细胞分化PPT课件.ppt

细胞分化,(cell differentiation),我是怎么来的？,受精卵,内容,细胞分化的概念及规律,细胞分化与细胞决定,细胞分化的潜能,基因与细胞分化,影响细胞分化的因素,细胞分化与癌细胞,细胞生长,细胞增殖,细胞分化,细胞衰老,细胞死亡,细胞类型形成,组织器官形成,个体发育,基因表达调控,细胞的重大生命活动：,一、细胞分化的概念,细胞分化,（,cell differentiation）,指同一来源的细胞通过分裂逐渐产生,形态结构,、,生理功能和蛋白质合成,等方面具有稳定差异的过程。,第一节 细胞分化概念及规律,1.细胞形态结构的差异,如神经细胞伸出长长的突起，肌细胞呈柱状或梭形。,2.生理功能差异,如神经细胞伸出长长的突起，主要是为了传导神经冲动，储存信息，肌细胞呈柱状或梭形，具有收缩，运动的功能。,3.,新的特异性的蛋白质的合成,如皮肤表皮细胞中的角蛋白，肌细胞中出现肌球蛋白和肌动蛋白等。,细胞分化的标志,不同类型细胞形态各异（扫描电镜图）,神经细胞,上皮细胞,红细胞,肌肉细胞,二、细胞分化的规律,稳定性是细胞分化的一个显著特点，在高等生物中分化一旦确立，则其分化状态十分稳定且能通过许多细胞世代。,例:黑色素细胞在体外培养30多代后仍能合成黑色素；,离体培养的上皮细胞，始终保持为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。,注意分化与激素引起变化的区别,（一）稳定性,（二）可逆性（能去分化和转分化）,去分化,:,分化细胞失去原有的分化结构和功能成为具有未分化细胞特性的过程。随后可导致细胞再分化成另一种细胞。,转分化,:,已分化细胞经去分化后再分化成另一种细胞的变化过程。表皮细胞在过量维生素,A,的作用下可以转分化为粘液细胞；眼视网膜色素上皮细胞可以转分化为神经上皮细胞。,在一定条件下，细胞分化是可逆的。植物细胞的去分化,低等动物的再生现象（转分化）。,植物细胞的去分化,在培养基中,离体,培养,胚状体发育,转接,试管苗,移栽成活,成熟胡萝卜植株,切取,叶组织薄片,(三),细胞分化基因调节的,保守性,不同动物,同源蛋白,，特别是其中的基因调节蛋白，在结构、功能以及生化反应上具有一定的相似性，如将编码控制小鼠脑发育的基因调节蛋白,Engrailed,1,基因敲除，引起发育的小鼠缺乏小脑；若以果蝇的同源蛋白代替小鼠的,Engrailed,1,蛋白，小鼠的小脑同样能够正常的发育。,(四),细胞分化的,时空性,1.时间上的分化,指一个细胞在不同的发育阶段可以有不同的形态和功能。,造血干细胞,前体细胞,祖细胞,功能,血细胞,2.空间上的分化,指同一细胞的后代由于所处空间位置的不同，结果表现出的形态和功能的差异。,生物体（多个、多种细胞）,受精卵（单细胞）,细胞增殖,细胞分化,细胞数量增加,形成不同类型的细胞,三、细胞分化的意义,第二节 细胞决定与细胞分化,脊椎动物细胞分化示意图,在细胞出现可识别的形态和功能差异以前，细胞已经具备按特定的方向分化，最终形成一定表型细胞的能力，这种细胞的发育选择叫做,细胞决定,（,cell determination,）。,细胞决定是细胞潜能逐渐受限的过程，也是有关分化的基因选择性表达前的过渡阶段，具有高度的遗传稳定性。,问题：,细胞决定与细胞分化在胚胎发育过程中哪一个先发生？