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常规八大项指标：粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、水份、灰份、钙、磷、水溶性氯化物；
实验仪器

一． 称量仪器
1. 物理天平
2. 分析天平
二． 加热仪器
1. 电炉和电热板（500W.800W.1000W.1200W）
2. 高温电炉（带温度控制器）
3. 烘箱
4. 水浴锅
5. 酒精灯和酒精喷灯
三． 玻璃仪器
1. 烧杯类
1） 烧杯（体积10ml—5000ml）
2） 锥形瓶
3） 具塞锥形瓶和碘量瓶
4） 烧瓶
2.量具类
1） 滴定管：酸式滴定管和碱式滴定管
2） 量筒和量杯（5.10.25.50.250.1000.2000ml）
3） 容量瓶（10.20.25.50.100.250.1000.2000ml）
4） 移液管（2.5.10.15.25.50ml）
2. 试剂瓶类
1） 广口瓶和小口瓶
2） 滴瓶
3. 试管类
1） 普通试管（10mm×75mm—41mm×225mm）
2） 离心管（5.10.15.25.50ml）
3） 比色管
4. 其他玻璃仪器和陶瓷器皿
1） 表面皿
2） 干燥器
3） 称量瓶
4） 漏斗
5） 坩埚
四． 部分小型精密仪器
1. 分光光度计
2. 酸度计
3. 离心机
4. 振荡机
5. 粉碎机
6. 定氮仪

说明：
（1）实验中所涉及的化学试剂没有特别要求，均为化学纯，水为蒸馏水或相应程度水。
（2）实验适用范围无特别说明均为配合饲料和单一饲料。
（3）实验过程中提到的干燥后冷却没有特别说明都在冷却器中冷却30min，恒重过程没有说明均为再烘干30min，再冷却30min，再称重，直至达到相应要求。
（4）实验中涉及滴定终点都是滴到预期颜色变化且30s不褪色为止。
（5）一般单一饲料或配合饲料（固体）样品制备常用方法为用四分法将原始样品缩至500g，风干粉碎过40目，再用四分法按实验用量取。
（6）对实验结果中提到的重复行要引起足够的重视，对于相对偏差超过要求的，决不能简单将实验结果取平均值，必须重新实验。
第一部分 饲料常规成分分析方法
实验一 饲料中干物质的测定
1.适用范围 配合饲料和单一饲料
2.原理
100-105℃下烘去饲料中蛋白质，淀粉及细胞膜上的吸附水，得到干物质含量。
3.试样的制备 用四分法将原始样品缩至500克，风干后粉碎至过40目，再用四分法缩至20克，装入密封器，放阴凉干燥处保存。
4.测定 洗净称样皿，在100-105℃烘箱中烘1小时，取出，再干燥器中冷却30分钟后称重，称准至0.0002克，再烘30分钟，同样冷却，称重，直至二次称重之差小于0.0005g为止，取最小量为称样皿重。用已恒重称样皿准确称取5g样品（准确至0.0002g），不盖称样皿盖，在100-105℃烘箱中烘3小时，取出，加盖，同样冷却称重，再同样烘1小时，冷却，称重，直至二次称重之差小于0.002g即为恒重。
5.结果计算
（1） 计算
m1- m2
m1- m0

水分（%）=

式中：m1——105℃烘干前试样及称样皿重（g）；
m2——105℃烘干后试样及称样皿重（g）；
m0——已痕重的称样皿重（g）。
（2） 重复性
（3） 每个试样取二个平行样测定，取平均值为测定结果，两个平行值不得超过0.2%，否则重做。
实验二 饲料中粗蛋白质的测定（定氮仪法）
1. 原理
浓碱下蒸馏
硼酸吸收

