乙肝检验.ppt

<p>单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,乙 肝 检 验,1 2 3,山医大二院检验科,贾铁文,健康大讲堂,病毒性肝炎（,viralhepatitis,）,是由各种不同的肝炎病毒引起的一组以肝脏损害为主的传染病。,类型,病因 血清标志物,甲肝：,甲型肝炎病毒（,HAV,）,抗,HAV-IgG/IgM,乙肝：,乙型肝炎病毒（,HBV,）,乙肝两对半、前,S1/S2,丙肝：,丙型肝炎病毒（,HCV,）,抗,HCV-IgG/IgM,丁肝：,丁型肝炎病毒（,HDV,）,抗,HDV-IgG/IgM,戊肝：,戊型肝炎病毒（,HEV,）,抗,HEV-IgG/IgM,病毒性肝炎,临床症状：,恶心、呕吐、厌油、乏力、食欲减退、肝功能异常,黄疸,无症状感染或自限性隐性感染,慢性肝炎或肝衰竭,病理改变：以肝细胞变性、坏死、炎症反应为特点。,病毒性肝炎,乙肝：全称为乙型病毒性肝炎，是一种由乙型肝炎病毒（,HBV,）感染机体后所引起的疾病。,乙型肝炎病毒是一种,嗜肝病毒,。,乙型病毒性肝炎,乙肝流行的地区分布图,乙型肝炎感染呈世界性流行，不同地区,HBV,感染的流行强度差异很大；,据世界卫生组织报道，全球约,20,亿人曾感染过,HBV,，其中,3.5,亿人为慢性感染者，每年约有,100,万人死于,HBV,感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌（,HCC,）。,乙肝流行现状,国内现状：,乙型病毒性肝炎在我国是一种高发传染病，人群感染率达,60%,左右；,我国现有乙肝病毒携带者,1.2,亿人，占世界乙肝病毒携带者,3.5,亿人的,1/3,；,根据推算，我国现有慢性乙肝患者约,3000,万人，每年新发生的急性肝炎病人就有,120,多万，其中甲型肝炎约占,50%,，乙型占,25%,，丙型占,5%,，戊型占,10%,，其他型及未定型占,10%,。,每年约有,30,万人因晚期肝病而死亡。,乙肝流行现状,乙肝病毒本身并不损伤肝脏,损伤肝脏的本质是人体清除病毒的免疫反应,乙型病毒性肝炎致病机理,免疫系统,外来物质,乙肝病毒,免疫功能低下,（慢性乙肝）,免疫功能健全,（清楚病毒）,免疫功能超敏,（重型肝炎）,免疫耐受,（,HBV,携带者）,幼龄感染,成年感染,90%,慢性化,10%,清除病毒 急性肝炎,1%,暴发肝炎,非活动性携带 慢性肝炎,（,HBeAg,）（,HBeAg+,）,40%,肝硬化,95%,清除病毒,5%,慢性感染,非活动性携带 慢性肝炎,（,HBeAg,）（,HBeAg+,）,1520%,肝硬化,中国人感染,HBV,起始于幼龄期,各种传染途径的本质都是,血液,传播,医源性传播,性传播,母婴传播,血液,血液,血液,乙肝病毒的传播途径,什么是血液传播,血液传播的条件：病毒的数量、接触的程度,通常理解的血液传播途径：输血、共用针筒,易被忽略的血液传播的途径：,共用剃须刀，共用牙刷，共用毛巾，纹身、纹眉、穿耳、洞鼻、环耳廓等，因刀具的不洁造成传播。,中国因不安全注射造成的乙肝感染者不少于,3600,万人,中国疾病预防控制中心,乙肝病毒的传播途径,接吻,、,共餐、,共同工作，共餐共宿舍，大量流行病学工作证明无传染危险。,中国疾病预防控制中心病毒性肝炎知识问答,蚊虫叮咬不能造成传播：,有人已做过研究，蚊体内无乙肝病毒繁殖，蚊叮人无胃内容物吐出，蚊繁殖季节与非蚊繁殖季节与乙肝病毒带率的高低无关连。,中国疾病预防控制中心病毒性肝炎知识问答,乙肝病毒的传播途径,什么是母婴传播,?,分娩时母亲的血液、阴道分泌物通过胎儿 的破损皮肤、粘膜而传染；,胎盘剥离时微量血液漏至胎循环中,.,乙肝病毒的传播途径,电镜下可见大球形颗粒、小球形颗粒和管型颗粒三种形态。