DB22∕T 1679-2012 豆芽中福美双残留量的测定 液相色谱-质谱∕质谱法(吉林省).pdf

ICS 67.060 X 11 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 16792012 豆芽中福美双残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of thiram in bean sprouts LC-MS/MS method 2012-12-17 发布 2013-01-01 实施吉林省质量技术监督局 发 布 DB22/T 16792012 1 前 言 本标准参照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 本标准主要起草人：杨帆、张勋、杨璐、顾婷婷、张代辉、胡婷婷、康明芹。DB22/T 16792012 2 豆芽中福美双残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本标准规定了豆芽中福美双残留量的液相色谱-质谱/质谱的测定方法。本标准适用于绿豆芽、黄豆芽和黑豆芽中福美双的残留量测定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。3 原理 豆芽中残留的福美双用甲醇-水溶液提取，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。4 试剂与材料 除另有说明外，所用试剂均为色谱纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。4.1 甲醇（CH3OH）：色谱纯。4.2 甲酸（HCOOH）：色谱纯。4.3 二氯甲烷（CH2Cl2）：色谱纯。4.4 福美双（Thiram，CAS 号 137-26-8，C6H12N2S4）：纯度99%。4.5 甲醇-水（6+4）：300 mL 甲醇（4.1）和 200 mL水混匀。4.6 甲酸水溶液（体积分数是 0.1%）：量取 1 mL甲酸（4.5），用水稀释并定容至 1 000 mL。4.7 空白基质液：称取试料 2.0g（精确到 0.1 g）于离心管中，加入 10mL 甲醇-水（6+4）（4.5），用高速匀浆机混匀，10 000 r/min 离心 3 min，取上清液，残渣再用 10mL 甲醇-水（6+4）（4.5）重复提取 2 次，合并前后三次的提取液，即得。4.8 福美双标准储备液：100.0 mg/L。称取 50 mg（精确至 0.1 mg）福美双标准品（4.4）于 50mL容量瓶中，用二氯甲烷(4.3)溶解并定容至刻度，标准储备溶液避光 4保存，可使用 6 个月。4.9 标准工作液：准确移取一定体积的标准储备溶液（4.7），根据需要用空白基质液稀释成 0.05g/mL、0.1g/mL、0.2g/mL、0.5g/mL、1.0g/mL 的福美双系列标准工作液。该溶液须配制于棕色容量瓶中，4-6条件下保存。DB22/T 16792012 3 4.10 有机相微孔滤膜：0.22 m。5 仪器 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。5.2 高速匀浆机。5.3 高速离心机：10 000 r/min。5.4 天平：感量 0.0001 g 和 0.01 g。5.5 涡旋混合器。6 样品的制备 取有代表样品采用四分法分样后，经粉碎机粉碎，混匀，密封，作为试料，标明标记。7 分析步骤 7.1 提取与净化 称取试料2.0g（精确到0.1 g）于离心管中，加入10mL甲醇-水（6+4）（4.5），用高速匀浆机混匀，10 000 r/min离心3 min，取上清液，残渣再用10mL甲醇-水（6+4）（4.5）重复提取2次，合并前后三次的提取液，取1 mL上清液过0.22 m滤膜，供液相色谱-质谱/质谱分析。7.2 空白试验 除不称取试料外，均按7.1进行。7.3 测定 7.3.1 色谱参考条件 色谱参考条件如下：a)色谱柱：C18，150 mm 2.1mm，粒径 3.5 m；b)柱温：室温；c)流速：0.20 mL/min；d)进样量：10 L；e)流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液，梯度比见表 1。表1 流动相、流速及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 0.1%甲酸水溶液 甲醇 0 0.2 80 20 1.00 0.2 80 20 4.00 0.2 10 90 DB22/T 16792012 4 表 1（续）时间 min 流速 mL/min 0.1%甲酸水溶液 甲醇 7.00 0.2 10 90 7.01 0.2 80 20 15.00 0.2 80 20 7.3.2 质谱参考条件 质谱参考条件如下：a)电离方式：电喷雾电离（ESI）；b)扫描方式：正离子扫描，多反应监测（MRM）；c)去簇电压：45 V；d)离子源温度：550；e)雾化气：1.5 MPa；f)辅助气：1.5 MPa；g)定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表 2。表2 目标化合物的监测离子对、去簇电压和碰撞能量 化合物名称 母离子 m/z 子离子 m/z 去簇电压 碰撞能量 143 45 17 福美双 263 88 45 45 7.3.3 定性分析 在同一色谱/质谱条件下进行标准溶液和样品溶液的测定，如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时间与标准物质色谱峰的保留时间一致，所选择的两对子离子的质荷比也一致，而且样品定性离子的相对丰度与浓度相当标准工作溶液的定性离子的相对丰度相比较，相对标准偏差不超过表3规定的范围，则可判定样品中存在该物质。标准溶液的多反应监测色谱图参见附录A中的图A.1。表3 定性确定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 50%20%至50%10%至20%10%允许的相对偏差 20%25%30%50%7.3.4 定量测定 根据试样中被测样液中被测组分的含量情况，选取响应值相近的标准工作液进行分析，对于高浓度样品须适当进行系列稀释。标准工作液和样液中被测组分的响应值均应在仪器线性响应范围内，外标法定量。8 结果的计算和表述 DB22/T 16792012 5 用色谱数据处理机或按公式（1）计算试样中枯草隆残留含量，计算结果需扣除空白值。mVcX=.(1)式中：X 试料中被测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c 从标准曲线读出的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 样液所代表的最终试料的质量，单位为克（g）；计算结果保留两位有效数字。9 定量限、回收率 9.1 定量限 本标准方法定量限为0.1 mg/kg。9.2 回收率 样品中福美双的添加浓度及其回收参见附录B。10 精密度 10.1 重复性 在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定结果的算术平均值的15%。10.2 再现性 在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定结果的算术平均值的20%。DB22/T 16792012 6 A A 附 录 A（资料性附录）福美双标准品液相色谱-质谱/质谱图 图A.1 福美双标准品液相色谱-质谱/质谱图（0.1 mg/kg）DB22/T 16792012 7 B B 附 录 B（资料性附录）不同添加水平回收率范围及重现性（n=6）表B.1 福美双的添加回收率及重现性 样品 添加浓度 mg/kg 回收率范围%相对标准偏差%0.1 80.1101 7.94 0.2 85.298.3 4.83 绿豆芽 1.0 88.399.7 4.19 0.1 85.6104 7.09 0.2 86.6100 5.59 黄豆芽 1.0 87.2101 5.43 0.1 85.8109 9.02 0.2 86.6100 5.60 黑豆芽 1.0 85.0100 5.96 _