临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,*,单击此处编辑母版标题样式,*,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,*,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,Superbug,：超级细菌,MRSA,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌,（,carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,，,CRE,）,2,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,Superbug,：超级细菌,3,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,Superbug,：超级细菌,一位,49,岁的妇女,2016,年,4,月因尿路感染症状在宾夕法尼亚州的部队医院求医，分离到一种能够抵抗多种药物的大肠杆菌菌株，携带有,15,种不同的耐药基因，集中在两种能在细菌之间轻松移动的质粒上。,一个质粒含有,CTX-M,型超广谱,-,内酰胺酶；另外一个就是含有新发现的可怕的,mcr-1,基因（导致多粘菌素抗药性的基因）。,4,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,Superbug,：超级细菌,美国现首例“超级细菌”,全球无任何抗生素可治！,Colistin Resistance,1,、多粘菌素之所以能坚挺到现在，是由于它从抗生素早期开始就是一种毒性药物，由于副作用的缘故而很少被列入处方之中；正因为其很少被使用，细菌才没能适应它。,2,、在此之前，许多细菌已经能够耐受几乎所有的抗生素，而,多粘菌素则是我们最后的防线,。,3,、而MCR,-1,之所以这么麻烦，是因为它为细菌提供了抵抗多粘菌素的能力。,5,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,1,、,Walter Reed,陆军研究所的,Patrick,和,Walter Reed,国家军事医疗中心的,Kurt,在报告中表示，这项发现“,预示着真正的泛耐药病原菌即将出现,”。,2,、,“,我们有身处后抗生素世界的风险,”，美国疾病控制和预防中心,(CDC),主任弗里登,(Tom Frieden),。,3,、,美国疾控中心人畜共患传染病研究部门主任,Beth Bell,表示，疾控中心已经开始与宾夕法尼亚卫生局合作研究：“这位女士是,如何携带上这种有着高度耐药性的细菌？,”,4,、,宾夕法尼亚州州长,Tom Wolf,声明确认了这起病例，以及疾控中心参与联合调查一事。,6,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,7,1 Hancock RE,Scott MG.The role of antimicrobial peptides in animal defenses.Proc Natl Acad Sci USA,2000,97:8856-8861.,细菌对多粘菌素耐受的传统机制,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,细菌对多粘菌素耐受的传统机制,8,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,Emergence of plasmid-mediated colistin resistancemechanism MCR-1 in animals and human beings in China,9,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,very serious phenomenon that occurs nowadays,Super-superbug,Emergence of the mcr-1 colistin resistance gene in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,（,CRE),?,10,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,一、有没有耐多粘菌素的肠杆菌科细菌？,二、如有耐受菌是否同时又是,CRE,菌株？,三、菌株是否保存？,CRE,(,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌,)+,mcr-1,的研究,11,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,CRE+,mcr-1,的研究,对我院（苏州大学附属第二医院）,2011-2015,年,的多粘菌素耐受,菌株,进行了,调查分析,，发现,：,1,、,有,4,株分离自住院病人的肠杆菌科细菌携带,MCR-1,质粒，其中,2,株为,MCR-1,质粒整合与含,NDM-5(New Delhi metallo-lactamase-5),质粒的,CRE,菌株,；,2,、,整合,MCR-1,质粒,的,CRE,菌株,表现,出,对包括多粘菌素、亚胺培南、,美洛培南,在内的几乎所有抗菌药物均耐药，感染该菌株的患者最终由于抗生素治疗无效而导致死亡,。