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单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,几种非放射性标记分析技术,示踪剂,:,放射性 非放射性,酶,荧光剂,发光剂,重金属离子,稀土元素,酶标记免疫分析法,免疫化学发光法,时间分辨荧光免疫分析法,一 、酶标记免疫分析法,原理,酶标记抗原,/,半抗原或抗体,与待测抗体或抗 原反应后,酶使相应底物产生有颜色的产物。,ELISA,(,Enzyme-,linkedimmunosorbent,assay,),酶与底物,辣根过氧化物酶 过氧化物或供氢体,(DH2),碱性磷酸酶 对,-,硝基苯磷酸酯,方法,1,固相酶标免疫测定,(,非均相酶免疫测定,_,将待检抗原或抗体先固定于固相载体表面,再用免疫酶与已被固定的抗原或抗体作用,然后通过相应底物与免疫酶显色反应的程度,确定被检抗原或抗体的有无和含量。如,ELISA,2,非固相酶标免疫测定,(,均相酶免疫测定,),在试验操作中不需要固相载体,免疫酶反应直接在液相中进行,其检测过程也不需要进行相的分离。,酶多重免疫测定技术,(,enzyme multiplied immunoassay,chnique,EMIT,)。,二、免疫化学发光法,(,Immunochemiluminometric,Assay ICMA,),原理:用,化学物质,标记抗体,/,抗原,与待测抗体,/,抗原反应经适当处理后能发生化学反应,同时以光子形式释放出能量。发光强度与待测物浓度相关。,常用的化学发光物质,:,异鲁米那,N-,甲基,-,氮蒽,,三 时间分辨荧光免疫分析法,(Time-resolved,Fluoimmunoassay,),原理:利用,特种荧光物质为,标记,常用的特种荧光物质:,稀土金属铕(,Eu,),的络合物,蛋白质,该物质在,340nm,波长紫外线激发下发射波长为,613nm,的光子。,退激后分子不破坏,可反复激发。既有放大效应,又可保留样品供其他分析或重复测量。,
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