,完整的,HBV,颗粒为,大球形颗粒,，又称,Dane,颗粒,，直径,42nm,，分为包膜与核心两部分，包膜,HBsAg,，核心部分含有环状双股,DNA,、,DNA,聚合酶、,HBcAg,和,HBeAg,等，是病毒复制的主体。,电镜下形态,HBV,模拟图,完整病毒颗粒，内含,DNA,，具有复制功能,空泡型病毒颗粒，无,DNA,，不具有复制功能,乙肝病毒存在的三种形式,HBV,基因组,HBV DNA,是由,长链,L(,负链,),和,短链,S(,正链,),组成的不完全双链环状,DNA,，短链的长度相当于长链的,50%,85%,。,HBV DNA,长链载有病毒蛋白质的全部密码，有,4,个开放读码框架,(ORF),，分别称为,S,、,C,、,P,和,X,区。编码,7,个蛋白质。,HBV DNA,易发生变异，特别是前,S,或,S,区基因较易突变。,嗜肝,DNA,病毒的共同特点：,内含,33.3kb,松散环状、部分双链,DNA,基因组,及,DNA,聚合酶；病毒的复制需逆转录过程。,A(n),mRNA,cccDNA,HBsAg,包膜,负,链,DNA,包,裹,后,的,前,基,因,mRNA,传染性,HBV,病毒颗粒,传染性,HBV,病毒颗粒,部分双链,DNA,逆转录酶,DNA,聚合酶,肝 细 胞,HBV,在肝细胞内的复制,细胞核,胞浆,HBV,对外界环境抵抗力较强，,30,-32,至少可存活,6,个月，,-20,可存活,15,年。,100,干烤,1,小时；,100,直接煮沸,2,分钟；微波（频率,2450MHz,、输出功率,500W,、,75,）,1-3,分钟，,0.5%,过氧乙酸，,3%,漂白粉溶液，,5%,次氯酸钠和环氧乙烷等处理均可灭活,HBV,。,乙肝病毒抵抗力,一、肝功能指标的检测（生化检测）,（是否有肝功能受损）,二、,HBV,血清标志物的检测,（是否有,HBV,感染）,肝炎病毒本身,组成该病毒的成分,抗病毒抗体（血清标志物检测）,三、,HBV,DNA,、基因型和变异检测,四、,HBV,肝组织病理学检查,HBV,感染的实验室检查,临床意义：谷丙转氨酶（,ALT）,主要存在于肝细胞中。当肝脏发生炎症、坏死时，,ALT,就会从肝细胞内大量释放入血，导致血清中,ALT,升高，因此,ALT,升高是判断肝细胞损害的一个敏感指标。但是除了病毒性肝炎外，其它类型的肝炎或肝脏疾病，,ALT,也会升高。,主要指标,：,反映肝细胞损伤的项目（酶学检查）：,谷丙转氨酶,ALT,（,GPT,）、,谷草转氨酶,AST,（,GOT,）、,碱性磷酸酶（,ALP,）、,谷氨酰转肽酶（,GT,或,GGT,）,其他酶类,乙型肝炎的生化指标检测,反映肝脏分泌和排泄功能的项目：,总胆红素（,TBil,）,直接胆红素（,DBil,）,反映肝脏合成贮备功能的项目：,总蛋白（,TP,）,白蛋白（,ALB,）,免疫球蛋白（,Ig,）,凝血因子,乙型肝炎的生化指标检测,反映肝脏纤维化和肝硬化的项目（肝纤四项）：,透明质酸酶（,HA,）,层粘连蛋白（,LN,）,III,型前胶原（,PCIII,）,IV,型胶原（,IV-C,）,反映肝脏肿瘤的标志物：,甲胎蛋白（,AFP,）,乙型肝炎的生化指标检测,机体感染,HBV,后产生相应的免疫反应，形成多种不同的抗原,(Ag),、抗体（,Ab,）系统。,乙肝的血清学标志物检测,乙肝的血清学标志物检测,表面抗原,HBsAg,表面抗体（,HBsAb,）,外衣壳抗原,前,S1,抗原 前,S1,抗体,前,S2,抗原,前,S2,抗体,核心抗原,HBcAg,核心抗体（,HBcAb,）,内衣壳抗原,e,抗原,HBeAg e,抗体（,HBeAb,）,乙肝五项,定性检测：,酶联免疫吸附实验（,ELISA,）：灵敏性高，成本低，适用于普通病人筛查；,胶体金免疫层析法（金标法）：简便易行，可用于急诊病人快速检测；,定量检测：,化学发光法定量检测：可用于,HBVMs,为临界值的病人的确证；,可间接反映宿主,HBV,的复制水平，在评价抗病毒治疗的病毒学应答、疗效和判断预后方面有重要意义。