生物碱提取分离.ppt

,欢迎大家,第三节 提取与分离,一、生物碱的提取,除个别具有挥发性的生物碱（麻黄碱）可用水蒸汽蒸馏法提取外，一般情况下，总生物碱的提取均采用溶剂法提取。,溶剂提取法,关键 溶剂的选择,溶 剂,选择依据 生物碱的存在状态（游离、盐）及溶解性,（一）脂溶性生物碱的提取,1.,酸水提取法：,冷提法（渗漉法、冷浸法）,（酸性水：,0.1%1%H,2,SO,4,、,HCl,、,HOAc,等,）,天然药物,H,+,/H,2,O,药渣,Alk,OH,-,/H,2,O,H,+,/H,2,O,OH,-,弱碱及杂质,亲水性,Alk,此法缺点：,提取液体积较大（浓缩困难）,提取液中水溶性杂质多,解决方法,:,（,1,）离子交换树脂法,（,2,）有机溶剂萃取法,（,3,）沉淀法,（,1,）离子交换树脂法,中药酸水提取液（盐）,过阳离子交换树脂柱,（,RSO,3,-,H,+,）,流出液,（水性杂质）,树脂柱（,RSO,3,BH,+,）,氨液碱化（游离）,氯仿提取 回收溶剂,总生物碱,(2),有机溶剂萃取法,将酸水提取液碱化，使生物碱游离，然后用有机溶剂萃取碱性水溶液。回收有机溶剂得总生物碱。,（,3,）沉淀法,酸提碱沉法,天然药物,沉 淀,H,2,O,H,+,/H,2,O,提取；加碱碱化,水溶性,Alk,、杂质,不溶或难溶性,Alk,盐析法：适用于中等及弱碱性生物碱。,黄藤,1%H,2,SO,4,水溶液,H,2,O,沉淀,碱化至,pH=9,；加,NaCl,达饱和,掌叶防已碱,2.,醇类溶剂提取法,天然药物,H,+,/H,2,O,药 渣,醇 液,OH,-,/H,2,O,醇或酸性醇,回收醇；加酸水,碱性较弱的碱,亲水性,Alk,CHCl,3,液,沉 淀,Alk,OH,-,/H,2,O,，,CHCl,3,提取,3,与水不相混溶的有机溶剂提取法,天然药物,残 渣,CHCl,3,CHCl,3,H,+,/H,2,O,碱化（如,NH,4,OH,）（使,Alk,游离）,渗滤（或浸渍）（如,CHCl,3,等）,H,+,/H,2,O,OH,-,/H,2,O,Alk,沉淀,亲水性,Alk,碱性较弱的,Alk,（二）水溶性生物碱的提取,1.,雷氏铵盐沉淀法,季铵生物碱水溶液,酸化至弱酸性,酸水液,雷氏铵盐（硫氰酸铬钾）,雷氏铵盐沉淀（生物碱雷氏盐）,丙酮溶解，过滤,丙酮液,加硫酸银饱和水溶液，过滤,滤液（生物碱硫酸盐）,加氯化钡溶液,生物碱盐酸盐,1.,雷氏铵盐沉淀法,2.,溶剂法,生物碱水溶液,用极性有机溶剂（正丁醇,/,异,戊醇,/,氯仿,甲醇）萃取,水溶液,（水溶性杂质）,有机溶剂,回收,水溶性生物碱,二、生物碱的分离,(,一）生物碱的初步分离,分离依据：生物碱的碱性（弱碱性生物碱的盐不稳定；中强碱在,pH9,10,时可以游离）,特殊官能团（酚羟基的酸性，可溶于,NaOH,溶液）,分离流程,：,总生物碱的酸水液（盐）,氯仿萃取,1.,氯仿液,2,、酸水液,1.,氯仿液（弱碱性生物碱）,1,2%NaOH,萃取,碱水液,CHCl,3,液,NH,4,Cl,或,CO,2,处,理，,CHCl,3,萃取,CHCl,3,液,回收,酚性弱碱性生物碱,回收,非酚性弱碱性生物碱,2,、酸水液（强，中强碱性生物碱）,氨水碱化,pH9,10 CHCl,3,萃取,CHCl,3,液,碱水液,1,2%NaOH,萃取,酸化，雷氏,铵盐沉淀,沉淀,分解沉淀,水溶性生物碱,（强季铵碱）,碱水液,CHCl,3,液,NH,4,Cl,或,CO,2,处,理，,CHCl,3,萃取,回收,非酚性中强碱性,生物碱,CHCl,3,液,回收,酚性中强碱性生物碱,2,生物碱的单体分离,（,1,）利用生物碱的碱性差异分离（依操 