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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,真题重做,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,-,*,-,必备精要,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,-,*,-,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,-,*,-,高频考点,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,-,*,-,-,*,-,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,-,*,-,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,-,*,-,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第十五讲基因工程与细胞工程,第1页,-,2,-,2,1,3,4,5,1,.(,全国,理综,38),回答以下问题。,(1),博耶,(H.Boyer),和科恩,(S.Cohen),将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表示。该研究除证实了质粒能够作为载体外,还证实了,(,答出两点即可,),。,(2),体外重组质粒可经过,Ca,2+,参加,方法导入大肠杆菌细胞,;,而体外重组噬菌体,DNA,通常需与,组装成完整噬菌体后,才能经过侵染方法将重组噬菌体,DNA,导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞是,。,(3),真核生物基因,(,目标基因,),在大肠杆菌细胞内表示时,表示出蛋白质可能会被降解。为预防蛋白质被降解,在试验中应选取,大肠杆菌作为受体细胞。在蛋白质纯化过程中应添加,抑制剂。,第2页,-,3,-,2,1,3,4,5,答案,:,(1),体外重组质粒能够进入受体细胞,;,真核生物基因可在原核细胞中表示,(2),转化外壳蛋白,(,或噬菌体蛋白,),细菌,(3),蛋白酶缺点型蛋白酶,解析,:,本题主要考查基因工程操作步骤及应用。,(1),该实例能够说明很多问题,比如体外重组质粒能够进入受体细胞,真核细胞基因也能够在原核细胞中表示,真核生物和原核生物共用同一套密码子,质粒化学本质是,DNA,等。,(2),目标基因导入细菌能够用,Ca,2+,处理细菌,从而使目标基因导入受体细胞。噬菌体由,DNA,和蛋白质外壳组成,噬菌体属于细菌病毒,即其宿主细胞为细菌,所以需要将重组噬菌体导入细菌中。为了预防目标基因所表示蛋白质被细菌内蛋白酶所降解,要选择蛋白酶缺点型大肠杆菌,即不能产生蛋白酶大肠杆菌作为受体细胞。同时,在纯化蛋白质过程中能够加入蛋白酶抑制剂,以降低蛋白酶活性。,第3页,-,4,-,2,1,3,4,5,2,.(,全国,理综,38),某种荧光蛋白,(GFP),在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特征可用于检测细胞中目标基因表示,某科研团体将某种病毒外壳蛋白,(L1),基因连接在,GFP,基因,5,末端,取得了,L1-GFP,融合基因,(,简称为甲,),并将其插入质粒,P0,构建了真核表示载体,P1,其部分结构和酶切位点示意图以下,图中,E1E4,四种限制酶产生黏性末端各不相同。,第4页,-,5,-,2,1,3,4,5,回答以下问题。,(1),据图推断,该团体在将甲插入质粒,P0,时,使用了两种限制酶,这两种酶是,使用这两种酶进行酶切是为了确保,也是为了确保,。,(2),将,P1,转入体外培养牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明,L1,基因在牛皮肤细胞中完成了,和,过程。,(3),为了取得含有甲牛,该团体需要做工作包含,:,将能够产生绿色荧光细胞,移入牛,中,体外培养、胚胎移植等。,(4),为了检测甲是否存在于克隆牛不一样组织细胞中,某同学用,PCR,方法进行判定,在判定时应分别以该牛不一样组织细胞中,(,填,“mRNA”“,总,RNA”,或,“,核,DNA”),作为,PCR,模板。