,乙肝血清学标志物检测方法学,乙肝表面抗原（,HBsAg,）：,又称为“奥抗”，,1963,年,Blamberg,在澳大利亚土著人血清中发现；,是乙肝病毒的外壳，保护乙肝病毒,DNA,；,HBsAg(+),只能说明人体内有乙肝病毒外壳，但有无乙肝病毒,DNA,则需要结合,PCR,检查来确定；,乙肝潜伏期（最早出现）；,无症状的乙肝病毒携带者；,慢性乙肝（结合其他几项指标来判断）。,定期复查,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝表面抗体（,HBsAb,）,保护性抗体，可中和掉乙肝病毒的感染力；,阳性表明既往感染过乙肝病毒，但已经排除病毒；,接种过乙肝疫苗，产生了保护性抗体；,滴度越高，保护力越强；,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝,e,抗原（,HBeAg,）,:,是乙肝病毒内核的主要结构蛋白；,可溶性抗原，血清中可检测到；,是急性感染的早期标志；,是血液高传染性的标志；,通常在血清中存在时间较短，为,3-6,周；,持续阳性，转变为慢性乙肝的可能性大。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝,e,抗体（,HBeAb,）,:,e,抗原转阴数月出现,e,抗体阳性,一般来说，,e,抗体阳性预示病毒复制减少或停止。,e,抗体阳性，,HBV DNA,阴性：说明体内乙肝病毒复制减少，但如果,HBV DNA,阳性，则说明体内还存在病毒大量复制，有可能是病毒变异，需要重视。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝核心抗体（,HBcAb,或者抗,-HBc,）,:,非保护性抗体；是乙肝病毒侵害的指标之一,HBcAb-IgM,：判断,HBV,急性感染和重新活动的慢性,感染标志，血液中出现最早，持续,3-6,个月，持续高滴度，有慢性化倾向。慢乙肝活动期阳性，表明病毒在复制，有传染性。,HBcAb-IgG,：是既往感染的标志，可在体内持续存在数年至数十年。是流行病学研究的指标。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝前,S,1,抗原（,Pre-S1,）：,（一）、感染状况指标：,主要存在于血清中,HBV,表面，是,HBsAg,氨基端延长的的一段多肽。提示机体内含有,HBV,就有前,S1,抗原。,前,S1,抗原与,HBV-DNA,，,HBeAg,检测率高度符合是一项十分重要的病毒复制指标。可作为,HbeAg,和,HBV-DNA,检测的补充和对照。,前,S1,抗原的测定结合“乙肝五项”检测，可弥补因病毒变异和其它原因造成的,HBeAg,（,-,）的“误寻”。,病毒附着于肝细胞上，最重要的介导部位是前,S1,蛋白的氨基酸（,AA,）,21-47,片段，变异的病毒只要这一区段完好就有传染性。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝前,S,1,抗原（,Pre-S1,）：,（二）、预后及疗效的判断,急性乙型肝炎患者前,S1,抗原阴转越早，预后越好，是病毒清除的最早迹象，反之，前,S1,抗原持续阳性，将发展至慢性肝炎。,因病毒基因变异的,HBeAb,（,+,）慢性乙型肝炎病人，较易进展为肝硬化，甚至肝癌。加强检测前,S1,抗原，是一种检测疾病预后的良好手段。,前,S1,抗原可作为药物抗病毒疗效的指标，是对,HBV-DNA,和,HBeAg,指标的补充和加强。,前,S1,抗原出现在急性乙型肝炎感染的最早期，在转氨酶升高前即可查出，提示可作为早期诊断乙肝病毒感染。