎患者和高达,60,%,的多发性肌炎伴有间质性肺疾病患者血清中可检测到抗,-Jo-1,抗体。其它胶原性疾病中很少检出此抗体。,24,抗,ScL-70,抗体,靶抗原：,DNA,拓朴异构酶,I,的降解产物,主要存在,核仁,中,40%,的硬皮病和,20-30,%,的全身性硬皮病患者中可检测到此抗体，很少在其它自身风湿性疾病中出现。,25,