,第5页,-,6,-,2,1,3,4,5,答案,:,(1)E1,和,E4,甲完整甲与载体正确连接,(2),转录翻译,(3),细胞核去核卵母细胞,(4),核,DNA,第6页,-,7,-,2,1,3,4,5,解析,:,本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程相关内容。,(1),由题意可知,E1E4,四种限制酶产生黏性末端各不相同,将甲,(L1,-,GFP),插入质粒时,使用,E1,和,E4,两种限制酶进行酶切,既确保了甲完整,又预防了甲本身环化,确保了甲与载体正确连接。,(2),将,P1,转入体外培养牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明该细胞中合成了荧光蛋白,即,L1,基因在牛皮肤细胞中完成了遗传信息转录和翻译。,(3),为了取得含有甲牛,可经过体细胞核移植技术、体外培养和胚胎移植来实现。,(4),克隆牛不一样组织细胞中基因选择性表示,转录出,mRNA,不一样,总,RNA,也不一样,但不一样组织细胞中核,DNA,相同,所以检测甲是否存在于克隆牛不一样组织细胞中,用,PCR,方法进行判定时,应以核,DNA,作为模板。,第7页,-,8,-,2,1,3,4,5,3,.(,全国,理综,38),年细胞期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,取得两只克隆猴,“,中中,”,和,“,华华,”,。回答以下问题。,(1)“,中中,”,和,“,华华,”,取得包括核移植过程,核移植是指,。,经过核移植方法取得克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞染色体数目,(,填,“,减半,”“,加倍,”,或,“,不变,”),。,(2),哺乳动物核移植能够分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植取得克隆动物难度,(,填,“,大于,”,或,“,小于,”),体细胞核移植,其原因是,。,(3),在哺乳动物核移植过程中,若分别以雌性个体和雄性个体体细胞作为核供体,通常,所得到两个克隆动物体细胞常染色体数目,(,填,“,相同,”,或,“,不一样,”),性染色体组合,(,填,“,相同,”,或,“,不一样,”),。,第8页,-,9,-,2,1,3,4,5,答案,:,(1),将动物一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核卵母细胞中不变,(2),小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对轻易,(3),相同不一样,解析,:,本题以克隆动物为背景考查动物细胞工程操作及应用。,(1),克隆动物过程中包括动物细胞工程技术有核移植技术、胚胎移植技术等,其中核移植技术是指将供体细胞细胞核移入一个去核卵母细胞中,构建重组细胞,使其发育成一个胚胎,未来发育成一个动物个体。在整个过程中,细胞只进行有丝分裂,细胞中染色体数目不变。,(2),胚胎细胞比体细胞分化程度低,故胚胎细胞核移植比体细胞核移植成功难度小。,(3),经过核移植取得克隆动物过程中,细胞中染色体数目不变。雌、雄动物常染色体数目相同,而性染色体组合不一样。,第9页,-,10,-,2,1,3,4,5,4,.(,全国,理综,38),真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所含有切除内含子对应,RNA,序列机制。已知在人体中基因,A(,有内含子,),能够表示出某种特定蛋白,(,简称蛋白,A),。回答以下问题。,(1),某同学从人基因组文库中取得了基因,A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白,A,其原因是,。,(2),若用家蚕作为表示基因,A,受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选取,作为载体,其原因是,。,第10页,-,11,-,2,1,3,4,5,(3),若要高效地取得蛋白,A,可选取大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌含有,(,答出两点即可,),等优点。,(4),若要检测基因,A,是否翻译出蛋白,A,可用检测物质是,(,填,“,蛋白,A,基因,”,或,“,蛋白,A,抗体,”),。