流式细胞术在白血病MICM分型诊断中的作用(压缩图片).ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,M,：,morphology,形态学,I,：,immunology,免疫学,C,：,cytogenetics,细胞遗传学,M,：,molecular biology,分子生物学,（,molecular genetics,，分子遗传学）,M,：,morphology,形态学,（,FAB,分型）,髓系（,acute nonlymphocytic leukemia,ANLL;acute myeloid leukemia,AML,）,（,M,0,：急性髓细胞白血病微分化型）,M,1,：急性原粒细胞白血病未分化型,M,2,：急性原粒细胞白血病部分分化型,M,3,：急性早幼粒细胞白血病,M,4,：急性粒,-,单核细胞白血病,M,5,：急性单核细胞白血病,M,6,：急性红白血病,M,7,：急性巨核细胞白血病,淋系（,acute lymphocytic leukemia,ALL,）,L,1,：原幼淋巴细胞以小细胞为主,L,2,：原幼淋巴细胞以大细胞为主,L,3,：大细胞为主，细胞质多，深蓝，蜂窝状,I,：,immunology,免疫学,Type of cell,CD markers,stem cells,CD34,+,CD31,-,all,leukocyte,groups,CD45,+,Granulocyte,CD45+,CD15,+,CD24,+,CD114,+,CD182+,Monocyte,CD45+,CD14,+,CD114,+,CD11a,CD91+,T lymphocyte,CD45+,CD3,+,T helper cell,CD45+,CD3+,CD4,+,T regulatory cell,CD4,CD25,and,Foxp3,Cytotoxic T cell,CD45+,CD3+,CD8,+,B lymphocyte,CD45+,CD19,+or CD45+,CD20,+,CD24,+,Thrombocyte,CD45+,CD61,+,Natural killer cell,CD16,+,CD56,+,CD3-,CD31,CD30,C,：,cytogenetics,，细胞遗传学,染色体核型分析（,chromosome karyotyping,）,检测信号及意义：,FSC/SSC,二维点图（,dot plot,）,中性粒细胞,单核细胞,淋巴细胞,阈值,细胞碎片,二、数据解释及报告,1.,定性的描述（阳性或阴性）,2.,评估抗原表达强度,3.,区分弱阳性和阴性群体,运用流式分析造血细胞的抗原表达情况，远远多于对形态学结果的简单证实，能够提供大量的信息，可能帮助形态学确认某些诊断，也可能提出之前没有考虑的诊断；在一些典型表现下，流式免疫分型可以在其他方法的辅助之下诊断疾病。,但是，流式免疫分型结果的解释应与临床、形态学、细胞遗传学等其他方法结合使用，综合考虑，做出疾病的诊断与分类。,正常血细胞发育过程的抗原表达规律,按,WHO,造血和淋巴组织肿瘤分类,（,2008,年版）,Wood B,etc,（,2007,）,急性白血病的免疫表型,急性髓细胞白血病的免疫表型,刘艳荣，等（,2010,）,急性淋巴细胞白血病的免疫表型,急性系列不明型白血病的免疫表型,慢性淋巴细胞白血病的免疫表型,一、,CLL,的免疫表型特点,二、,FCM,检测,CLL,的预后指标,ZAP-70 ZAP-70,+,CLL,预后不好。,CD38,是,CLL,疾病侵袭的重要标志，,CD38,+,B-CLL,患者预后不好。