临床微生物标本采集运送及处理.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,临床微生物标本采集运送及处理,临床标本的分类,带菌标本,无菌标本,痰液,血液,咽拭子,脑脊液,尿液,关节腔积液,粪便,胸腹水、胆汁,其他类别,其他类别,1.,血培养,2.,脑脊液培养,3.,下呼吸道（痰培养）标本,4.,穿刺液培养,5.,中段尿培养,6.,粪便标本,7.,生殖道标本,8.,脓液和伤口标本,血培养,问题一：血培养的指征是什么,?,当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养,怀疑患者有血流感染的症状有：,不明原因的发烧,(,38),或体温过低,(,36),白细胞增多（,10,000/ul,），粒细胞减少（,1,000ul,）,休克，寒颤，僵直,严重的局部感染,(,脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，,),心率异常加快,低血压或高血压,呼吸频率加快,0,30,60,时间,(,分钟,),体温,血培养采血时机,细菌浓度,问题二：,怀疑血流感染，何时采血最佳？,尽可能在患者寒战或开始发热时采血,在患者接受抗生素治疗前采血,如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养,问题三：,应该采几份血液标本,?,每位患者采血最少,2,套，,3,套更好初发患者，绝不能只采,1,套标本,成人“一套”血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫“一份”,注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。,儿童一般只做需氧培养，特殊患者才考虑厌氧培养,采血套数,Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many,BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548,表皮葡萄球菌的临床意义,2,3,套血培养，有助于污染的判断。,Tokars,JI.Clin Infect Dis 2004;39:333,污染菌,致病菌,？,采集,1,套无法判断是病原菌还是污染菌。,问题四：,标本须间隔多久采集,?,同时或短时间内采集,2,3,套血培养，因为体内巨噬细胞吞噬系统会在,15,30min,内清除掉进入人体内的细菌,可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养，,30,分钟内完成,3,套血培养的采集，采集后立即进行抗菌药的经验治疗。如果,24,小时内报告阴性，则继续采集,2,套血培养。,可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔,30,分钟至,1h,采集,1,套，连续采集,3,套标本。如果,24,小时内报告阴性，则继续采集,2,套血培养。,问题五：应该采集多少血液,?,血液中细菌和真菌的检出率依赖于足够的血量，但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养基内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。血量与培养液的比例以,1：,5,1：10,为宜，但对已接受抗菌药物长达 10 天以上的患者，采血量与培养基的比例应为 1：20 或大于 1：20 为宜。,成人,5,10,ml,儿童35ml,婴幼儿12ml,骨髓12ml,儿童一般只需采集需氧瓶，一般静脉血,1,5ml,采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床,90,以上的感染为需氧菌或兼性厌氧菌感染,问题六：,血培养瓶的运送,不要放入温箱，会导致细菌进入生长对数期，从而错过检测的最佳时期。,阈值报阳,采集要点：,1.每一对血培养应当从身体的不同部位采集,2.用来培养的血推荐是静脉血,3.尽量避免从静脉导管中抽血,4.皮肤和瓶子的消毒非常关键,5.,蝶形针：先需氧后厌氧,注射器：先厌氧后需氧,导管相关性血流感染,CRBSI,导管可拔除的，应采集外周静脉血,2,套做血培养，同时送检导管尖端,5cm,做一般细菌培养及鉴定,导管不可拔除的，应采集外周静脉血,2,套做血培养，同时采集导管血,1,套做血培养，同时送检,脑脊液培养,采集的临床指征,在生理情况下，血液和脑脊液之间有血脑屏障，阻碍各种微生物通过血液进入中枢神经系统。因此正常人的脑脊液是绝对无菌的。,当怀疑结核性、化脓性、流行性、霉菌性脑膜炎时进行脑脊液培养。,标本采集,由临床医生以无菌操作行腰椎穿刺，采集约 3-5ml 脑脊液于 3 支无菌试管中，每支试管至少 1-2ml，然后马上将第 2 根送至实验室。做脑脊液培养时，建议同时做血培养。腰穿时必须作彻底消毒和无菌操作。,脑脊液标本的运送,采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。脑脊液标本送检的,理想时间为 15 分钟内,，半小时送检是可接受的，如果送检时间超过 1 小时，则会影响结果。,注,：脑膜炎双球菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡，肺炎链球菌和流感嗜血杆菌离体后也易死亡，因此，标本应立即送检，并且保温（禁止放冰箱，因脑膜炎双球菌遇冷死亡）,下呼吸道（痰培养）标本,采集的临床指征,咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的症状。,咯血包括泡沫血痰、鲜血和痰中带血等,呼吸困难，呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛,发热伴WBC增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高,胸部影像学检查提示感染可能,标本采集,痰（咳出的）,痰（诱导的）,支气管标本,采集指南,1.