第02章-消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全课件.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第,2,章,-,消 毒 灭 菌,消毒灭菌：,用物理或化学的方法来抑制和杀灭环境中或体表的微生物，以防止微生物污染或病原微生物传播的方法,消毒灭菌常用术语,灭菌,（,sterilization,）：,杀灭物体上所有,微生物,的方法。,消毒,（,disinfection,）：,杀死物体上或环境中的,病原微生物,的方法。,防腐（antisepsis）,：,防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。,清洁（cleaning）,：,是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。,无菌（asepsis）,：,无菌是,无,活菌的意思，多是灭菌的结果。,无菌操作,技术,:,防止细菌进入人体或其它物品的操作技术,。,物理方法,化学方法,第一节 消毒灭菌的方法,（一）热力灭菌法,（干热,+,湿热）,1,.,干热灭菌法,焚烧炉,适用：,废弃的物品,动物尸体,一、物理消毒灭菌法,焚烧,红外线,辐射,是一种,0.77-1000,微米波长的电磁波,红外线为,热效应,杀菌,红外线加热速度快，但为表面照射，物体受热不均。用红外线烤箱灭菌，多用于医疗器械的灭菌。,人受红外线照射较长，会感觉眼睛疲劳及头疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工 作人员应戴防护镜。,巴氏消毒法,(,pasteurization,):,巴氏消毒法用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，而保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。,主要应用于乳制品的消毒。方法有两种：加热到,61.1-62.830,分钟 ,71.715-30,秒。,2,.,湿热灭菌法,煮沸法,煮沸温度为,100,，一般细菌繁殖体,5,分钟就杀死了，芽胞需要,1-2,小时才可被杀灭。,流动蒸气消毒法,利用一个大气压下,100,的水蒸气进行消毒，细菌繁殖体,15-30,分钟杀灭。蒸笼具有类似的原理。,间歇蒸气灭菌法,利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌消毒的目的。,高压蒸气灭菌法,一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于蒸气的压力。在,103.4kPa,蒸气下，温度达到,121.3,，维持,15-20,分钟,，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。,高压蒸汽灭菌器,1,.,紫外线,（,265-266nm,）,原理,：其主要作用于,DNA,，使一条,DNA,链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合成二聚体，干扰,DNA,的复制与转录。,特点,：紫外线的穿透力弱,适用范围,：因此一般用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒。,注意,：紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，应注意防护。,（二）辐射杀菌法,紫外线灯管,2,.,电离辐射,常用,射线,(,钴,-60),和,射线。,原理：,干扰代谢和,DNA,合成，破坏细胞膜、酶，产生,H,2,O,2,、游离羟基杀菌。,特点,：,具有较高的能量与穿透力，可在常温下对不耐热的物品灭菌，故又称“,冷灭菌,”。,运用：,可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等，亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭菌。,微波是一种波长为,1-1000mm,的电磁波，频率较高；,一般认为其杀菌机理除,热效应,以外,;,还有电磁共振效应。可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属；,微波照射多用于食品加工。