,三、鉴别单克隆,B,淋巴细胞增多症,单克隆,B,淋巴细胞增多症（,MBL,）指健康个体外周血中存在低水平的单克隆性,B,淋巴细胞增多。,四、鉴别诊断,CLL,是以外周血及骨髓中成熟的淋巴细胞增多为主要临床特点的恶性疾病。除了,CLL,，还包括其他多种生物学上完全不同的成熟,B,淋巴细胞肿瘤。正确鉴别将有助于预后评估和治疗方案的选择。,免疫分型的抗体组合原则,一、常用抗体,白细胞分化抗原（,leukocyte differentiation antigen,）是指血细胞在分化成熟为不同谱系、不同阶段及细胞活化过程中，出现或消失的细胞表面标记分子。,1982,年，国际统一使用分化群（,cluster of differentiation,，,CD,）作为白细胞分化抗原和相应单克隆抗体的命名，,CD,分子在流式细胞术的血液学应用中发挥着重要作用。,CD1a,表达于皮质胸腺细胞、树突状细胞和,Langerhans,细胞，主要用于,T,淋巴细胞白血病及淋巴瘤的免疫分型。表达,CD1a,的,T-ALL,为皮质型。,CD2,泛,T,细胞标志，表达于,T,淋巴细胞、胸腺细胞和大多数,NK,细胞上。急性,T,淋巴细胞白血病（,acute T lymphoblastic leukemia,，,T-ALL,）、成熟,T,细胞增生异常性疾病、急性双表型白血病、原始,NK,细胞淋巴瘤,/,白血病、肥大细胞白血病及少部分急性髓细胞白血病（,acute myeloid leukemia,，,AML,），尤其是变异性急性早幼粒细胞白血病（,acute promyelocytic leukemia,，,APL,）中有,CD2,表达。,CD3,表达于,T,淋巴细胞、胸腺细胞和,NK,细胞。是,T,细胞增值性疾病中最特异的标志，在成熟和部分初始,T,细胞中均有表达。胞浆,CD3,（,cCD3,）在初始,T,细胞（前胸腺细胞）上表达，胸腺细胞表达胞浆和（或）膜表面,CD3,（,mCD3,）。前体,T,细胞肿瘤通常不表达,mCD3,，但,cCD3,为阳性。,免疫分型的抗体组合原则,CD4,表达于辅助性,T,淋巴细胞、外周血单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞。大多数外周血,T,细胞淋巴瘤、部分,AML,、慢性粒单核细胞白血病（,acute myelomonocytic leukemia,，,CMML,）、急性单核细胞白血病（,AML-M,4,/M,5,）、,APL,和组织细胞肿瘤中伴有,CD4,表达。少部分,T-ALL,中有,CD4,限制性表达，大多数,T-ALL,同时表达,CD4,、,CD8,或者两者同时为阴性。,CD5,主要表达于胸腺细胞、成熟,T,淋巴细胞和,B,淋巴细胞亚型。作为一个泛,T,细胞抗原，,CD5,可表达于成熟或不成熟,T,细胞增值性疾病中，包括,T-ALL,。在肿瘤性,T,细胞发育过程中，,CD5,容易丢失。正常人外周血和淋巴组织中存在,CD5,+,B,细胞，儿童及年轻患者更多见。,CD5,主要表达于慢性淋巴细胞白血病（,B-cell chronic lymphocytic leukemia,，,B-CLL,）、小淋巴细胞淋巴瘤（,small cell lymphocyte lymphoma,，,SLL,）和套细胞淋巴瘤（,mantle cell lymphoma,，,MCL,）。少部分弥漫大,B,细胞淋巴瘤（,diffuse large B-cell lymphoma,，,DLBCL,）表达,CD5,，而且原发性,CD5,+,DLBCL,预后较,CD5,-,DLBCL,更差。