,(5),艾弗里等人肺炎双球菌转化试验为证实,DNA,是遗传物质做出了主要贡献,也能够说是基因工程先导,假如说他们工作为基因工程理论建立提供了启示,那么,这一启示是,。,第11页,-,12,-,2,1,3,4,5,答案,:,(1),基因,A,有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应,RNA,序列不能被切除,无法表示出蛋白,A,(2),噬菌体噬菌体宿主是细菌,而不是家蚕,(3),繁殖快、轻易培养,(4),蛋白,A,抗体,(5)DNA,能够从一个生物个体转移到另一个生物个体,第12页,-,13,-,2,1,3,4,5,解析,:,(1),人基因,A,含有内含子,其转录出,RNA,需切除内含子对应,RNA,序列后才能翻译出蛋白,A,大肠杆菌是原核生物,其没有切除内含子对应,RNA,序列机制,故将人基因,A,导入大肠杆菌无法表示出蛋白,A,。,(2),噬菌体是一个专门寄生在细菌体内病毒,无法寄生在家蚕中。,(3),大肠杆菌繁殖快、轻易培养,惯用作基因工程受体。,(4),在分子水平检测目标基因是否表示应用抗原,抗体杂交法,即用蛋白,A,与蛋白,A,抗体进行杂交。,(5),艾弗里肺炎双球菌转化试验原理是基因重组,经过重组使得,S,型细菌,DNA,在,R,型细菌中表示,这种思绪为基因工程理论建立提供了启示。,第13页,-,14,-,2,1,3,4,5,5,.(,全国,理综,38,节选,),编码蛋白甲,DNA,序列,(,序列甲,),由,A,、,B,、,C,、,D,、,E,五个片段组成,编码蛋白乙和丙序列由序列甲部分片段组成,如图,1,所表示。,第14页,-,15,-,2,1,3,4,5,回答以下问题。,现经过基因工程方法取得了甲、乙、丙三种蛋白,要判定这三种蛋白是否含有刺激,T,淋巴细胞增殖作用,某同学做了以下试验,:,将一定量含,T,淋巴细胞培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定时检测,T,淋巴细胞浓度,结果如图,2,。,由图,2,可知,:,当细胞浓度到达,a,时,添加蛋白乙培养液中,T,淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使,T,淋巴细胞继续增殖,可采取方法是,。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定,CO,2,浓度,CO,2,作用是,。,仅依据图,1,、图,2,可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺乏,(,填,“A”“B”“C”“D”,或,“E”),片段所编码肽段,则会降低其刺激,T,淋巴细胞增殖效果。,第15页,-,16,-,2,1,3,4,5,答案,:,进行细胞传代培养维持培养液,pH,C,解析,:,当细胞浓度到达,a,时,T,淋巴细胞浓度不再增加,是因为出现了接触抑制现象,所以能够进行细胞传代培养,使,T,淋巴细胞继续增殖,;,培养箱中通常要维持一定,CO,2,浓度,CO,2,作用是维持培养液,pH,。依据图,2,可知,甲、乙两组,T,淋巴细胞数量多,丙组,T,淋巴细胞数量少,结合图,1,分析比较可知,丙组,T,淋巴细胞少原因是蛋白丙缺乏,C,片段所编码肽段。,第16页,-,17,-,网络梳理,填一填,高考必背,记一记,易混易错,判一判,第17页,-,18,-,网络梳理,填一填,高考必背,记一记,易混易错,判一判,A.,限制酶,B.,体外基因治疗,C.,体内基因治疗,D.,将目标基因导入受体细胞,E.,标识基因,F.,开启子,G.DNA,分子杂交,H.DNA,与,RNA,杂交,I.,抗原,抗体杂交,J.,植物细胞全能性,K.,植物组织培养,L.,核移植,M.,特异性强,N.,可大量制备,第18页,-,19,-,网络梳理,填一填,高考必背,记一记,易混易错,判一判,1,.,限制酶含有特异性,即一个限制酶只能识别特定碱基序列,并在特定位点上进行切割。,2,.,质粒是惯用目标基因载体,它是一个小型环状,DNA,分子,含有一个至多个限制酶切割位点及标识基因。,3,.,目标基因获取有从基因文库中获取和人工合成两类方法。,4,.,基因表示载体包含目标基因、开启子、终止子和标识基因等。,5,.,目标基因导入植物细胞惯用农杆菌转化法,;,导入动物细胞惯用显微注射技术,导入微生物细胞惯用感受态细胞法。,6,.,植物组织培养需要各种营养成份和植物激素,动物细胞培养也需要各种营养成份及血清、血浆等一些天然成份。,7,.,植物体细胞杂交可用于作物育种,动物细胞融合可用于单克隆抗体制备。