试样中含氮化合物　浓硫酸处理 氨气 浓硫酸吸收 硫酸铵

四硼酸铵 标准溶液滴定 含氮量
2. 试剂
（1） 硫酸（GB 625-77）：化学纯
（2） 硫酸铜（GB 665-78）：化学纯
（3） 硫酸钾（HG 3-920-76）或硫酸钠（HG 3-908-76）：化学纯
（4） 氢氧化钠（GB 628-78）：分析纯，40g溶于100ml水中配成40%水溶液
（5） 硼酸（GB 628-78）：分析纯，40g溶于100ml水中配成2%溶液
（6） 混合指示剂：甲基红（HG 3-958-76）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3-1200-79）0.5%乙醇容易，二溶液1：1混合
（7） 0.01mol/l盐酸标准溶液
（8） 硫酸铵（GB 1396-28）：分析纯
（9） 蔗糖（HG 3-1001-76）：分析纯
3. 实验步骤
（1） 样品消化
称0.3-0.5g样品于消化管中 加3-5g无水硫酸钠或硫酸钾 加10ml硫酸
在420℃消化炉上消化（约1h） 深蓝色澄清液体 冷却15min 加20ml蒸馏水，摇匀
（2） 蒸馏
1） 接收瓶准备：取25ml硼酸（4%）于锥形瓶，加4滴混合指示剂
4. 空白实验 每次分析时，应该做所用化学试剂及分析系统的空白实验以补偿他们对实验的影响。
5. 结果计算
（1）计算
（v2-v1）×c×0.0140×6.25
m

粗蛋白质（%）= ×100

式中：v2——试样滴定时用标准盐酸量
v1——空白滴定时用标准盐酸量
c——盐酸标准溶液的浓度
m——试样质量
0.0140——每ml1NHCL标准溶液相当于N 的克数
6.25——氮换算成蛋白质的平均系数
（3） 重复性
每个试样取二个平行样进行测定，取其平均值，二次滴定用标准液之差不超过0.1ml。
cp%＞25%时，允许相对偏差为1%；
10%≤cp%≤25时，允许相对偏差为2%；
cp%≤10%时，允许相对偏差为3%
实验三 饲料中粗脂肪的的测定
1.原理：在索氏提取器中用石油醚（HG3-1002-76 化学纯）提取试样，计算绝干试样的损失量。
2.测定 脱脂滤纸和称样皿干燥（105±2℃）恒重至相差0.0008g，滤纸用铅笔编号，称取2 克样品包入滤纸中，放入称样皿，105℃烘3h，冷却称重，再干燥30min，直至恒重。然后放入浸提器中，石油醚刚淹没滤纸包为好，50℃下水浴加热，提取约5小时，取出滤纸包，置于通风橱中20min，待石油醚挥发完，105℃烘箱烘1h，干燥器中冷却30min，称重，恒重至相差0.0001g。
3.结果计算
（1）计算
W3-w4
W2-w1

粗脂肪（%） = ×100

试中：w1——已恒重的滤纸加称样皿重
w2——已恒重的滤纸，称样皿加样品重
w3——已恒重的滤纸，称样皿加绝干样品重
w4——已恒重的滤纸，称样皿加浸提后的样品重
（2）重复性
每个试样取二个平行样进行测定，取其平均值；
粗脂肪含量在10%以上，允许相对偏差为3%；
粗脂肪含量在10%以下，允许相对偏差为5% 。
实验四 饲料中水溶性氯化物的测定
法一：快速法
1.原理 试样搅拌溶解氯化物 ，用铬酸钾作指示剂，用标准硝酸银溶液滴定。
2.试剂准备
（1） 铬酸钾指示剂：10%铬酸钾水溶液
（2） 氯化钠（GB 12530-77）：于500灼烧1h，干燥器中冷却保存，称5.8454g，溶解于水中，转入1000容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，为0.1N 氯化钠标准溶液；
（3） 0.1N硝酸银标准溶液：取硝酸银（分析纯）16.989g，溶于1000ml水中。贮存于棕色瓶中，即为0.1N硝酸银溶液。
标定：准确取氯化物标准溶液25ml，于250ml锥形瓶中，加入25ml水及0.5ml铬酸钾指示剂，用硝酸银标准溶液滴定，出现红棕色，且30秒不褪色为终点。