,CD7,主要表达于,T,淋巴细胞、,NK,细胞和多能干细胞。在,T,细胞发育过程中，,CD7,是最早出现的,T,细胞标志，且贯穿表达于整个,T,细胞分化发育过程中。在外周,T,细胞异常性疾病中，,CD7,通常表达异常、减弱或消失。,T-ALL,中,CD7,阴性表达者仅占,2%,。此外，,CD7,还可表达于原始,NK,细胞淋巴瘤,/,白血病和,AML,，而,APL,和,B,系淋巴增值性疾病中，,CD7,表达多为阴性。,免疫分型的抗体组合原则,CD8,表达于杀伤性或抑制性,T,淋巴细胞、胸腺细胞和某些,NK,细胞上。大部分大颗粒,T,淋巴细胞白血病（,T-large granular lymphocyte leukemia,，,T-LGL,）和肠型淋巴瘤、少部分外周,T,细胞增值性疾病表达,CD8,。极少,T-ALL,表达,CD8,，而,CD4,阴性。,CD9,表达于单核细胞、前,B,细胞亚群、激活的,T,细胞、嗜酸与嗜碱性粒细胞、血小板，主要用于急性白血病免疫分型及微量残留病的检测。,CD10,又名急性淋巴细胞白血病共同抗原（,common acute lymphoblastic leukemia antigen,，,CALLA,），表达于前,B,、前,T,淋巴细胞、生发中心,B,细胞和成熟粒细胞绝大多数急性,B,淋巴细胞白血病（,B-ALL,）、少数,T-ALL,、多数滤泡性淋巴瘤（,follicular lymphoma,，,FL,）、部分,DLBCL,和,Burkitt,淋巴瘤、少数,AML-M,5,中有,CD10,表达。成熟粒细胞缺乏,CD10,的表达常常与骨髓增生异常综合征（,myelodysplasia,，,MDS,）相关。在,FL,和,DLBCL,中，,CD10,+,者预后更好。,CD11b,表达在单核细胞、粒细胞和部分,NK,细胞上，成熟,B,和,T,细胞不表达。部分急性髓细胞白血病表达,CD11b,，常代表单核细胞的分化，,AML-M,0,、,M,1,和,M,2,很少表达。,APL,通常也是,CD11b,阴性。常用,CD11b,观察,MDS,中单核和粒细胞的发育分化。,CD11c,单核细胞和组织巨噬细胞中强表达，粒细胞中表达强度较低，正常激活的,CD8+,细胞也可表达。,CD11c,强表达式毛细胞白血病（,hairy cell leukemia,，,HCL,）和,AML-M,5,的典型特征。其他恶性血液病，包括,B-CLL,，边缘带,B,细胞淋巴瘤（,marginal zone B-cell lymphoma,，,MZL,）、除,APL,外的其他,AML,也有,CD11c,的弱表达。,免疫分型的抗体组合原则,CD13,表达于粒细胞、单核细胞及其前体细胞上。,CD13,数全粒细胞分子，不同发育阶段的所有粒系细胞均有表达。大多数,AML,和,5%15%ALL,可表达,CD13,。,CD14,是成熟单核细胞的最好标志，大多数,CMML,和,AML-M,4,中的单核细胞强表达,CD14,；,AML-M,5,中，原单和幼单细胞通常为,CD14,阴性或弱表达。正常粒细胞,CD14,阴性，但慢性增值性疾病，如,CML,或真性红细胞增多症（,polycythemia vera,，,PV,）中的粒细胞部分有,CD14,的表达上调。,CD15,除原粒细胞外的所有粒细胞、多数单核细胞、少数巨核细胞和组织细胞表达,CD15,。,CML,、部分,AML,和大多数经典型霍奇金淋巴瘤（,Hodgkin lymphoma,，,HL,）表达,CD15,。