作方式的不同，分离方法有二种）,混合总生物碱,酸水溶解,酸水液（盐）,加碱进行梯度碱化,同时用,CHCl,3,萃取，,分别回收,CHCl,3,生物碱由弱到强,依次被分离,CHCl,3,溶解,CHCl,3,溶液,(,游离,),用不同酸度,(,酸度由弱到强,pH,由大到小,),的酸水进行梯度萃取,酸水液分别碱化,同时,CHCl,3,萃取,回收,CHCl,3,生物碱由强到弱依次被分离,附注：用方法二分离时，应采用多缓冲纸色,谱（分配原理）进行先导分离。,碱性弱的生物碱易游离,（脂溶性，易溶于,CHCl,3,）。,碱性强的生物碱易成盐,（离子型，易溶于水）。,（,2,）利用生物碱的极性（溶解性）差异分离,分子结构的不同 极性的差异 对特殊溶剂的溶解性能不同而分离,苦参碱和氧化苦参碱,混合物,少量,CHCl,3,溶解,CHCl,3,液,加入,10,倍量的乙醚,沉淀,（氧化苦参碱）,母液,（苦参碱）,苦参碱,氧化苦参碱,流程说明：氧化苦参碱的,N O,半极性配位,键，极性大，水中的溶解度较大，而在乙醚,中的溶解度较小。,汉防己甲素和汉防己乙素混合物,冷苯溶解,不溶物,（汉防己乙素）,冷苯液,回收,汉防己甲素,流程说明：汉防己乙素的隐性酚羟基，使其极性较大，而在冷苯中的溶解度较小。,汉防己甲素,R=CH,3,汉防己乙素,R=H,（,3,）利用生物碱盐的溶解度不同分离,麻黄碱和伪麻黄碱混合物,甲苯溶解,甲苯溶液,流经,12%,草酸溶液,草酸溶液,减压浓缩，冷置，过滤,结晶（草酸麻黄碱）,母液（草酸伪麻黄碱）,CaCl,2,转化,CaCl,2,转化,盐酸麻黄碱,盐酸伪麻黄碱,流程说明,:,利用麻黄碱草酸盐的水溶度小于伪麻黄碱草酸盐的水溶度进行分离。,（,4,）利用特殊官能团的性质进行分离,含羧基的生物碱,可用碳酸氢钠水溶液萃取分离。,含酚羟基的生物碱,可用氢氧化钠水溶液萃取分离,（吗啡和可待因）。,含内酯或内酰胺结构的生物碱,用热的氢氧化钠开环，加酸环合的性质予以,分离（喜树碱）。,吗啡和可待因混合物,CHCl,3,溶解,氯仿溶液,1,2%NaOH,溶液萃取,碱水液,CHCl,3,液,弱酸酸化,CHCl,3,萃取,回收,可待因,CHCl,3,液,吗 啡,回收,吗啡,R=H,可待因,R=CH,3,（,5,）利用色谱法进行分离,生物碱（游离）为脂溶性成分，适合于采用吸附原理进行分离，吸附剂多用硅胶、氧化铝，流动相为中性的苯，氯仿，乙醚等有机溶剂或混合有机溶剂。,对一些极性很近似或极性较大的生物碱的分离，可以利用分配原理进行分离，效果可能更佳（三三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱）的分离。,高效液相色谱（三尖杉混合酯碱的分离），气相色谱（挥发性生物碱），干柱色谱，制备性薄层色谱等也经常用于生物碱的分离。,三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱混合物,支持剂,硅胶,固定相,pH5.0,缓冲液,洗脱剂,pH5.0,缓冲液饱和的氯仿液,高三尖杉酯碱 二者混合物 三尖杉酯碱,流程说明：利用高三尖杉酯碱较三尖杉酯碱结,构中多一个,CH,2,，极性较小（流动相中易,于分配）而先被洗脱下来，三尖杉酯碱则后被,洗脱下来，中间为二者的混合物。,三尖杉酯碱,R=,高三尖杉酯碱,R=,三尖杉酯碱,R=,高三尖杉酯碱,R=,