,8,.,产生单克隆抗体细胞是杂交瘤细胞,它既能产生单克隆抗体又能无限增殖。,第19页,-,20,-,网络梳理,填一填,高考必背,记一记,易混易错,判一判,1,.,转基因抗虫棉植株抗虫效果判定必须经过分子检测。,(,),2,.,一个限制性核酸内切酶只能识别一个特定脱氧核苷酸序列。,(,),3,.,每个重组质粒最少含有一个限制性核酸内切酶识别位点。,(,),4,.,自然界中天然存在噬菌体自行感染细菌后其,DNA,整合到细菌,DNA,上,属于基因工程。,(,),5,.,转抗虫基因植物,不会造成昆虫群体抗性基因频率增加。,(,),6,.,动物生长激素基因转入植物后不能表示。,(,),第20页,-,21,-,网络梳理,填一填,高考必背,记一记,易混易错,判一判,7,.,产生抗人白细胞介素,-8,抗体杂交瘤细胞筛选必须经过分子检测。,(,),8,.,培育草莓脱毒苗所采取主要技术是组织培养。,(,),9,.,去除植物细胞细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理。,(,),10,.,乳腺细胞比乳腺癌细胞更轻易进行离体培养。,(,),11,.,动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体表达了细胞全能性。,(,),12,.,细胞核移植主要在同种动物、同种组织细胞之间进行。,(,),第21页,-,22,-,考点,1,考点,2,考点,1,基因工程及转基因技术安全性,热考题点必练,题点,1,考查基因工程操作基本工具及,PCR,技术,1,.(,四川成都七中二诊,38),图,1,表示含有目标基因,D,DNA,片段长度,(bp,即碱基对,),和部分碱基序列,图,2,表示一个质粒结构和部分碱基序列。现有,Msp,、,Bam,H,、,Mbo,、,Sma,4,种限制性核酸内切酶切割碱基序列和酶切位点分别为,CCGG,、,GGATCC,、,GATC,、,CCCGGG,。请回答以下问题。,第22页,-,23,-,考点,1,考点,2,第23页,-,24,-,考点,1,考点,2,(1),若用限制酶,Sma,完全切割图,1,中,DNA,片段,其产物长度为,。,(2),若图,1,中虚线方框内碱基对被,TA,碱基对替换,那么基因,D,就突变为基因,d,。从隐性纯合子分离出图,1,及其对应,DNA,片段,用限制酶,Sma,完全切割,产物中共有,种不一样,DNA,片段。为了提升试验成功率,需要经过,技术扩增目标基因,以取得大量目标基因。,(3),若将图,2,中质粒和目标基因,D,经过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选取限制酶是,。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒大肠杆菌,普通先用添加,培养基进行培养,然后将生长菌接种到只含,培养基中培养,可深入筛选出含重组质粒受体细胞。,第24页,-,25,-,考点,1,考点,2,(4),假设用,Bam,H,切割,DNA,获取目标基因,用,Mbo,切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素,B,抗性基因处目标基因重新切割下来,能否用,Bam,H,?,。为何,?,。,答案,:,(1)537bp,、,790bp,、,661bp,(2)2,PCR,(3),Bam,H,抗生素,B,抗生素,A,(4),不一定能因为目标基因和抗生素,B,抗性基因拼接处不一定出现,GGATCC,序列,第25页,-,26,-,考点,1,考点,2,解析,:,(1),依据题意,限制酶,Sma,酶切位点是,CCCGGG,完全切割图,1,中,DNA,片段,会产生平末端,在图,1,中有两个限制酶,Sma,酶切位点,DNA,将被切割成,3,个片段,其产物长度为,534+3=537(bp),、,796-3-3=790(bp),、,658+3=661(bp),。,(2),若图,1,中虚线方框内碱基对被,TA,碱基对替换,基因,D,就突变为基因,d,那么基因,d,上只有一个限制酶,Sma,切割位点,被限制酶,Sma,切割产物长度为,534+796-3=1,327(kb),、,658+3=661(bp),所以从隐性纯合子,(dd),分离出图,1,及其对应,DNA,片段,用限制酶,Sma,完全切割,产物中共有,2,种不一样,DNA,片段。为了提升试验成功率,需要经过,PCR,技术扩增目标基因,以取得大量目标基因。