,CD16,表达于正常的粒细胞、,NK,细胞和大颗粒,T,细胞上。,T-LGL,、,NK,细胞增生、肝脾,T,细胞淋巴瘤和部分单核系肿瘤中常表达,CD16,，而原粒细胞和典型,APL,细胞中,CD16,阴性。粒细胞发育异常时常可见,CD16,表达下调。,CD19,表达于,B,系细胞核滤泡状树突细胞上，成熟和不成熟,B,系肿瘤中均表达,CD19,，良性浆细胞、少数恶性浆细胞也可见,CD19,的表达，部分,AML,表达,CD19,，常与,t,（,8,；,21,）相关。,免疫分型的抗体组合原则,CD20,表达前,B,细胞晚期和成熟,B,细胞上，但前体细胞和终末浆细胞不表达。,CD20,出现在免疫球蛋白（,Ig,）轻链基因重排和表面,Ig,表达之间的,B,细胞表面。多发性骨髓瘤（,multiple myeloma,，,MM,）表达,CD20,者预后不好。,CD22,为泛,B,细胞标志，其表达与,CD22,抗体所标记的荧光素有直接关系。利用,CD22-PE,抗体，可以发现,CD22,表达于,B,细胞分化的早期，在成熟期表达强度增加。而利用,CD22-FITC,抗体，只能发现在成熟的,B,细胞表面,CD22,阳性，此时表面,CD22,可与表面,IgM,和（或）,IgD,同时或提前表达。绝大多数,TdT+,前体,B,细胞呈胞浆,CD22,阳性；多数淋巴细胞恶性肿瘤、特别是,HCL,、脾,MZL,和幼淋巴细胞白血病（,prolymphocytic leukemia,，,PLL,）强表达,CD22,，而,B-CLL,中,CD22,表达较弱。,CD23,表达在正常成熟,B,细胞上，大多数,B-CLL/SLL,强表达。,CD5+CD23+,是,B-CLL/SLL,的典型特征，而,MCL,为,CD5+CD23-,，少部分,MCL,表达,CD23,，但表达较弱。部分,FL,和,DLBCL,、少数,AML-M5,和,CMML,中表达,CD23.,CD25,表达于激活的,T,、,B,细胞，主要表达于,HCL,、成人,T,细胞白血病,/,淋巴瘤（,adult T-cell leukemia/lymphoma,，,ATCL,）和少数其他,T,、,B,细胞增殖异常的疾病中。变异性,HCL,不表达,CD25,，对经典的,HCL,治疗不敏感，生存期短。,CD30,主要表达于激活的,T,、,B,淋巴细胞和单核细胞。经典型,HL,和间变大细胞淋巴瘤（,anaplasic large cell lymphoma,，,ALCL,）可伴有,CD30,强表达，部分,B,系淋巴瘤又有,CD30,的表达。,HL,患者胞浆,CD30,水平增高时预后不良标志。,免疫分型的抗体组合原则,CD33,表达髓系前体细胞、粒细胞和单核细胞，正常人的,CD33,的表达强度有变异。各,AML,亚型均有,CD33,的表达，,10%20%,的,ALL,也可伴,CD33,表达。,CD34,表达于早期造血干,/,祖细胞，是髓系早期细胞和,TdT+,不成熟淋巴细胞的表面标志。大多数,ALM,和前体,B/T,淋巴细胞白血病表达,CD34,，粗颗粒型,APL,通常不表达，而细颗粒型,APL,往往伴有,CD34,部分表达。,CD36,表达于单核细胞、红细胞、巨核细胞和血小板，与,CD64,联合分析单核细胞的分化比,CD14,更敏感。,CD38,表达于前体,B,细胞、终末分化的浆细胞、髓系祖细胞、粒细胞和单核细胞和红系前体细胞。成熟,B,细胞,CD38,的表达减弱或消失。除浆细胞中强表达,CD38,外，绝大多数,AML,和,B-ALL,表达,CD38,，强度较浆细胞弱。,CD38+B-CLL,患者预后不好。,CD41a,和,CD42b,表达与巨核细胞和血小板，常用于,AML-M7,的免疫分型诊断，但有时会出现于其他细胞，例如单核细胞的非特异性结合。,CD45,有名白细胞共同抗原（,leukocyte common antigen,，,LCA,），表达于所有造血细胞（不包括成熟红细胞和血小板）及造血细胞的个分化亚群上。在白细胞成熟过程中，,CD45,的表达有区别，原始细胞表达较低，成熟髓细胞中度表达，单核细胞和淋巴细胞表达最高。,CD45,阴性表达的常见肿瘤包括：,MM,、,M6,，部分,B-ALL,和髓外肿瘤。成熟,B,细胞肿瘤可能伴有,CD45,表达减弱。有些,MM,弱表达,CD45,，与骨髓瘤细胞的增殖率有关。,免疫分型的抗体组合原则,CD45RA,和,CD45RO,表达于,B,和,T,细胞亚群，前者主要表达在初始细胞，后者大部分表达在记忆性,T,细胞上。,CD52,表达于所有正常,T,细胞、多数恶性,T,细胞和成熟,B,细胞增值性疾病中。目前免疫分型检测的主要目的是用于抗,CD52,的单抗治疗。,CD56,表达,NK,细胞、部分,T,细胞和单核细胞，少数增生期的髓细胞也可弱表达。,NK,细胞白血病、部分,MM,、,AML,中常伴,CD56,的阳性表达。,CD19,和,CD56,共表达与伴有,t,（,8,；,21,）的,AML,相关。在伴有,t,（,8,；,21,）或,t,（,15,；,17,）的,AML,中，,CD56,的阳性表达是预后不好的因素。,CD58,表达于所有造血和非造血细胞，前体细胞表达较强，成熟细胞表达强度减弱。,CD58,主要用于区分,ALL,和良性前体,B,细胞，可用于,ALL,和,MRD,检测。,CD61,表达与巨核细胞和血小板，常用于,AML-M7,的免疫分型诊断，但有时会出现于其他细胞，例如单核细胞的非特异性结合。与,CD42b,联合应用可以区分血小板和原始细胞。,CD64,表达于单核细胞和中性粒细胞上，主要用于分析单核细胞的分化。,CD64,可表达于,AML-M4/M5,和,CMML,中的单核细胞，大多数其他类型,AML,中的原始细胞也表达,CD64,，但较单核细胞表达弱。,免疫分型的抗体组合原则,CD71,一种转铁蛋白受体，通常在增殖活跃的造血细胞上表达，红系前体细胞表达较强，和可以表达与髓系、激活的淋巴增殖细胞上。可鉴别不成熟的红细胞，主要用于,M6,和,MDS,的诊断。,CD103,表达于,B,淋巴细胞亚群和粘膜固有层,T,淋巴细胞，在,HCL,中强表达。肠型,T,细胞淋巴瘤和,MZL,也可表达,CD103,。,CD117,表达于造血祖细胞、不成熟的粒细胞和肥大细胞。大多数,AML,中的原始细胞均有,CD117,表达，多数,M5,可见,CD117,阴性。另外，肥大细胞增生、,MM,、部分,T-ALL,和少数,CD8+,成熟,T,淋巴细胞增殖性鉴别均可见,CD117,阳性表达。,CD123,表达于骨髓干,/,祖细胞、单核细胞、粒细胞、嗜碱性粒细胞和巨核细胞。浆样树突状细胞和嗜碱性粒细胞中强表达。多数,AML,和,B-ALL,常伴有,CD123,高表达。,CD138,主要表达于浆细胞，用于,MM,的免疫分型和残留骨髓瘤细胞的检测。,CD200,表达于胸腺细胞、,B,细胞、脾滤泡树突状细胞和部分,T,细胞亚群上。有助于鉴别,CLL,和,MCL,，,CLL,常为,CD200+,，而,MCL,往往为,CD200-,。,CD235a,又名,GlyA,表达于人红细胞、红系前体细胞上，主要用于识别红细胞。,免疫分型的抗体组合原则,Bcl-2,表达于,T,细胞和部分,B,细胞上，正常生发中心细胞,Bcl-2,的表达为阴性。