,一、细胞决定概念,（一）细胞决定先于分化进行，具有遗传稳定性,原肠期的三胚层形成时，形成各器官的预定区已经确定，只能按一定的规律发育分化成特定的组织、器官和系统。,二、细胞决定的特点,细胞决定表现出遗传稳定性。典型的例子是果蝇成虫盘细胞的移植实验。,果蝇成虫盘细胞决定状态的移植实验,在果蝇研究中发现，有时某种培养的成虫盘细胞会出现不按已决定的分化类型发育，而是生长出不是相应的成体结构，发生了,转决定,（,transdetermination,）。,（二）细胞决定具有可逆性,细胞决定的可逆性导致细胞去分化，,已决定分化方向的细胞如果改变其微环境，它的分化方向会改变。,细胞转决定导致细胞转分化：,在某种条件下，已决定分化方向的细胞会改变预定的发展方向而发生转决定，生长出另外的成体结构。,必须指出的是，无论是动物还是植物，细胞分化的稳定性是普遍存在的，而分化的可逆性，即发生细胞的转分化或去分化是有条件的。,（一）,卵细胞的极性与早期胚胎细胞的不对称分裂；,细胞的不对称分裂是指存在于核酸蛋白颗粒中的转录因子,mRNA,在细胞质中的分布是不均等的，当细胞分裂时，这些决定因素被不均匀地分配到两个子细胞中，结果造成两个子细胞命运的差异。,（,二）发育早期胚胎细胞间的相互作用。,三、细胞决定的机制,全能细胞：,在一定条件下能够分化发育成为完整个体的细胞，称为,全能细胞,。两栖类动物在囊胚形成之前的卵裂球细胞、哺乳动物桑椹胚,8,细胞期之前的细胞均属于全能细胞。,第三节 细胞的分化潜能,终末分化细胞的细胞核具有全能性！,爪蟾细胞核移植实验：,克隆羊多莉（,Dolly,）,多能细胞：,在三胚层形成后，由于细胞所处的空间位置和微环境的差异，细胞的分化潜能受到限制，各胚层细胞只能向本胚层组织和器官的方向分化发育，成为,多能细胞,。,单能细胞：,经过器官发生，各种组织细胞仅具有分化形成某一种类型细胞的能力，称为,单能细胞,，或称为,定向细胞,。,终末分化细胞：,由单能细胞最终分化形成的执行特定功能的特化细胞类型，称为,终末分化细胞,。,细胞分化的一般规律：在胚胎发育过程中，细胞逐渐由,“,全能,”,到,“,多能,”,，最后向,“,单能,”,的趋向。,第四节 基因与细胞分化,一、细胞分化与基因表达,细胞分化过程中一般并不伴有基因组的改变。,多细胞生物个体发育与细胞分化过程中，,其基因组,DNA,并不全部表达，而呈现选择性表达，它们按照一定的时,-,空顺序,，在不同细胞和同一细胞的不同发育阶段发生差异表达（,differential expression,）。,细胞分化的本质：,基因的选择性表达，一些基因处于活化状态，同时另一些基因被抑制而不活化。,从分子水平看，细胞内与分化有关的基因按其功能分为,2,类：,管家基因,(,housekeeping,gene),：,编码管家蛋白,(housekeeping protein),，存在于所有分化类型细胞中，维持细胞生存所必需的基本蛋白，如细胞骨架蛋白、膜蛋白、染色质的组蛋白、核糖体蛋白。,奢侈基因,（,luxury gene,）：编码组织细胞特异性蛋白的基因。编码奢侈蛋白，仅存在于特定的分化细胞中，赋予分化细胞不同特征的特异性蛋白。如红细胞中的血红蛋白、皮肤表皮细胞中的角蛋白、肌细胞中的肌动蛋白和肌球蛋白。,1.,基因的选择性表达是细胞分化的普遍规律,2.,基因组改变是细胞分化的特例,基因组扩增：,见于果蝇的腺细胞和卵巢滤泡细胞，染色体多次复制，形成多倍体（,polyploid,）和多线体（,polyteny,）。