,12,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,质粒接合转移试验,大肠埃希菌,J53AZ-R,SZ03,SZ04,+NaN,3,+,多粘菌素,37,过夜,单菌落,SZ03,SZ04,大肠埃希菌,J53AZ-R,(1ml)LB+NaN,3,(1ml)LB+,多粘菌素,37,250r/min,1618h,鉴定,各取,100l,菌液,(2ml)LB+NaN3+,多粘菌素,37,100r/min,56h,100l,菌液,+NaN3+,多粘菌素,37,过夜,各取,100l,菌液,(2ml)LB+NaN3+,多粘菌素,37,100r/min,56h,100l,菌液,+NaN3+,多粘菌素,37,过夜,成功获得,mcr-1,的转移结合子，,证实,了,MCR-1,质粒能够,水平,转移至受体菌。,PCR,质粒复制子分型,：,MCR-1,质粒为,IncI2,和,IncX4,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,中科院,JCR,分区：,一区,影响因子：,22.433,14,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,16,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,17,调查分析中国,CRE,菌株携带多粘菌素抗性基因,mcr-1,的临床现状,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,中美,CRE,合作团队,1,、,高,CRE,流行地区（北部：北京；东部：苏州；南部：广州）,2,、,低流行地区（西北：银川和西南：成都,）,3,、,边境地区的云南省昆明市。云南与缅甸、老挝、越南接壤，又靠近印度和孟加拉国（,NDM,高发病率）。,6,家三甲附属医院,18,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,美国,Rutgers,大学公共卫生研究院,Kreiswirth,教授,纽约斯隆凯特林纪念医院,汤一苇教授,中美,CRE,合作团队,19,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,20,菌株来源,菌株来自,20142015,年中国北部（北京）、东部（苏州）、,南部（广州）、西北部（银川）、西南部（成都和昆明）的,6,家,三甲医院，共,264,株。,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,21,CRE,菌株耐药基因分析,表达,mcr-1,基因的,CRE,菌株有,3,株大肠杆菌,(CDA6,BJ10,BJ13),、,2,株肺炎克雷伯菌,(SZ03,SZ04),碳青霉烯酶基因,mcr-1,KPC+,NDM+,IMP+,VIM+,多阳,阴性,菌株数,134,69,18,7,31,59,5,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,MCR-1,菌株多位点序列分型（,MLST,）,肺炎克雷伯菌管家基因,(,rpoB,gapA,mdh,pgi,phoE,infB,tonB),大肠杆菌管家基因,(,adk,fumC,gyrB,icd,mdh,purA,recA,),SZ03,：,ST25,SZ04,：,ST25,CDA6,：,ST167,BJ10,：,ST156,BJ13,：,ST457,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,23,耐药基因,接合转移,药敏试验,1,2,3,CDA6,、,BJ10,、,SZ03,和,SZ04,携带的,NDM-5,，与,NDM-1,相比，该变异株具有更高的碳青霉烯酶活性。,BJ13,的碳青霉烯酶基因检测结果为阴性，但是它含,bla,CTX-M-15,和,bla,CMY-2,，并在孔蛋白基因,ompC,的,303,位氨基酸处有一个提前终止密码子，可以解释其碳青霉烯酶耐药性。,CDA6,、,BJ10,、,SZ03,和,SZ04,的,mcr-1,基因可以通过接合转移法转入,J53(AZ-R),中，,而,BJ13,的,mcr-1,基因难以转移。,CDA6,、,BJ10,、,SZ03,、,SZ04,菌株的,bla,NDM-5,基因也可通过接合转移法转入大肠杆菌,J53(AZ-R),中。,mcr-1,基因的转移仅与,bla,NDM-5,整合的,IncX3,质粒紧密相关？,所有的,mcr-1,转移接合子,都只对粘菌素耐药，而对其他抗生素均敏感，表明,mcr-1,的质粒上不含有其他耐药基因,;,bla,NDM-5,转移接合子,都对除氨曲南以外的所有,-,内酰胺类耐药。,CRE+MCR-1,菌株,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,24,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,1,、,这种耐多粘菌素的,MCR-1,质粒蔓延到了,CRE,菌株，,产生,泛耐药株，提示我国,CRE,菌株的耐药现状异常严峻,，若想打赢抗生素耐药性这场仗，就迫切需要更好的监测和管理。,结论与展望,2,、,MCR-1,的表达调控仍不明确，需要进一步的深入研究！,（但重视程度远远不够）,25,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,Thank you,！,26,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,27,菌株鉴定,采用,BD,公司的,Phoenix-100,全自动微生物分析仪和,革兰阴性菌鉴定卡对细菌进行鉴定。,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,临床耐多粘菌素CRE菌株的子流行病学研究,