保护碱基列表.doc

PCR设计引物时酶切位点的保护

酶
寡核苷酸序列
切割率%
2 hr
20 hr
Acc I
GGTCGACCCGGTCGACCGCCGGTCGACCGG
000
000
Afl III
CACATGTGCCACATGTGGCCCACATGTGGG
0>90>90
0>90>90
Asc I
GGCGCGCCAGGCGCGCCTTTGGCGCGCCAA
>90>90>90
>90>90>90
Ava I
CCCCGGGGCCCCCGGGGGTCCCCCGGGGGA
50>90>90
>90>90>90
BamH I
CGGATCCGCGGGATCCCGCGCGGATCCGCG
10>90>90
25>90>90
Bgl II
CAGATCTGGAAGATCTTCGGAAGATCTTCC
07525
0>90>90
BssH II
GGCGCGCCAGGCGCGCCTTTGGCGCGCCAA
0050
00>90
BstE II
GGGT(A/T)ACCC
0
10
BstX I
AACTGCAGAACCAATGCATTGGAAAACTGCAGCCAATGCATTGGAACTGCAGAACCAATGCATTGGATGCAT
02525
050>90
Cla I
CATCGATGGATCGATCCCATCGATGGCCCATCGATGGG
00>9050
00>9050
EcoR I
GGAATTCCCGGAATTCCGCCGGAATTCCGG
>90>90>90
>90>90>90
Hae III
GGGGCCCCAGCGGCCGCTTTGCGGCCGCAA
>90>90>90
>90>90>90
Hind III
CAAGCTTGCCAAGCTTGGCCCAAGCTTGGG
0010
0075
Kpn I
GGGTACCCGGGGTACCCCCGGGGTACCCCG
0>90>90
0>90>90
Mlu I
GACGCGTCCGACGCGTCG
025
050
Nco I
CCCATGGGCATGCCATGGCATG
050
075
Nde I
CCATATGGCCCATATGGGCGCCATATGGCGGGGTTTCATATGAAACCCGGAATTCCATATGGAATTCCGGGAATTCCATATGGAATTCCC
00007575
0000>90>90
Nhe I
GGCTAGCCCGGCTAGCCGCTAGCTAGCTAG
01010
02550
Not I
TTGCGGCCGCAAATTTGCGGCCGCTTTAAAATATGCGGCCGCTATAAAATAAGAATGCGGCCGCTAAACTATAAGGAAAAAAGCGGCCGCAAAAGGAAAA
010102525
0101090>90
Nsi I
TGCATGCATGCACCAATGCATTGGTTCTGCAGTT
10>90
>90>90
Pac I
TTAATTAAGTTAATTAACCCTTAATTAAGG
000
025>90
Pme I
GTTTAAACGGTTTAAACCGGGTTTAAACCCAGCTTTGTTTAAACGGCGCGCCGG
00075
02550>90
Pst I
GCTGCAGCTGCACTGCAGTGCAAACTGCAGAACCAATGCATTGGAAAACTGCAGCCAATGCATTGGAACTGCAGAACCAATGCATTGGATGCAT
010>90>900
010>90>900
Pvu I
CCGATCGGATCGATCGATTCGCGATCGCGA
0100
02510
Sac I
CGAGCTCG
10
10
Sac II
GCCGCGGCTCCCCGCGGGGA
050
0>90
Sal I
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01010
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1075
2575
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0010>90
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Spe I
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101000
>90>905050
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0010
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Stu I
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>90>90>90
>90>90>90
Xba I
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0>90>90>90
Xho I
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01010
02575
Xma I
CCCCGGGGCCCCCGGGGGCCCCCCGGGGGGTCCCCCCGGGGGGA
02550>90
075>90>90

注释：
1．如果要加在序列的5‘端，就在酶切位点识别碱基序列（红色）的5’端加上相应的碱基（黑色），相同如果要在3‘端加保护碱基，就在酶切位点识别碱基序列（红色）的3’端加上相应的碱基（黑色）。
2．切割率：正确识别并酶切的效率
3。加保护碱基时最好选用切割率高时加的相应碱基。
1. 前台功能方案2
1.1主页面2
1.2 商品搜索2
1.3 商品列表2
1.4 虚拟分类3
1.5 商品展示3
16 会员中心3
1.7 购物车4
1.8 促销专题5
1.9 帮助中心5
2 后端管理5
2.1 商品5
2.2 订单8
2.3 会员9
2.4 营销推广10
2.5 模版设计11
2.6 系统工具11
2.7 商店配置11
2.8 网站内容管理12
2.9 统计报表12
2.10 系统工具13