,基因组丢失：,在马蛔虫发育过程中，只有生殖细胞得到了完整染色体，而体细胞中的染色体只是部分染色体片段。哺乳动物（除骆驼外）的红细胞以及皮肤、羽毛和毛发的角化细胞则丢失了完整的核。,基因重排：,在,B,淋巴细胞分化过程中，,DNA,通过体细胞重组（,somatic recombination,）,使,DNA,序列中不同部位的部分基因片段连接在一起，组成产生抗体,mRNA,的,DNA,序列。,个体发育过程中血红蛋白的表达特点：,脊椎动物的血红蛋白由,2,条,-,珠蛋白链和,2,条,-,珠蛋白链组成，其在个体发育不同时期表达不一样。,人珠蛋白基因结构,3,、细胞分化的基因表达调控主要发生在转录水平,在甲基转移酶催化下，,DNA,分子中的,胞嘧啶可转变成,5-,甲基胞嘧啶,，这称为,DNA,甲基化,。,分布：,常见于富含,CG,二核苷酸的,CpG,岛，主要集中于异染色质区，其余则散在于基因组中。,含量：,哺乳动物基因组中约,70%,80%,的,CpG,位点是甲基化的。,作用：,DNA,的甲基化位点阻碍转录因子结合，甲基化程度越高，,DNA,转录活性越低。,4,、,DNA,甲基化在转录水平上调控细胞分化的基因表达,人类胚胎红细胞中珠蛋白基因的甲基化,二、小,RNA,在细胞分化中的作用,小,RNA,是长度约在,20,30,个核苷酸的非编码,RNA,。,微小,RNA(microRNA,miRNA):,前体为,70,90nt,，由具有核糖核酸酶性质的,Drosha,和,Dicer,酶加工而成。,小干扰,RNA(small interfering RNA,siRNA,）,：来源于外源性的长双链,RNA,，是,Dicer,酶解产物。,小,RNA,是在研究秀丽线虫（,C.elegan,）细胞命运的时间控制过程中被发现的；广泛地存在于哺乳动物，具有高度的保守性，通过与靶基因,mRNA,互补结合而抑制蛋白质合成或促使靶基因,mRNA,降解。,研究表明，它们参与了细胞分化与发育的基因表达调控。,第五节 细胞分化的影响因素,影响细胞分化的因素很多，概括起来细胞分化的命运取决于两个方面：细胞的内部因素和细胞的外部因素。,在细胞分化过程中，细胞核起着重要的作用,。分化细胞之所以能合成特异的蛋白质，就是由于细胞核内的基因组有选择地表达，这是细胞分化的基础。实验表明，在完全没有核的情况下，卵裂不会发生，也看不到细胞明显分化，并且在早期死亡。,许多实验证明，在细胞分化过程中，细胞核的遗传潜力是受核所在的细胞质环境调节的。但是，什么样的细胞质分子对核基因起调控作用？机理如何？迄今尚未完全解决。,一、细胞内因素,二、细胞外因素,(,一,),环境因素,环境中各种因子对机体的发育有较大的影响，如温度、光线等。由环境因素的影响可能造成第一次不等分裂，从而决定了细胞的分化。,(,二,),细胞间相互作用,多细胞生物的细胞分化是在细胞间的彼此影响下进行的。因此，细胞间的相互作用对细胞分化有较大的影响。,细胞的诱导,(induction),是指一部分细胞对邻近细胞的形态发生影响，并决定其分化方向的作用。诱导现象在动物的胚胎发育过程中是普遍存在的。,1.,诱导,眼球发育过程中的多级诱导作用,A,初级诱导,B,次级诱导,C,三级诱导,2.,细胞抑制,在胚胎发育中，已分化的细胞抑制邻近细胞进行相同分化而产生的负反馈调节作用称为,细胞抑制（,inhibition,）。,分化完成的细胞可以产生,抑素（,chalone），,抑素可抑制附近的细胞进行同样的分化。