,第26页,-,27,-,考点,1,考点,2,(3),由图,1,可知,目标基因两侧是,GGATCC,序列,该序列是限制酶,Bam,H,识别序列,所以要将质粒和目标基因,D,连接形成重组质粒,应选取限制酶,Bam,H,切割。用限制酶,Bam,H,切割质粒后,破坏了抗生素,A,抗性基因,但没有破坏抗生素,B,抗性基因,所以首先用含有抗生素,B,培养基培养大肠杆菌,能生存下来是含有普通质粒和重组质粒大肠杆菌,;,再用影印法接种到含有抗生素,A,培养基上培养,能生存下来是含有普通质粒大肠杆菌。最终将能在含抗生素,B,培养基上生存,但不能在含抗生素,A,培养基上生存大肠杆菌菌落进行培养,即可得到含重组质粒大肠杆菌。,(4),若将插入在抗生素,B,抗性基因处目标基因重新切割下来,不一定能用,Bam,H,因为目标基因和抗生素,B,抗性基因拼接处不一定出现,GGATCC,序列。,第27页,-,28,-,考点,1,考点,2,策略方法限制酶及其切点分析,(1),一个至多个限制酶切点,:,作为载体必须含有一个至多个限制酶切点,方便与外源基因连接。,(2),每种酶一个切点,:,每种酶切点最好只有一个。因为每种限制酶只能识别单一切点,若载体上有一个以上该酶切点,则切割重组后可能丢失一些片段,若丢失片段含复制原点区,则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶一个切点,则酶切后既能把环打开接纳外源,DNA,片段,又不会丢失自己片段。,第28页,-,29,-,考点,1,考点,2,题点,2,考查基因工程在生产、科技中应用,2,.,多聚半乳糖醛酸酶,(PG),能降解果胶使细胞壁破损。成熟番茄果实中,PG,量合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程降低,PG,基因表示,可延长果实保质期。科学家将,PG,基因反向接到,Ti,质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,详细操作流程如图。据图回答以下问题。,第29页,-,30,-,考点,1,考点,2,第30页,-,31,-,考点,1,考点,2,(1),若已获取,PG,mRNA,可经过,获取,PG,基因,;,在该基因上游加结构,A,可确保基因反向转录,结构,A,上应含有,结合位点,;,重组质粒转移到大肠杆菌中目标是,。,(2),用含目标基因农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有,培养基进行筛选。因为导入目标基因能转录出反义,RNA,且能与,互补结合,所以可抑制,PG,基因正常表示。,(3),若,则可确定转基因番茄培育成功。取得转基因番茄产生种子不一定保留目标基因,科研人员惯用,方法使子代保持转基因番茄优良性状。,第31页,-,32,-,考点,1,考点,2,答案,:,(1),逆转录法,(,反转录法或,cDNA,文库法,),RNA,聚合酶大量复制目标基因,(,克隆目标基因,),(2),卡那霉素天然,PG,基因转录正常,mRNA,(3),转基因番茄保质期比非转基因番茄长无性繁殖,(,植物组织培养,),第32页,-,33,-,考点,1,考点,2,解析,:,(1),若已获取,PG,mRNA,可经过逆转录法获取,PG,基因,(,目标基因,),。结构,A,与转录相关,则应该含有开启子,而开启子是,RNA,聚合酶结合位点,能开启转录过程。将重组质粒转移到大肠杆菌中目标是大量复制目标基因,(,克隆目标基因,),。,(2),由图可知,标识基因是卡那霉素抗性基因,所以用含目标基因农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有卡那霉素培养基进行筛选。因为导入目标基因能转录出反义,RNA,且能与天然,PG,基因转录正常,mRNA,互补结合,所以可抑制,PG,基因正常表示。,(3),若转基因番茄培育成功,则转基因番茄保质期比非转基因番茄长。取得转基因番茄产生种子不一定保留目标基因,但可用无性繁殖,(,植物组织培养,),方法使子代保持转基因番茄优良性状。,第33页,-,34,-,考点,1,考点,2,策略方法依据受体种类确定基因工程受体细胞,受体种类不一样,所用受体细胞种类也不相同。,(1),植物,:,因为植物细胞有全能性,植物体细胞经过植物组织培养能够形成生物体,所以植物受体细胞普通是体细胞。,(2),动物,:,因为动物细胞没有全能性,不能由一个体细胞培养成一个个体,所以动物基因工程受体细胞不是体细胞,而是受精卵。,(3),微生物,:,多用原核生物细胞,因为原核生物繁殖快,多为单细胞,遗传物质相对较少。