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝前,S2,抗原（,Pre-S2,）：,前,S2,蛋白位于,S,区的中分子蛋白上。,是反映乙肝病毒感染与,HBV,病毒复制的指标。,可在,HBeAg,阳性，,HBV DNA,阳性的急性乙肝患者早期血清中溅出。,在对慢性乙肝患者动态观察中发现，病情急性发作期,ALT,升高前就有不同程度的前,S2,升高，其峰值常与,HBV DNA,平行而早于,ALT,峰,11,周。提示,S2,抗原可作为早期感染乙肝的指标，更早于两对半及,ALT,的检测。,与病毒对肝细胞附着及入侵有关；可诱发产生前,S2,抗体，从而起到清除,HBV,的作用。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝系列检测常见结果模式的临床意义,HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb,临床意义,+,-,+,-,+,“大三阳”急性或慢性乙型肝炎，高传染性,+,-,-,+,+,“小三阳”急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝，弱传染性,+,-,-,-,+,急性、慢性乙型肝炎或慢性,HBsAg,携带者,-,+,-,-,-,接种,HBV,疫苗或,HBV,感染后康复,-,+,-,-,+,急性,HBV,感染康复期或有既往感染史，有免疫力,-,+,-,+,+,急性乙肝康复期，开始产生免疫力,-,-,-,+,+,乙肝恢复期，弱传染性,-,-,-,-,+,急性,HBV,感染“窗口期”，或既往曾过乙肝,-,-,-,-,-,无,HBV,感染,九种常见检测结果组合临床意义,乙肝系列检测常见结果模式的临床意义,HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb,临床意义,+,+,+,-,+,HBsAg,亚型病毒的双重感染,+,+,-,-,+,HBsAg,亚型病毒的双重感染,+,-,+,+,+,乙肝趋向恢复,几种罕见模式的结果分析,在此种少见模式下最好结合,HBV DNA,指标综合分析结果,HBV DNA,定量检测的意义：,HBV,分子生物学诊断,HBV DNA,是,HBV,的遗传物质，当,HBV,侵入肝细胞后，会以,HBV DNA,为模板，合成新的,HBV,颗粒并释放入血，故,HBV-DNA,是病毒复制的一个重要指标。因此，,HBV DNA,定量检测可反映病毒在体内的复制水平。,1.HBV DNA,检测结果与血清标志物的综合评价,与,HBsAg,检测结果的关系,:,一般来说,HBsAg,阳性，,HBV DNA,测定常常阳性。在实践中可能遇到的问题是,HBsAg,测定结果阴性，而,HBV DNA,测定阳性,其原因可能是因为,:,HBsAg ELISA,测定敏感性低，对极低浓度的,HBsAg,测不出，而,PCR,具极高的灵敏度，,HBV DNA,含量即使很低亦可检测出来；,或在,HBV,感染早期，此时所有乙肝的免疫标志物尚未产生。,HBV,分子生物学诊断,与抗,-HBs,的关系,:,HBV,感染恢复期，抗,-HBs,阳性，血清,HBV DNA,检测一般为阴性，但少部分亦可为阳性，特别是肝组织,HBV DNA,测定阳性率仍很高，说明,HBV,还没有从肝脏中完全清除掉。只有,HBV DNA,测定阴性才是病毒消除的明确指标。,与,HBeAg,，抗,-HBe,和抗,-HBc,的关系,:,HBeAg,阳性，,HBV DNA,检测几乎全为阳性；,HBeAg,阴性而抗,-HBe,和抗,-HBc,阳性者，仅表明病毒复制减弱，但并未完全消失，血清,HBV DNA,的阳性率仍可高达,60%80%,。,因此,HBV DNA,检测是评价,HBV,传染性的最可靠方法。