主要用于鉴别,CD10+,的,FL,和,Burkitt,淋巴瘤，,FL,常表达,Bcl-2,，而,Burkitt,淋巴瘤为,Bcl-2,的表达为阴性。,cIgM,（,c,）,前,B,细胞表达的第一个免疫球蛋白重链，表达于部分浆细胞和成熟,B,细胞。常用于判断,B-ALL,的分期。,cyclinD1,细胞周期蛋白，多种肿瘤中高表达，可作为评价预后的指标，造血系统肿瘤中主要应用于,CML,的诊断。,FMC7,表达于成熟,B,淋巴细胞亚群，主要用于鉴别,B-CLL,和其他,B,系增殖性肿瘤，,B-CLL,中,FMC7,表达为阴性。,HLA-DR,表达于各阶段的,B,淋巴细胞（大部分浆细胞除外）、造血祖细胞、髓系、红系和巨核系前体细胞、单核巨噬细胞、树突状细胞、不成熟的,T,细胞及活化,T,细胞上。原始粒细胞表达,HLD-DR,，细胞成熟至早幼粒细胞时,HLA-DR,消失。绝大多数,B-ALL,和,AML,表达,HLD-DR,，但,APL,、,MM,和大部分,T,细胞白血病,/,淋巴瘤一般不表达。,Ig,和,Ig,表达于正常,B,淋巴细胞，,B,系淋巴瘤中常见胞膜免疫球蛋白轻链的限制性表达，,MM,中常见胞浆免疫球蛋白轻链的限制性表达。,免疫分型的抗体组合原则,MPO,髓过氧化物酶，表达于粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中，在循环单核细胞中低密度存在。某些,AML,的原始细胞也有表达，,MPO,用于髓系白血病及髓系分化的鉴别。,TCR,TCR,分子是有,/,或,/,链组成的异二聚体，可与,CD3,复合物同时表达。多数胸腺细胞和成熟,T,细胞表达,TCR/,异二聚体，不足,5%,的胸腺细胞和成熟,T,细胞表达,TCR/,。主要用于成熟,T,淋巴系统肿瘤的分类。,TdT,末端脱氧核酸转移酶（,terminal deoxynucleotidyl transferase,，,TdT,）存在于正常胸腺和骨髓中未成熟,T,、,B,细胞的胞核中。大多数,T-ALL,和,B-ALL,、部分,AML,（,AML-M0,更多见）和少数淋巴瘤表达,TdT,。,TCR V,T,细胞受体的,链变异区，用于鉴别,T,细胞的克隆性，主要应用于成熟,T,细胞增殖性肿瘤的免疫分型诊断中。,ZAP-70,表达于,T,细胞、,NK,细胞核前,B,细胞上，主要用于,CLL/SLL,的免疫分型。细胞内,ZAP-70,的表达与,IgV,H,基因突变状态有关，,ZAP-70,+,CLL,预后不好。,免疫分型的抗体组合原则,免疫分型的抗体组合原则,二、白血病免疫分型抗体组合原则,（一）国际指南中抗体使用原则,国际“临床和实验室标准化协会”,血液淋巴系统肿瘤细胞的临床流式分析指南,（第二版，,2007,）指出：免疫分型的一个基本原则是肿瘤性血液淋巴细胞表达正常细胞特定系列和特定成熟期的表面和细胞内抗原，这些抗原可被适当的抗体检测。,较理想的组合是，实际的数量足够识别异常细胞和标本中存在的所有正常细胞。当对一个已经诊断的病例检测以证实、分类、监测及分期时可使用较少的抗体。在设计组合是有两种方法：,一步法,，使用足够的试剂一次性完成恶性细胞和正常细胞的定性；,两步法,，开始使用较少的抗体，然后根据第一步的结果选择其他的抗体。,总体来讲，使用试剂越多，对异常细胞的检测和定性的敏感性和特异性越高。基于有用的临床和形态信息，可采用“靶点”方法选用少数抗体。虽然这种方法可以减少成本，但万一提供的临床信息是错误的或缺乏的，则具有一定的风险。