,第34页,-,35,-,考点,1,考点,2,必清错混辨析,1,.,相关基因工程概念及其工具,8,个易错易混点,(1),限制酶是一类酶,而不是一个酶。,(2),限制酶成份为蛋白质,其作用发挥需要适宜理化条件,高温、强酸或强碱均易使之变性失活。,(3),在切割目标基因和载体时要求用同一个限制酶,目标是产生相同黏性末端。,(4),将一个基因从,DNA,分子上切割下来,需要切两处,同时产生,4,个黏性末端。,第35页,-,36,-,考点,1,考点,2,(5),不一样,DNA,分子用同一个限制酶切割产生黏性末端都相同,同一个,DNA,分子用不一样限制酶切割,产生黏性末端普通不相同。,(6),限制酶切割位点应位于标识基因之外,不能破坏标识基因,方便于进行检测。,(7),基因工程中载体与细胞膜上物质运输载体不一样。基因工程中载体是,DNA,分子,能将目标基因导入受体细胞内,;,膜载体是蛋白质,与细胞膜通透性相关。,(8),基因工程中有,3,种工具,但工具酶只有,2,种。,第36页,-,37,-,考点,1,考点,2,2,.,相关基因工程操作过程,4,个易错易混点,(1),基因表示需要开启子与终止子调控,所以目标基因应插入开启子与终止子之间部位。,(2),目标基因进入受体细胞内,而且在受体细胞内维持稳定和表示过程,称为转化。转化实质是目标基因整合到受体细胞染色体基因组中。,(3),标识基因作用,筛选、检测目标基因是否导入受体细胞,常见有抗生素抗性基因、发光基因,(,表示产物为带颜色物质,),等。,(4),受体细胞惯用植物受精卵或体细胞,(,经组织培养培养成新个体,),、动物受精卵,(,普通不用体细胞,),、微生物,(,大肠杆菌、酵母菌,),等。要合成糖蛋白、有生物活性胰岛素则必须用真核生物酵母菌,(,需内质网、高尔基体加工、分泌,);,普通不用支原体,原因是它营寄生生活,;,一定不能用哺乳动物成熟红细胞,原因是它无细胞核,不能合成蛋白质。,第37页,-,38,-,考点,1,考点,2,3,.,相关基因工程应用与蛋白质工程,2,个易错易混点,(1),基因治疗后,缺点基因没有改变。基因治疗是把正常基因导入受体细胞中,以表示正常产物从而治疗疾病,对原来细胞中存在缺点基因没有去除或改变。,(2),对蛋白质分子进行改造,其本质是改变其基因组成。假如对蛋白质直接进行改造,即使改造成功,被改造蛋白质分子还是无法遗传。,第38页,-,39,-,考点,1,考点,2,考点,2,克隆技术及其伦理道德问题,热考题点必练,题点,1,考查植物细胞工程,1,.(,湖北荆州中学月考,38),细胞工程是一门新兴生物工程技术,在动、植物育种,药品提取,药品生产等领域应用十分广泛。利用所学知识回答以下细胞工程相关问题。,(1),釆用植物细胞工程育种方法以下,:,第39页,-,40,-,考点,1,考点,2,以胚状体为材料,经过人工薄膜包装得到人工种子,在适宜条件下一样能够萌发成幼苗,与天然种子培育相比,人工种子培育含有哪些显著优点,?,(,答出两点,),。,甲、乙原生质体经诱导融合完成标志是,。利用杂种细胞采取植物组织培养技术能够培育成杂种植株,该技术关键步骤是,和,。,(2),已知西湖龙井含有茶碱是植物细胞代谢产物,含有提神、抗衰老功效。可用植物组织培养来实现茶碱工业化生产。,若利用植物组织培养技术,可将龙井茶叶细胞培养到,阶段,然后从,(,填细胞器,),中提取茶碱。,假如想取得脱毒龙井茶苗,能够切取一定大小,等进行组织培养。,第40页,-,41,-,考点,1,考点,2,答案,:,(1),生产不受季节、气候和地域限制,;,普通不会出现性状分离、能保持优良品种遗传特征,新细胞壁形成脱分化再分化,(2),愈伤组织,液泡茎尖,第41页,-,42,-,考点,1,考点,2,解析,:,图中细胞工程流程是植物体细胞杂交过程,不一样物种甲、乙细胞首先经过酶解法去壁处理,得到甲、乙两种原生质体,经物理或者化学方法诱导融合,得到杂种细胞,(,新生细胞壁形成为标志,),再经过组织培养过程,得到杂种植株。,(1),以胚状体为材料,经过人工薄膜包装得到人工种子,在适宜条件下一样能够萌发成幼苗,与天然种子相比,人工种子含有优点有,:,生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种遗传特征、方便贮存和运输。,甲、乙原生质体经诱导融合完成标志是形成新细胞壁。植物组织培养技术包含脱分化和再分化两个关键步骤。,(2),若利用植物组织培养技术,可将龙井茶叶细胞培养到愈伤组织阶段,愈伤组织呈高度液泡化,然后从其液泡中提取茶碱。,茎尖、根尖和芽尖等分生区部位含有少许病毒或不含病毒,所以如想取得脱毒龙井茶苗,能够切取一定大小茎尖,(,根尖和芽尖也可,),等进行组织培养。