第三章--人工抗体的制备教学资料.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第三章 人工抗体的制备,第一节 多克隆抗体,一、概念：,采用传统免疫方法，将抗原物质经不同途径注入动物体内，数次免疫后采血，分离血清，由此获得抗血清即为多克隆抗体。,简称多抗,。,二、多克隆抗体用途,1.用于抗原物质的鉴别、定位、分析和提纯。,2.作为疾病的诊断、检疫试剂。,3.作为人和动物的某些疾病的治疗制剂。,三、多克隆抗体制备过程,第二节 单克隆抗体,一、概念：,是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）产生的针对单一抗原决定簇的抗体，简称单抗。,特点：,高特异性、高均一性,二、单抗与多抗的比较,特性,多抗,单抗,对免疫原的要求,免疫原纯度高，不纯的抗原即可,抗体纯度才高 产生高纯度抗体,抗体产生细胞,多克隆性 单克隆性,同质性,高度异质 高度同质,特异性,较高，与抗原上 高，与特定,多种决定簇结合 决定簇 结合,稳定性,较好 较差,标准化,较难 简单,交叉反应,很常见 不常见,沉淀反应,有 大多数没有,二、单抗与多抗的比较,特性,多抗,单抗,适用的血清学实验,适用大多数 需适当选择,抗体纯度才高 产生高纯度抗体,供应量,有限 无限,有效抗体含量,0.11.0 悬浮培养：0.010.05,（mg/mL）,中空纤维：1.05.0,小鼠腹水：1.05.0,无关Ig含量,1015 体外培养液：无,（mg/mL）,小鼠腹水：0.51.0,其他血清蛋白,有 体外培养：少量,牛血清白蛋白,小鼠腹水：少量杂蛋白,三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体生产基本过程,四、单克隆抗体的优势,高度均一性：,纯度很高的均一性抗体,高度专一性：,只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应。,大量产生及稳定性：,杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖之传代。,五、单克隆抗体的应用,（一）在血清学技术方面。,（二）在免疫学基础研究方面。,（三）在肿瘤治疗方面。如生物导弹。,（四）在抗原纯化方面。,（五）用于制备抗独特型抗体疫苗。,第三节 基因工程抗体,一、概念：,利用基因工程技术制备的抗体分子，称为基因工程抗体。这是分子水平的抗体。,优势：,去除或减少,无关结构，保留或,增加天然抗体特异,性和生物学活性。,基本制备过程：,是指在同一抗体分,子中含有不同种属来,源抗体分子片段的抗,体。,嵌合抗体多为“鼠-,人”类型。,一、嵌合抗体：,将鼠抗体超变区基因嵌入人抗体Fab骨架区编码基因中，再将此DNA片段与人Ig恒定区基因相连，转染杂交瘤细胞，并表达嵌合的V区抗体。,二、重构抗体：,三、单链抗体：,是将 Ig 的 H 链和 L 链的 V 区基因相连，转染大肠杆菌表达的抗体分子，又称单链 FV分子。,如:,Ig相关分子,：将抗体分子部分片段连接到与抗体无关的序列上得到。,噬菌体抗体,：将已知特异性的抗体分子的所有V区基因在噬菌体中构建基因库，用噬菌体感染细菌，模拟免疫选择过程，使具有相应特异性的重链和轻链可变区在噬菌体表面呈现出来。,四、其他基因工程抗体：,五、全套抗体基因库,第四节 催化抗体,一、概念：,是具有催化活性的免疫球蛋白，也叫,抗体酶,。具有,抗体的高度选择性,和,酶的高效催化性,。,优点：,具有,抗体的高,度选择性,和,酶的高,效催化性,。,如：细胞融合法、基因工程抗体技术、引入辅助因子法等。,二、催化抗体的制备：,三、催化抗体的应用：,如：在抗肿瘤方面的应用。在戒毒上也有重要应用价值。,此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢,