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,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,检测生物组织中的,糖类、脂肪和蛋白质,一.实验原理:,某些,化学试剂,能够使生物组织中的有关,有机化合物,产生特定的,颜色反应,。如:,.还原性糖的鉴定:,还原性糖+,.脂肪的鉴定:,脂肪+,脂肪+,.蛋白质的鉴定:,蛋白质+,淀粉+,斐林试剂,砖红色沉淀,苏丹,橘黄色,苏丹,红色,双缩脲试剂,紫色,碘液,蓝色,二.目的要求:,尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,1、还原糖的检测和观察:,选材,应该选择含,量高.颜色,为 的植物组织,,以,苹果.梨,为最好。,糖,白色或近于白色,制备组织样液:,制浆 过滤 取液,三.实验过程:,用一层纱布,可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,,说明植物组织样液中含有还原糖。,注入2mL苹果组织样液,注入1mL刚配制好的斐林试剂,水浴加热约2min,呈色反应,变成,砖红色,50-65,0,C的温水,结论:,甲乙液等量混匀,振荡、混合摇匀,呈现蓝色,还原糖有,。,试剂:,.(甲液:0.1g/ml,的,乙液:0.05g/ml的,.),甲乙液必须,后再加入样 液中,,。,必须,。,葡萄糖,果糖,麦芽糖,用水浴加热,斐林试剂,NaOH,CuSO,4,等量混合均匀,现配现用,注意事项:,颜色变化:,浅蓝色,棕色,砖红色,2、脂肪的检测和观察:,圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。,方法一:,待测组织样液+苏丹染液,橘黄色,取材:,花生种子(浸泡34h),将子叶削成薄片,方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察,子叶细胞的着色情况。,制片,取最理想的薄片,在薄片上滴苏丹染液(3min),去浮色(用50酒精),制成临时装片,观察,低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,,然后用高倍镜观察,结论:,脂肪微粒,(3)注意事项:,试剂:,(,A液:0.1g/ml的,;,B液:0.01g/ml的,),先加,,再加,。,B液要求量适中,否则,多余,的B液,将会,与A液,发生反应生,成,Cu(OH),2,显色而遮盖原有的颜色,。,鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比,双缩脲试剂,A液1ml,B液4滴,NaOH,CuSO4,蛋白质的检测结果,用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免,实验后粘住试管壁,不易洗刷,斐林试剂与双缩脲试剂的比较:,A液:0.1g/mLNaOH,B液:,0.01,g/mLCuSO,4,甲液:0.1g/mLNaOH,乙液:,0.05,g/mLCuSO,4,紫色物质生成,砖红色沉淀,先加A液,,,再加B液,,,不需加热,甲液与乙液,先混再用,,且,现配现用,,需,加热,蛋白质,还原性糖,试剂组成,检验结果,试剂用法,检测对象,双缩脲试剂,斐林试剂,4、淀粉的检测和观察:,取材:,马铃薯匀浆,检测,组织样液2mL,碘液2滴,结论:,说明组织样液中存在淀粉。,注意:,常用材料:马铃薯,试剂:,。颜色变化:,。,碘液,变蓝,摇匀后变成蓝色,问题探讨:,1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?,作对照,2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加34滴而不能,过量?,过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。,3、,为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?,时间太长,Cu(OH),2,悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。,深化,比较项目,试剂及成分,原理,溶液浓度,方法,加热与否,结果,可溶还原糖的鉴定,斐林试剂NaOH和CuSO,4,砖红色沉淀,蛋白质的鉴定,双缩脲试剂NaOH和CuSO,4,溶液呈紫色,4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?,新配制的,Cu(OH),2,溶液,在碱性,环境下,的Cu,2+,NaOH,浓度为,0.1g/mL,CuS0,4,浓度为,0.05g/mL,NaOH,浓度为,0.1g/mL,CuS0,4,浓度为,0.01g/mL,先把NaOH,溶液和CuSO,4,溶液,混合,,,而后,立即使用,。,先,加入,Na0H,1,mL,,然,后,再加,CuS0,4,4滴,摇匀。,(,不能过量,),水浴,加热,不,需,要,5、实验的材料的选择和处理有什么要求?,材料的选择,材料的处理,还原性糖的鉴定,脂肪的鉴定,含糖高,颜色为,白色的植物组织,,如苹果和梨,富含脂肪的种子,,如花生,浸泡34小时,/,蛋白质的鉴定,富含蛋白质的,黄豆或鸡蛋清,黄豆需浸泡1-2天,鸡蛋清要先稀释,淀粉的鉴定,马铃薯,/,
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