血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床检验基础试验六,血涂片染色,白细胞分类计数,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第1页,1.瑞氏染色,1.1试剂成份：,伊红酸性嗜碱性染料,亚甲蓝（美蓝）碱性嗜酸性染料,甲醇固定 溶剂,磷酸缓冲液（pH:6.4-6.8）,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第2页,1.2着色原理：,化学亲和作用+物理吸附作用,伊红+细胞中碱性物质红色,亚甲蓝+酸性物质蓝色,中性物质+伊红和亚甲蓝淡紫色,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第3页,1.3 pH对细胞染色影响,pH过低,PI,负电荷增多易与,亚甲蓝,结合,偏蓝,最适环境,：弱酸（pH6.4-6.8）,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第4页,血涂片：淡紫红色,镜 下：成熟红细胞粉红色,白细胞胞质,展现其特有色彩,细胞核,紫红色 染色质结构清楚,判别方法,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第5页,染色偏酸:,红细胞、嗜酸粒细胞颗粒偏红,白细胞核 淡紫红色或不着色,染色偏碱：,红细胞 灰蓝色,中性粒细胞颗粒 深暗、偏粗，紫黑色,嗜酸性粒细胞 暗褐色或紫黑色、蓝色,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第6页,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第7页,1.4器材,载玻片、推玻片、洗耳球,1.5试剂,瑞氏染液（商品）,I液：瑞特染料、纯甲醇、甘油,I液：磷酸盐缓冲液（,KH,2,PO4 Na,2,HPO4,）,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第8页,1.6 操作,制备血涂片（待完全晾干）,加I液数滴覆盖整个血膜,0.5-1min,滴加等量或稍多II液（洗耳球混匀）,5-10min,冲洗,（注意）,干燥,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第9页,注意事项,1.血涂片干后方可染色,2.加染液不能过少,3.冲洗时应以流水冲洗,4.染色过淡可复染，先加缓冲液再加染液,5.染色过深可用水冲洗或浸泡一定时间，也可用甲醇脱色,6.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少相关。应在详细实践中探索适当时间。,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第10页,2.WBC分类计数,2.1原理,2.2器材:,显微镜、香柏油、拭镜纸、清洁剂,2.3操作步骤,1.采末梢血染色,2.低倍镜下选择细胞分布均匀、着色良好域，,滴香柏油一滴,3.,油镜,下分类，分类时要有秩序连续进行（“几”字形），防止主观选择视野。通常分类100个白细胞，计 数并汇报各种白细胞所占百分比。,4.计算,5.汇报方式：XX细胞：XX%,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第11页,2.4 外周血正常白细胞形态特征:,中性粒细胞：杆+分,10-15,m,圆形,胞质粉红,胞质内颗粒量多、细小、均匀、紫红色,核弯曲呈杆、带状,染色质粗糙，紫红色,分叶核：核分2-5叶,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第12页,13-15,m,圆形,胞质着色不清,胞质内颗粒粗大、整齐、均匀、充满胞质、桔红色,核多分2叶,染色质粗糙，紫红色,嗜酸性粒细胞+淋巴细胞,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第13页,10-12,m,圆形,胞质着色不清,胞质内颗粒量少、大小不匀、排列零乱、紫黑色，可盖核上,核形不清,染色质粗糙，紫红色,嗜碱性粒细胞,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第14页,6-15,m,圆形/椭圆形,胞质透明、淡蓝色,胞质内多无颗粒,核形 圆/椭圆/肾形,染色质粗紧成块，深紫红色，核外缘光滑,淋巴细胞,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第15页,12-15,m,圆/椭圆/不规则,胞质半透明、灰蓝色或灰红色,胞质内有细小、尘土样紫红色颗粒,核形 不规则/山字/肾/马碲形，扭波折叠,染色质疏松网状，淡紫红色，有膨胀感和立体起伏感,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第16页,2.5注意事项：,1.分类最正确区域为体、尾交界处,2.分类时要有秩序地连续进行,3.白细胞总数与分类个数,4.分类中如见幼红细胞，不计入100个细胞内，以分类100个白细胞过程中见到幼红细胞多少个来汇报，并应注明其所属阶段。,5.分类中应注意观察成熟红细胞、血小板形态染色及其分布情况，注意有没有寄生虫（如疟原虫）及其它异常所见。,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第17页,Thanks,血涂片染色及白细胞分类计数专家讲座,第18页,