1. 前台功能方案
1.1主页面
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1.9 帮助中心
购物流程图
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1.11 会员注册登陆
弹会员注册或登陆
1.12 评论/咨询/留言
更简化的评论咨询页面
1.13 友情链接
支持图文链接
2 后端管理
2.1 商品
商品管理
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2.2 订单
订单管理
添加 订单
订单状态操作管理
订单支付
订单发货
订单退款
订单退货
订单作废
订单标签
订单筛选
订单导出
订单打印
配货单打印
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收款单管理
退款单管理
发货单管理
退货单管理
售后服务管理
快递单管理
快递单模板添加
快递单模板编辑
快递单模板下载
快递单模板导出
发货信息管理
2.3 会员
会员管理
会员等级管理
群发邮件
群发消息
群发短信
批量编辑
批量修改会员等级
批量修改积分
会员筛选
会员导出
会员注册项管理
统计报表
预存款
充值/冻结
冻结列表
预存款交易报表
购买咨询管理
商品评论管理
商店留言管理
站内消息管理
2.4 营销推广
批发方案
混批方案管理
批发方案管理
SEO 设置管理
SiteMaps 管理
站外推广链接
2.5 模版设计
网站内容管理
站点栏目管理
文章管理
友情链接
网页底部信息管理
模板管理
模板编辑
模板下载
图片管理
样式管理
模板在线预览
2.6 系统工具
2.7 商店配置
全站设置
基本设置
购物显示设置
商品图片设置
支付管理
支付方式添加编辑管理
配送管理
配送方式添加编辑管理
配送费用管理
配送地区管理
权限分配管理
角色权限分配管理
货币管理
第三方整合
地区管理
2.8 网站内容管理
2.9 统计报表
访问统计
预付款统计
销售统计
销售额总览
销售量排名
会员购物量排名
商品访问购买次数
销售指标分析
2.10 系统工具
数据管理
数据备份
数据恢复
数据库校验
体验数据清除
网店暂停营业
页面显示管理
2.11 第三方应用
扩展插件
1 采购单中心
1、1 供应商管理
供应商列表
更新列表
同步更新
采购价同步
最后同步时间
代销商品列表
我的采购单
商品数据下载
1、2 采购单列表
     刷新
     导出
     筛选
1、3 同步更新配置
添加配置
添加规则
选择供应商
针对产品线
1、4 配置列表
添加配置
刷新
删除
回收站
增加：
供应商内部进销存
项目招投标
项目及产品的智能匹配
支付可以整体支付给平台，也可以通过参数设置支付到每个供应商；项目招投标暂时不需要网上支付
增加中介管理：中介可以发布招标信息和求购信息
原则上：游客浏览网站，先注册会员，会员可以购买产品和投标项目，可以发布求购信息，但是不能上架产品及发布招标信息，通过平台认证后，方可；通过开店认证，该会员具有发布新产品、发布招标信息；会员也可以通过认证成为中介；
B2B（Business To Business），是指一个市场的领域的一种，是企业对企业之间的营销关系。电子商务是现代B2B marketing的一种具体主要的表现形式。它将企业内部网，通过B2B网站与客户紧密结合起来，通过网络的快速反应，为客户提供更好的服务，从而促进企业的业务发展。

B2B业务流程图

B2B后台协作关系图

不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求
PCR设计引物时酶切位点的保护碱基表1
酶
寡核苷酸序列
切割率%
2 hr
20 hr
Acc I
GGTCGACCCGGTCGACCGCCGGTCGACCGG
000
000
Afl III
CACATGTGCCACATGTGGCCCACATGTGGG
0>90>90
0>90>90
Asc I
GGCGCGCCAGGCGCGCCTTTGGCGCGCCAA
>90>90>90
>90>90>90
Ava I
CCCCGGGGCCCCCGGGGGTCCCCCGGGGGA
50>90>90
>90>90>90
BamH I
CGGATCCGCGGGATCCCGCGCGGATCCGCG
10>90>90
25>90>90
Bgl II
CAGATCTGGAAGATCTTCGGAAGATCTTCC
07525
0>90>90
BssH II
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0050
00>90
BstE II
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0
10
BstX I
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050>90
Cla I
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00>9050
00>9050
EcoR I
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>90>90>90
>90>90>90
Hae III
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>90>90>90
>90>90>90
Hind III
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0010
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Kpn I
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0>90>90
Mlu I
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050
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050
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Nhe I
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01010
02550
PCR设计引物时酶切位点的保护碱基表2
酶
寡核苷酸序列
切割率%
2 hr
20 hr
Not I
TTGCGGCCGCAAATTTGCGGCCGCTTTAAAATATGCGGCCGCTATAAAATAAGAATGCGGCCGCTAAACTATAAGGAAAAAAGCGGCCGCAAAAGGAAAA
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Xma I
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