实验6--微生物液体深层培养—发酵罐的使用.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Central Laboratory of Biology,College of Life Sciences,Hubei Normal University,Central Laboratory of Biology,College of Life Sciences,Hubei Normal University,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Central Laboratory of Biology,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,目的要求与基本原理,【,目的要求,】,1.,了解微生物液体深层培养的方法和设备的使用。,【,基本原理,】,好氧微生物的生长繁殖需充足的氧。为了进行大规模的工业生产，微生物需进行液体深层培养，其氧的供给由空气系统完成，“通风搅拌”是最常用的方式。生产前，空气过滤器至罐体以及其他与罐体相通的管道、培养基都需进行彻底地灭菌。然后，控制好微生物培养所需的温度、风量、搅拌速度并接种，方可正常生产。,【,实验用品,】,1.,材料：玉米粉、豆饼粉,2.,试剂：,K,2,HPO,4,3H,2,O,、,MgSO,4,7H,2,0,、红曲霉液体菌种,3.,仪器：小型通风发酵罐,【,方法步骤,】,1.,准备工作,1,）培养基的配制：玉米粉,5%,，豆饼粉,2%,，,K,2,HPO,4,3H,2,O 0.5%,，,MgSO,4,7H,2,0 0.1%,，,pH,自然。,2,）检查本系统各单件设备，确保各设备能正常运行时方可开机。,3,）温度、,pH,、转速、消泡设定值的调节,【,方法步骤,】,2.,空气过滤及空气管路的消毒,1,）慢慢打开蒸汽阀门，排尽冷凝水。,2,）蒸汽通过空气过滤器进入发酵罐内。,3,）消毒时间一般为,30,分钟。,4,）吹干空气过滤器需,20,分钟左右。,3.,空消,1,）排尽夹套中的水。,2,）排尽蒸汽管中冷凝水，使蒸汽徐徐进入发酵罐。,3,）空消时间一般为,30,50,分钟。排尽发酵罐内的冷凝水。,7.,培养,1,）按照工艺要求调节通气量、培养温度及搅拌转速。,8.,取样,蒸汽通过取样口，保持,20,30,分钟，消毒后再取样。取完样再通蒸汽约,5 min,。,9.,出料,1,）出料管的灭菌。,2,）出料。,3,）出料完毕后用蒸汽消毒出料管。,4,）发酵罐应及时清洗干净。,5,）如果发酵罐暂时不用，则需排尽罐内及各管道内的余水。,【,方法步骤,】,10.,发酵罐的清洗,1,）关闭电源，旋下电机及个传感器的连线插头。,2,）如果搅拌轴及机械密封装置不干净，则可用水冲刷。,3,）安装完毕后，检查管道及发酵罐的密封性。,【,方法步骤,】,【,注意事项,】,1,）必须确保所有单件设备能正常运行时使用本系统。,2,）在过滤器消毒时，流经空气过滤器（金属滤芯）的蒸汽压力不得超过,0.17MPa,，否则过滤器滤芯会被损坏，失去过滤能力。,3,）在操作过程中，罐压不得超过,0.12MPa,，防止引起设备的损坏。,注意：在空、实消升温过程中冷却按钮必须处于停止状态，否则当设定值设定在培养温度时，冷却水管中会自动通冷却水，不仅会影响升温速度、浪费蒸汽，更重要的是会引起冷凝水过多，造成培养液的浪费。,4,）在空、实消结束后冷却时，发酵罐内严禁产生负压，以免损坏设备或造成污染。,5,）在发酵过程中，罐压应维持在,0.03,0.05MPa,之间，以免引起污染。,在各操作过程中，必须保持空气管道中的压力大于发酵罐的罐压，否则会引起发酵罐中的液体倒流到过滤器中，堵塞过滤器芯或失去过滤能力。,【,注意事项,】,【,实验报告,】,1.,以自己的理解写出发酵罐使用的基本流程。,2.,思考题,1,）怎样防止由通风引起的发酵液污染？,Central laboratory of Biology,生物学实验教学中心,Thanks for your attention!,