,3,.,微波（microwave）,在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品、食具、药杯、及其它用品的消毒。,微波能杀灭各种微生物；可在,1-5,分钟内杀死各种细菌。,微波长期照射可引起眼睛的晶状体混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应，因此必须关好门后才开始操作。,1.,滤菌器(filter,）,-,直径是,0.45um,以下。,（三）滤过除菌法,2.,空气除菌采用生物洁净技术,超净工作台,层流室,（四）,其他物理方法,1,、干燥与低温抑菌法,盐或糖腌食物，冰箱冷冻食物,2,、超声波灭菌法,每秒钟超过,20,000,次振动的声波不被人耳感受，称为超声波。,利用在菌体内的空化作用、机械,裂解,杀菌。,尤其是革兰阴性菌更为敏感，但不彻底，常有残留。,二、化学消毒灭菌法,高效消毒剂,原理,适用范围,含氯消毒剂,（次氯酸钠、漂白粉）,产生氯气、次氯酸,新生态氧,排泄物、物体表面、饮用水等,过氧化物消毒剂,（过氧化氢、过氧乙酸）（二氧化氯）,氧化作用,物体表面、皮肤,空气净化剂,醛类消毒剂,（戊二醛、甲醛）,对细菌蛋白和核酸的烷化作用,高效空气过滤器消毒,（对人有毒）,环氧乙烷,与醛类相同,（一）,高效消毒剂,:,可杀灭芽孢在内的微生物,适用不耐高温，但必须进入人体内部的器械：内窥镜、塑料外科器械,含碘消毒剂：,碘伏、碘酊,氧化作用，但有刺激性,醇类消毒剂,乙醇、异丙醇,脱细胞膜的脂类，并使菌体蛋白变性,70-75%,乙醇作用最强,（,二）,中效消毒剂,：,杀细菌繁殖体，真菌和大部分病毒,（三）,低效消毒剂,：,杀多数细菌繁殖体，不能杀芽孢和结核杆菌以及一些真菌和病毒,新洁尔灭,皮肤、粘膜、地面、物品表面,（不与阴离子表面活性剂合用）,洗必泰,皮肤、粘膜、地面、物品表面,（不与阴离子表面活性剂合用）,高锰酸钾,氧化作用,皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒,第二节 消毒灭菌的运用,1,、高危器械物品,用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该,灭菌,。,2,、中危器械物品,用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用,消毒,即可。,3,、低危器械物品,只接触未损伤皮肤,，不接触黏膜和无菌组织的物品。一般用后,清洗、消毒,即可。,4,、快速周转的医疗器械 瞬时灭菌，高效消毒剂处理，微波灭菌等,（一）、,医疗器械物品的消毒灭菌,1,.,物理消毒法,紫外线照射最常用,；,滤过除菌,：,2化学消毒法,包括化学消毒剂喷雾和熏蒸,：,过氧乙酸喷雾、熏蒸,；,过氧化氢喷雾,；,二氧化氯溶液,喷洒；,中草药点燃烟熏。,（二）、室内空气消毒灭菌,（三）手和皮肤的消毒,用肥皂和流动水经常并正确洗手,病原微生物污染时应用消毒剂消毒。,乙醇，碘伏,（四,）,黏膜,的消毒,口腔粘膜可用,3%,的双氧水，腔道冲洗用,1/1000,的高锰酸钾。,（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌,50g/L,的次氯酸钠、漂白粉处理小时,（六）病人污染物品的消毒,（七）饮水的消毒,氯气或是漂白粉消毒,（八）环境的消毒,第三节 影响消毒灭菌效果的因素,1,、,微生物的种类,微生物对消毒灭菌敏感性由高到低一般是：,真菌,细菌繁殖体,有包膜病毒,无包膜病毒,分枝杆菌,细菌芽孢。,2,、,微生物的物理状态,在恶劣环境生长的细菌的抵抗力强于在营养丰富的环境生长的细菌,3,、,微生物的数量,细菌越多，消毒时间越长，因此，消毒前的,清洁,很重要,4,、,消毒剂性质、浓度与作用时间,消毒剂性质不一样，效果也不一样。,一般是浓度越高，效果越好，但乙醇是,70%-75%,效果好。,时间越长，效果越好,。,5,、,温度,温度越高，效果越好,6,、,酸碱度,与消毒剂性质有关,7,、,有机物,有有机物污染的，消毒效果不佳。,（一）掌握,消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念；巴氏消毒法的方法；高压蒸汽灭菌的方法；紫外线消毒的原理和特点；化学消毒剂的杀菌机制；影响消毒灭菌效果的因素。,（二）熟悉,湿热灭菌的优点；滤过除菌法的原理和方法；冷冻真空干燥法保存菌种的方法；,化学消毒剂的种类。,（三）了解,干热灭菌的方法；常用化学消毒剂的使用范围、剂量和作用时间；消毒灭菌的应用；有关病原微生物实验室生物安全的知识。,教学要求,