微生物的筛选专家讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2013-5-20,#,一,微生物筛选原理及介绍,二,微生物筛选流程,三,微生物筛选操作,content,微生物的筛选专家讲座,第1页,一、微生物筛选介绍,1,、概念,2,、筛选及纯化方法,3,、培养基选择,微生物的筛选专家讲座,第2页,概念：,在混杂微生物群体中，按照微生物代谢特征，分离出特定功效微生物，并进行纯化直至取得单一菌株操作过程。,土壤是微生物大本营，混杂着大量微生物，从中分离可得到只含有一个微生物纯培养。,概念,筛选及纯化方法 培养基选择,微生物的筛选专家讲座,第3页,微生物筛选方法有：稀释涂布法和平板划线法。,稀释涂布法：将土壤溶液稀释成一定梯度，将其涂布到固体平板培养基上。,平板划线法：挑取稀释涂布后长出菌落，在固体平板培养基上划线培养，获取纯菌落。,概念,筛选及纯化方法,培养基选择,微生物的筛选专家讲座,第4页,微生物的筛选专家讲座,第5页,细菌筛选：选择性培养基,依据某种微生物特殊营养要求或其对某化学、物理原因抗性而设计培养基。其功效是使混合菌样中劣势菌变成优势菌，,从而,提升该菌筛选效率。,概念 筛选及纯化方法,培养基选择,微生物的筛选专家讲座,第6页,细菌保留：牛肉膏蛋白胨培养基,配方（,g,）：牛肉膏,3,蛋白胨,10,氯化钠,5,，琼脂,15,蒸馏水,1000ml,，,pH7.2,。,概念 筛选及纯化方法,培养基选择,微生物的筛选专家讲座,第7页,二、微生物筛选纯化流程,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,平板划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第8页,三 微生物筛选纯化操作,注意事项：,筛选之前，提前制作好试验用培养基。,与培养微生物相关试验器材需要灭菌，方法为在,121,条件下高压灭菌,20,分钟。,与微生物相关操作需要在无菌操作台上进行。操作之前,15,分钟打开紫外灯。,微生物的筛选专家讲座,第9页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,采样：土壤样品，梅花形布点采样，取得用四分法进行取样，将样品放入,4,冰箱中保留待用。,微生物的筛选专家讲座,第10页,富集培养：指从微生物混合群开始,对特定种数量百分比不停增高而引向纯培养一个培养方法。在适于目标微生物而不适于其它微生物生长条件下继续培养，则目标微生物将成为优势种而得到纯培养。,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第11页,以筛选产,DMS,功效微生物为例：,取,2.5g,土样置于,50ml,改良基础盐液体培养基中，,28,震荡培养,4,天。,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第12页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第13页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,将菌种用无菌水制成悬液。,取若干只无菌试管，每只内盛,9ml,无菌水。,吸收上述菌悬液,lml,加入第,1,只含有没有菌水试管内。也就是,10,-1,。,从第,1,只试管内,(10,-1,),吸收,lml,注入第,2,只含有没有菌水试管内，也就是,10,-2,。,用一样方法，制成,10,-3,10,-8,菌悬液。,微生物的筛选专家讲座,第14页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,划线目标：逐步纯化，直至出现单菌落，取得纯菌株。,3,5,次。,微生物的筛选专家讲座,第15页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第16页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第17页,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保留,微生物的筛选专家讲座,第18页,将接种菌株斜面放入,4,冰箱中保留。至此，已经完成了微生物初筛。相关微生物更多信息能够用判别培养基对其进行复筛，或者利用其它伎俩对其进行判别。,微生物的筛选专家讲座,第19页,谢谢大家,微生物的筛选专家讲座,第20页,