,第42页,-,43,-,考点,1,考点,2,策略方法植物体细胞杂交分析,(1),植物体细胞杂交终点是培育成杂种植株,而不是形成杂种细胞就结束。杂种植株具备两种植物遗传特征,原因是杂种植株中含有两种植物遗传物质。,(2),该技术在育种上应用时最大优点是能克服远缘杂交不亲和障碍。,(3),当前还不能让杂种植物完全按人们需要去表示亲代优良性状。,第43页,-,44,-,考点,1,考点,2,题点,2,考查动物细胞工程及应用,2,.,以下是利用生物技术制备抗体两个路径模式简图。请据图回答以下问题。,第44页,-,45,-,考点,1,考点,2,(1),过程,至,所获取抗体,1,称为,其中过程,是指细胞工程中,技术。,(2),过程需要,酶,过程需要工具酶为,。,(3),处需要筛选,其培养基称为,(,填,“,选择培养基,”,或,“,判别培养基,”),。结构甲组成必须包含开启子、,及目标基因等,(,写两项,),。,(4),假如想用棉花生产该种抗体,则,过程受体细胞通常选取,菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后经过,技术取得能产抗体转基因棉花植株。,第45页,-,46,-,考点,1,考点,2,答案,:,(1),单克隆抗体细胞融合,(2),逆转录限制酶和,DNA,连接酶,(3),选择培养基终止子、标识基因,(4),土壤农杆植物组织培养,解析,:,(1),过程,至,所获取抗体,1,称为单克隆抗体,其中过程,是指细胞工程中细胞融合,(,或,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,),技术。,(2),是由,mRNA,形成,DNA,过程,表示逆转录,需要逆转录酶,;,过程为基因表示载体构建,需要工具酶为限制酶和,DNA,连接酶。,(3),过程表示杂交瘤细胞培养,需要筛选,其培养基称为选择培养基。结构甲表示基因表示载体,其组成必须包含开启子、终止子、标识基因及目标基因等。,(4),假如想用棉花生产该种抗体,则,导入受体细胞过程中所用受体细胞通常选取土壤农杆菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后经过植物组织培养技术,即脱分化和再分化过程,取得能产抗体转基因棉花植株。,第46页,-,47,-,考点,1,考点,2,策略方法单克隆抗体制备过程中两次筛选分析,第一次筛选,:,利用特定选择培养基筛选,取得杂交瘤细胞,即,AB,型细胞,(A,为,B,细胞,B,为骨髓瘤细胞,),不需要,A,、,B,、,AA,、,BB,型细胞。,第二次筛选,:,利用多孔板法和抗原,抗体杂交法筛选,取得产生特定抗体杂交瘤细胞。,第47页,-,48,-,考点,1,考点,2,必清错混辨析,1,.,辨析相关植物细胞工程,3,个易错易混点,(1),植物体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不论是染色体数、基因型还是染色体组都采取直接相加方法。,(2),利用植物组织培养生产细胞产物时,有时只需将外植体培养到愈伤组织,从愈伤组织中获取产物。,(3),人工种子发育早期需要营养物质由人工胚乳提供。,第48页,-,49,-,考点,1,考点,2,2,.,辨析相关动物细胞培养与体细胞核移植,3,个易错易混点,(1),植物组织培养和动物细胞培养都存在细胞培养过程,但植物细胞能够先分裂再分化,而动物细胞不分化只分裂。,(2),区分原代培养和传代培养关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理,然后再分瓶培养,原代培养结束,开始了传代培养。,(3),核移植过程中供体理论上是提供细胞核,但操作过程中能够把整个体细胞注入去核卵母细胞中去,原因是体细胞体积相对较小,取核难度较大,另外细胞膜对核融合障碍性较小。,第49页,-,50,-,考点,1,考点,2,3,.,辨析相关动物细胞融合与单克隆抗体,3,个易错易混点,(1),灭活是指用物理或化学伎俩使病毒或细菌失去感染能力,不过并不破坏这些病原体抗原结构。,(2),除了受到注射抗原刺激,小鼠在生活过程中还可能受到其它抗原刺激,所以从小鼠体内取出多个,B,淋巴细胞可能产生各种不一样抗体,所以进行第二次筛选是非常必要。,(3),单克隆抗体制备过程中,进行了屡次动物细胞培养操作,说明动物细胞培养是动物细胞工程基础。,第50页,
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