,如将发育中的蛙胚置于含成体蛙心脏组织的培养液中，蛙胚的分化进程会受到阻碍而不能完成。同样，用成体蛙脑的碎片培养蛙胚，也不能产生正常的脑。,细胞抑制和分化诱导共同协调作用，维持正常细胞的分化和胚胎的发育过程。,细胞之间有相互辨别的能力，即相互识别。有人将蝾螈的原肠胚置于无,Ca,2+,、,Mg,2+,的溶液中，使胚胎的外、中、内三个胚层的细胞各自分散开，然后再把它们混合在一起培养，结果各胚层的细胞均具有自我挑选、相互粘着的能力，依然形成外胚层在外，内胚层在内，中胚层位于二者之间的胚胎。这说明同类细胞具有相互识别的能力。,3.,细胞识别与粘合,随着多细胞生物发育的复杂化和体积的增大，机体对个体发育和细胞分化的控制，必须要在相隔距离较远的情况下起作用，而且要对位于远处的靶细胞所出现的变化作出反应。在这种情况下，激素起着十分重要的作用。,在脊椎动物中存在两大类激素：,脂溶性的小分子甾类激素,(,如蜕皮素、性激素等,),和,蛋白质类的多肽激素,(,如胰岛素、干扰素、抑素等,),。,三、激素,第六节 细胞分化与癌细胞,一、肿瘤细胞特点,细胞分化失控或者分化异常可能导致细胞恶性变，成为癌（,cancer）,细胞。,细胞癌变是细胞去分化的结果，,因此，癌细胞和胚胎细胞具有许多相似的生物学特性。,癌细胞,除了具有其来源细胞的部分特性外，,主要表现出低分化和高增殖细胞的特征。,细胞生长与分裂失去控制,具有浸润性和扩散性,细胞间相互作用改变,蛋白表达谱系或蛋白活性改变,m,转录谱系改变。,接触抑制现象消失,二、癌基因与细胞恶变,原癌基因（细胞癌基因）,是正常人体和动物细胞内以及致癌病毒体内所固有的能引起细胞恶性转化的核苷酸片段。细胞癌基因是细胞正常生长、分化所必需的，是动物在生长发育过程中所不可缺少的基因之一。,癌基因,是由原癌基因突变而来,能引起细胞恶性转化的基因。,原癌基因在个体发育和细胞分化一定阶段十分重要，编码关键性调控蛋白质，但在成体中表达受到严格控制。,原癌基因在一定时间，一定组织中定量地表达，产生生命活动中所必需的蛋白质，促进某些生命过程的进行，使生长发育得以实现。,原癌基因一旦发生数量或结构上的轻微变化，就可以使人或者动物的细胞发生癌变。,三、抑癌基因与致癌性的阻遏,抑癌基因,又称为肿瘤抑制基因（,tumor suppressor gene,TSG,）或抗癌基因（,anti-oncogenes），,又称,隐性癌基因,。,功能是抑制细胞的生长和促进细胞的分化。,正常细胞的增殖和分化，是受原癌基因和,TSG,的协同调节控制的，而,恶性肿瘤的发生则可能是原癌基因数目增多,，,活性超常或者,TSG,缺失、失活所致。,视网膜母细胞瘤,由于视网膜母细胞在分化的中间阶段受阻形成，,RB,基因很可能负责细胞终未分化的基因。,视网膜母细胞瘤基因定位于13,q14，,全长约200,kb，,有27个外显子，编码一种,核磷酸蛋白(,Rb,蛋白,，去磷酸化后可抑制,G,1,期转录进行)，具有抑制肿瘤细胞增殖生长的作用。,Rb,基因的缺失或功能丧失除见于视网膜母细胞瘤外，还见于骨肉瘤、小细胞肺癌、乳腺癌等肿瘤中。,1.视网膜母细胞瘤基因（,RB）,临床表现,幼年发病,(约85的病例为15岁儿童)。肿瘤长入玻璃体内，致,瞳孔内出现黄白色光反射（,“,猫眼,”,）,。,视力消失，,进一步发展可引起青光眼。,眼底镜下可见玻璃体内有,白色瘤块和大量白色浑浊点。