在护士指导下取标本,2.先用清水清洗或漱口,3.深咳痰以获得深部痰，放入无菌痰杯中,4.不能取鼻后液,1.先刷洗牙龈和舌,2.再用清水漱口,3.用雾化器使患者吸入约25ml 3-10的无菌盐水,4.采集诱导的痰液放入无菌痰杯,1.由临床医生操作采集,2.抽吸物或洗出物放入痰采集容器中,3.将刷取物放入装有盐水的无菌容器中,痰培养标本的运送,标本采集后正确盖好，防止泄露或容器外部留有残留物,采集后的标本应立即送往实验室（室温2）,申请抗酸杆菌检查或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入4冰箱，以免杂菌生长，但存放时间应不超过24,怀疑,嗜血杆菌,或,肺炎链球菌,感染时，标本应立即送检，切忌冷藏,穿刺液培养,穿刺液主要包括：,胆汁,胸水,腹水,心包液,关节液,脑脊液,在正常人体中，上述体液均是无菌的。有感染的情况下检出的细菌，在排除污染后应视为病原菌，及时给予正确的治疗。,采集的临床指征,临床上出现胸腔积液（胸水）、腹腔积液（腹水）、关节液、心包腔积液、鞘膜腔积液等情况时，多因浆膜腔发生循环障碍、炎症、癌浸润等病变，腔内液体渗漏增加所致。,标本采集,一般由临床医师在无菌操作下穿刺抽取或外科手术采集标本。取于无菌肝素抗凝管中（.肝素可抗凝标本），充分混匀后立即送检，不能有凝块。,中段尿培养,采集的临床指征,1.尿痛、尿急、尿频等典型的尿路感染症状,2.出现血尿或脓尿,3.泌尿系统疾病手术前,4.留置导尿管时间太长，患者出现发热,5.尿常规中WBC高和（或）亚硝酸盐阳性,尿感根据感染部位分为：,上尿路感染（肾盂肾炎）,下尿路感染（膀胱炎、尿道炎),男性可出现前列腺炎,标本采集,一般认为来自正常尿液是无菌的，而尿道口有正常菌群寄生，标本的采集必须无菌操作。,1.女性（female）：成年女性外阴部以肥皂水清洗，再用无菌水洗净，用无菌纱布擦拭，然后排尿弃去前段尿，留取,中段尿,3 毫升，置于无菌容器内。,2.男性（male）：用肥皂水清洗尿道口，后用清水洗后取,中段尿,。包皮过长者为防止包皮内细菌污染，可将包皮翻开冲洗后再取中段尿。,3.儿童（children）：采集中段尿较困难。如尿中细菌明显增多，可高度怀疑尿路感染，无细菌则可否定，细菌数中度增加时，有必要用,膀胱穿刺术,（vesicopuncture）或,导尿,（urethral catheterization）采集尿液。,4.,两侧肾盂尿：由医生采集，视为无菌体液。,5.,膀胱穿刺尿：由医生采集，此法用于厌氧菌培养。也可床旁注入厌氧血培养瓶。,留取中段尿,简单易行，又无感染的危险。通常取,晨起第一次尿,送检。尿液在膀胱内停留6-8h以上（给细菌足够的繁殖时间）,尿标本必须用,无菌带螺帽的容器,采集，否则为拒收标本。,痰培养容器？NO。,粪便标本,采集指征,腹泻,病人应尽量在急性期（天内）、在用抗生素前留取标本以提高病原菌的检出率，陈旧标本影响检出阳性率。,连续出现,脓血、黏液、糊状、米泔样等形状异常的粪便,。,疑似,细菌性食物中毒,患者，大便培养可作为一个辅助检查手段。,怀疑感染,伤寒沙门菌,、,细菌性痢疾,的患者。,胃肠道感染,怀疑霍乱等弧菌感染者。,标本采集,无需特别准备，但最好不要住院超过，在使用抗生素前采集最佳。,自然排便后，可挑取新鲜粪便中有,脓血、黏液部分,的粪便约，液体粪便取,絮状物,，,糊状、米泔样等性状异常,的粪便盛于无菌的容器中或置于保存液中送检。,大便标本的运送,标本采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。,粪便标本：室温,1 小时内,送至。,直肠拭子（procto swab）：室温 1 小时内送至。,高度怀疑霍乱弧菌感染的标本室温 1 小时内送至，运送必须符合特殊标本的安全要求。,碱性蛋白胨水,：霍乱弧菌增菌培养,生殖道标本,标本采集,男性：翻起包皮，无菌生理盐水冲洗尿道口，,采集从尿道口溢出的脓性分泌物,或用,男性专用拭子,插入尿道内24cm处取分泌物。前列腺液可用前列腺按摩法采集标本于无菌试管。,女性：先用生理盐水局部冲洗，使用窥器扩张阴道，用,无菌棉拭子,根据临床需要采集阴道、宫颈、宫内分泌物。,采集之后的标本需密封好，尽可能采用,转运培养基拭子转运（阿米斯拭子）,，冷藏（28）保存，怀疑有淋球菌感染的应采用常温保存，尽快送检。,注：推荐用革兰染色方法确定细菌性阴道炎.细菌培养往往容易误导。,脓液和伤口标本,采集指征：,软组织有急性化脓性炎症、化脓性疾病、脓肿、创伤感染等。,标本采集,开放性脓肿和脓性分泌物,：无菌生理盐水冲洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。从脓肿底部或脓肿壁取样最好。,封闭性脓肿,：宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，无菌注射器抽取脓液送检，最好做厌氧培养。,采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。,采集量：,尽可能多取,临床微生物标本送检口诀,标本送检要牢记，无菌采集是前提；,若已早用抗生素，停后用前观时候。,发热要做血培养，双侧双瓶少漏网；,何时采血要记清，寒战前后菌量浓；,取后不能及时送，常温放置忌冰冻。,尿液培养要计算，清洗外阴留中段；,培养长出多种菌，辨清污染需重送。,胸水腹水脑脊液，放入儿瓶阳性多，,条件限制无血瓶，接种平皿也可行。,无菌体液较简单，迅速送检少麻烦；,最好不取导管液，鉴定繁琐污染多；,伤口脓液取深部，接近新鲜组织处；,特殊培养要注明，避免冻伤与自溶；,痰液培养杂菌多，清晨漱口要深咯，,涂片合格继续做，正常致病必掌握。,大便要取脓血处，志贺沙门需关注；,弧菌霍乱和难辨，鉴定培养分阶段；,细菌培养鉴定难，标本留取是关键，,医护人员齐挑担，合理用药百姓赞。,