根据国际上的一致意见，需要大量的试剂来完成慢性淋巴增殖性疾病、组织淋巴瘤、急性白血病和其他血液学肿瘤的免疫分型。,指南参与者认为，至少需要,20,个抗体来完成急性白血病的定性，对慢性淋巴细胞增殖性疾病需要相似的抗体数。另外，定的表面和细胞内抗体最近被证明具有诊断和预后意义。随着临床有关新抗体的认识，原本较大的分类抗体数开可能要增加。,免疫分型的抗体组合原则,（二）国际流式细胞专家的共识,2006,年，国际流式专家在,Bethesda,对诊断血液淋巴系统肿瘤所需要的试剂进行了讨论达成一定共识。,免疫分型的抗体组合原则,（三）国内流式细胞专家使用原则,（北京大学血液病研究所）,急性白血病亚型分型和,MRD,检测时使用的主要抗体：,急性白血病的诊断和分型抗体,B-ALL,：,CD19,、,CD10,、,CD34,、,TdT,、,CD20,、,CD22,、,CD79a,、,skappa,、,slambda,、,c,T-ALL,：,CD2,、,m/cCD3,、,CD4,、,CD5,、,CD7,、,CD8,、,CD1a,、,TdT,、,CD34,AML,：,CD34,、,CD117,、,CD38,、,HLA-DR -,干,/,祖细胞,CD15,、,CD11b,、,CD13,、,CD33,、,CD64,、,CD14,、,CD36,、,MPO-,粒,单系,CD71,、,GlyA -,红系,CD41,、,CD61,、,CD42b-,巨核系,MRD,检测所需的主要抗体,根据上述抗体可以达到急性白血病的诊断和分型。但如果准备治疗后利用,FCM,检测残留白血病细胞，则在上述抗体的基础上需要适当增加抗体。主要是增加不同系列抗原的检测。如：,B-ALL,：,CD58,、,CD123,、,CD38,、,CD13,、,CD33,、,CD56,等,T-ALL,：,CD117,、,CD10,、,CD56,等,AML,：,CD7,、,CD56,、,CD19,、,CD2,、,CD4,、,CD5,等,免疫分型的抗体组合原则,两步法进行四色免疫分型的方法：,2011,版,中国慢性淋巴细胞白血病诊治指南,CLL,免疫表型特征,：,大多数,CLL,细胞同时表达,T,细胞抗原,CD5,和,B,细胞抗原,CD19,、,CD20,和,CD23,。,典型的,CLL,免疫表型为,CD5+,、,CD23+,、,CD43+/-,、,CD10-,、,D19+,、,CD20dim,、,sIg,dim,和,CCND1-,。,部分患者可能表现为,sIg,bright,、,CD23-/+,、,FMC7,dim,，由于同样是,CD5+,的套细胞淋巴瘤（,MCL,）患者也可能表现为,FMC7+,、,CD23-,、,sIg,bright,和,CD20,bright,等，难以和,CLL,鉴别，因此对于免疫表型不典型的,CLL,（,CD23,dim,/-,、,CD20,bright,、,sIg,bright,或,FMC-7+,等），特别是,CLL,积分,4,时，需要进行,CCND1,的免疫组化染色和（或）利用荧光原位杂交（,FISH,）检测,t,（,11;14,）从而与,MCL,相鉴别。,最近文献报道,CD200,、,CD148,对,CLL,与,MCL,有一定的鉴别诊断价值。,FCM,免疫表型检测为急性白血病诊断和分型不可,缺少的工具,：,客观,、准确、可重复性,形态学不典型时，鉴别,AML,、,ALL,诊断,AML-M,0,、,AML-M,7,诊断,ALL:T,、,B,、,NK,；亚,型、分化,阶段诊断,诊断,AUL/MPAL,:,双表,/,双系列,帮助,预测遗传学,异常,在慢性白血病鉴别诊断中,FCM,免疫表型检测起着重要作用,。,附录,A,