,有的肿物上有许多新鲜血管。,肿瘤可沿视神经蔓延至大脑或随血液转移而致死。治疗以眼球摘除为主。,2.肿瘤蛋白,Tp53,基因（,Tp53）,基因定位于17,p13.1，,长约20,kb，,含11个外显子。其产物为,p53,蛋白质。,Tp53,是涉及人类恶性肿瘤形成中最多的一个基因。正常的,Tp53,基因表达，可抑制其它癌基因对培养细胞的转化。,Tp53,基因编码一种磷酸蛋白，是一种转录活化因子。在,DNA,受到损伤时，可激活,MTS,2,、RB,等基因，以竞争抑制细胞周期蛋白,E,与细胞周期依赖性激酶2（,CDK,2,）,的结合和抑制细胞内转录因子,E,2,F,的活性，使细胞停止于,G,1,期，从而阻止细胞恶性增殖。,Tp53,基因的,突变或缺失,在如肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、脑瘤、骨肉瘤、横线肌肉瘤等均是主要致病原因。,3.多肿瘤抑制基因（,MTS,1,）,又称细胞周期依赖性激酶4抑制因子(,CDK4I)。,定位9,q21,含3外显子，产物是,p16,蛋白。约75的癌细胞株有,p16,蛋白缺失和改变。超过了,p53,蛋白的基因突变率50。,p16,蛋白可以与细胞周期蛋白,D,竞争性结合从而抑制细胞周期依赖性激酶4（,CDK,4,）,的活性使细胞不能由,G,1,期越过,R,点进入,S,期，从而,阻止细胞增殖。,p16,可激活,RB,基因，从而抑制细胞转录因子,E,2,F,的活性，也阻止细胞的增殖。,在食管癌、恶性间皮瘤、胶质瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肾癌、乳腺癌、卵巢癌、骨癌、白血病、非小细胞肺癌中均有,p16,的纯合性缺失，在恶性黑素瘤、胰腺癌、食管癌中，均可检出,p16,的突变。,肿瘤细胞增殖旺盛，分化不良，肿瘤的恶性程度越大，分化越差。,事实证明，畸胎瘤细胞移植到适宜环境可被诱导正常分化，有些,肿瘤细胞可被药物诱导分化,，有的肿瘤自然消退不治而自愈。,癌细胞是否可以逆转为正常细胞是医学特别关注的一个问题，给肿瘤治疗提供了新的思路。,四、肿瘤细胞的诱导分化,维甲酸,（,retinoic acid）,和小剂量砒霜已经被应用于治疗早幼粒细胞性白血病，发现可以,诱导分化受阻的,幼稚粒细胞,分化成熟，使白血病得到临床完全缓解，,其效果明显优于放疗和化疗，同时也避免了放疗和化疗杀伤正常分裂细胞的副作用。,小鼠畸胎瘤体外经维甲酸处理后再移植至体内可成为良性肿瘤。,小结,细胞分化,细胞分化的概念,细胞分化的一般规律,稳定性,可逆性,保守性,时空性,细胞决定,细胞决定的特性,细胞决定的机制,细胞分化潜能,全能性,多能性,单能性,终末分化细胞,细胞分化的分子基础,基因的差异性表达,细胞分化的影响因素,内因,外因,细胞分化与癌细胞,思考题,1.,细胞转分化、去分化的条件和生物医学意义。,2.,细胞决定的概念、机制及其与细胞分化的关系。,3.,为什么说细胞分化的本质是基因组中不同基因的选择性表达。,4.,非编码,RNA,的种类及其在细胞分化中的作用。,5.,细胞分化的影响因素及其机制。,6.,如何从细胞分化角度理解肿瘤的发生。,Cell,Nature,Science,Cell Biology,Cell Research,主要期刊杂志,生物学网站,生物通,www.ncbi.nlm.nih.gov/,Thank you!,