实验三、白细胞分类计数.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三,白细胞分类计数,DC,原理,将血液制成血涂片，用瑞氏染液染色，根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细胞，即可求出各种白细胞的相对比值（百分率）。,器材,1、显微镜,2、采血用具,3、载玻片、推片、蜡笔,4、分类计数器,试剂,1、瑞氏染液或瑞氏-姬,姆萨染液,2、PH6.4-6.8磷酸盐,缓冲液,一、血片制作：（示教）,1、良好涂片标准：,呈头、体、尾舌形,血膜厚薄适宜,两边留有空隙,头,体,尾,2、涂片好坏与下列因素,有关：,血滴大小,推片与玻片之间角度,推片速度,2）偏酸：,红细胞和嗜酸性颗粒偏红，白细胞核呈浅兰色或不着色。,太酸则只见一片红染，白细胞除嗜酸性颗粒外，均不着色。,3）偏碱：细胞呈灰兰色，白细胞颗粒深暗，嗜酸性颗粒变成暗褐色，甚至黑色。中性颗粒也偏粗偏碱（紫黑色）。红细胞偏蓝、深蓝，血片过厚的地方呈绿色。,3、注意事项：,)未干透血膜，染色时易脱落，故血膜应干透再染色。,)冲洗前，先在低倍镜下观察有核细胞是否着色，否则适当延长染色时间。,)染液不能过少，以防 蒸发，染料沉着在血膜上不易冲掉，影响观察。,)勿先倒掉染液，直接流水冲洗，防染料沉着。,)染色应注意保存血片尾部，不能用蜡笔划去，因体积大的细胞常在此出现。,三、分类方法：,制片 染色,低倍镜观察（内容），选择细胞分布均匀、染色好的部位 转油镜下计数100200个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。,细胞分布:,头体部以淋巴细胞较多,尾部和两侧以中性粒、,单核细胞较多,片尾部,异常、大的细胞较多.,一般选择片头至片尾的2/3区域计数较好,即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野。,头,体,尾,四、外周血正常白细胞形态：,2、大小不均：中毒颗粒：空泡变性：,空泡变性：杜勒体：核棘突：,巨型变和分叶过多,核变性：核棘突 核碎裂 核固缩,型（空泡型）型（不成熟型）型（不规则型）,浆细胞型 幼稚型 单核细胞型,注意事项：,、有时病人白细胞极少（一张片100个WBC），可数50个细胞，再算出百分数，同时应注明，或数2张片子，并注明。,、发现幼稚或异常白细胞，应分类报告，包括在分类百分率中。,、如遇到不能确认的细胞，应另列入分类不明一项，如实报告，并保留血片。,、发现有核红细胞，应报告分类100个白细胞所见有核红细胞数。,、按一定顺序移动视野,、白细胞总数各种白细胞的百分率，即得各种白细胞的绝对值。,