,HBV,分子生物学诊断,2.,抗病毒药物治疗乙肝的疗效评价,使用定量,PCR,测定乙肝患者血中,HBV DNA,的含量在治疗前后的变化，可以判断相应药物的疗效，从而确定有效的治疗方案。,3.,筛查献血员，防止乙肝病毒输血后感染。,HBV,分子生物学诊断,肝组织病理学检查是“金标准”：,明确诊断,衡量肝脏炎症活动度,衡量纤维化程度,决定治疗方案，预测药物疗效,对肝病而言,肝组织学检查是比血清,ALT,更灵敏而精确的指标,肝组织病理学检查的意义,一、接种乙肝疫苗：,是预防,HBV,感染的最有效方法。,哪些人需要接种乙肝疫苗？,新生儿,：出生后,24,小时内接种，越早越好；,成年人,：凡没有感染过乙肝病毒，自身抗体不足者都应该注射乙肝疫苗，打疫苗前先需先进行化验，化验结果显示表面抗原、表面抗体和核心抗体均为阴性，转氨酶（,ALT,）正常才可以接种乙肝疫苗；,乙肝患者及乙肝病毒携带者因已经感染了乙肝病毒，不能接种乙肝疫苗。,乙肝的预防,乙肝疫苗接种程序：,全程接种共,3,针，按照,0,、,1,、,6,个月程序。接种第,1,针疫苗后，间隔,1,及,6,个月注射第,2,及第,3,针疫苗。,乙肝的预防,接种乙肝疫苗后注意事项：,通常认为表面抗体滴度,10mIU/ml,才能起有效的预防作用。,只能预防,HBV,，对其他类型的肝炎病毒没有预防作用。,注射乙肝疫苗后产生的保护性抗体不是永久性的，应在医生的指导下再加强注射。,因个体差异，每个人在接种乙肝疫苗后产生的抗体水平有高有低，持续的时间也有长有短。,乙肝的预防,二、传播途径预防,管理传染源：,加强对,HBV,携带者的管理，禁止献血，不宜从事托幼工作，,注意个人卫生，避免血及分泌物污染公用物品，不共用理发刀具、牙刷等日常生活用具。,切断传播途径：,阻断母婴传播,加强环境卫生和公共场所卫生,避免日常生活接触传播,防止性接触传播,输血管理：加强对输血员的筛查，大力提倡义务献血，严格掌握输血和血制品的指征。,防止经微量血传播的医源性感染,医院管理,三、意外暴露后,HBV,预防,在意外接触,HBV,感染者的血液和体液后，可按以下方法处理：,1,、立即检测,HBV DNV,、乙肝五项、肝功能（,ALT,、,AST,），并在,3,个月及,6,个月内复查；,2,、若抗体滴度,10mIU/mL,，可不进行特殊处理；如未接种疫苗或抗体滴度小于,10mIU/mL,者，应立即接种,HBIG200-400IU,，并同时在不同部位接种一针乙肝疫苗（,20g,），并于,1,和,6,个月后分别接种第,2,针和第,3,针乙肝疫苗。,乙肝的预防,慢性乙肝的治疗是当前一个世界性难题。,治疗慢性乙肝的关键是抗病毒治疗，但目前还没有能彻底杀灭,HBV,的特效药物。,总体治疗目标：,1,、最大限度地长期抑制或消除乙肝病毒（,HBV,）,2,、减轻症状,3,、减轻肝细胞炎症，坏死，改善肝功能,4,、预防进展为肝硬化和肝细胞癌及其他并发症,5,、改善患者生活质量，延长存活时间。,慢乙肝的治疗：主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎和抗氧化、抗纤维化和对症治疗，关键是抗病毒治疗，只要有适应症，且条件允许，就应进行规范的抗病毒治疗。,慢性乙肝目前的治疗现状,一、空腹检查：进食后一些物质经过消化道吸收入血，使血液成分发生变化，而导致肝功能检查出现误差。,二、禁食某些食物：做肝功能检查前一天，最好不要食用含有丰富的胡萝卜素、叶黄素的食物，避免影响胆红素的测定；避免高脂饮食，比如牛奶、蛋制品；禁止饮酒。,三、尽量不服药物尤其避免服用有损坏肝脏的药物，不吃保健营养品，如果身体条件允许，最好在做肝功能检查前,3-5,天停药，因药物在肝脏代谢，会加重肝脏负担，影响肝功能检查的准确性；药物本身也可能影响实验。因病情不能停药应在检查时向医生讲明。,四、肝功检查前，应注意休息，保证睡眠，不做剧烈运动，不要熬夜。,乙肝检查前注意事项,谢谢！,</p>