M×25
V×0.05845×1000
硝酸银标准溶液的当量浓度N = =M/V×0.4277

式中：M为氯化钠的重量；V为硝酸银标准溶液的体积；0.05845为与1ml硝酸银标准溶液（1N）相当的氯化钠克数。
3.测定
加100ml蒸馏水
搅拌15min，静置15min

蒸馏水50ml
铬酸钾指示剂1ml
5g左右样品取上层清液20ml+

硝酸银滴定 溶液呈砖红色
4．结果处理
V×N×100×58.45
M×20×1000

NaCl% = ×100

式中：V——硝酸银溶液的体积ml
N——硝酸银溶液的当量浓度
58.45——与1mol硝酸银相当的氯化钠的克数
M——试样重g
法二：国标法
1.原理
Cl- + AgNO3 Agcl
+
硫氰酸铵

AgCNS+NH4NO3
2.试剂准备
（1） 硝酸
（2） 硫酸铁（60g/L ）溶液：称取硫酸铁[Fe2(so4)3XH2O]60克，加水微热溶解后，加水至1000ml。
（3） 硫酸铁指示剂 250g/l的硫酸铁水溶液，过滤除去不溶物，与等体积的浓硝酸混合均匀。
（4） 氨溶液 1+19水溶液
（5） 硫氰酸铵(0.02mol/l)溶液：称取硫氰酸铵1.52g，溶于1000ml水中。
（6） 氯化钠标准贮备溶液 ：基准级氯化钠于500灼烧1h，干燥器中冷却保存，称5.8454g，溶解于水中，转入1000容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，为0.1N 氯化钠标准溶液
（7） 氯化钠标准工作溶液（0.02mol/l）：准确吸取氯化钠标准贮备溶液20ml与1000容量瓶中，定容。
（8） 硝酸银标准溶液 （0.02mol/l）：称取3.4g硝酸银溶于1000ml水中，贮于棕色瓶中。
1) 体积比 吸取硝酸银溶液20ml，加硝酸银4ml，指示剂2ml，在剧烈摇动下用硫
硝酸银溶液体积
硫氰酸铵体积

氰酸铵溶液滴定，滴至终点为淡红色。二溶液的体积比为
2) 标定

氯化钠标准溶液10ml
100ml容量瓶 硝酸4ml 震荡使沉淀凝结，定容过滤于三角瓶中 取定
硝酸银标准溶液25ml

容液50ml+硫酸铁指示剂2ml 硫氰酸铵溶液滴定 红棕色
m×20/1000×10/100
0.05845×（v1-FV2×100/50）

硝酸银标准溶液浓度=

式中：m——氯化钠质量g
v1——硝酸银标准溶液体积ml
v2——硫氰酸铵溶液体积ml
F ——硝酸银与硫氰酸铵溶液的体积比
0.05845——与1ml硝酸银标准溶液（1mol/l）相当的氯化钠质量
3.仪器准备
（1） 实验室用样品粉碎机
（2） 分样筛 孔径0.45m（40目）
（3） 分析天平
（4） 刻度移液管 10，2ml
（5） 滴定管 酸式，25ml
（6） 容量瓶 100，1000ml
（7） 烧杯 250ml
（8） 滤纸 快速，直径15cm；满速，直径12.5cm
搅拌，放置10min
干快速滤纸过滤
4.测定步骤
称取3g左右样品 + 硫酸铁溶液50ml + 氨水溶液100ml

搅拌，放置10min
干过滤入150ml锥形瓶中沉化
取50ml滤液
浓硝酸10ml 100ml容量瓶 取50ml澄
硝酸银标准溶液25ml
硫酸铁指示剂10ml
硫氰酸铵溶液滴定

清液 淡橘红色

5.数据处理
(V1-V2F×100/50)c×150×0.0355
m×50
（1）计算
氯元素百分含量= ×100

式中 m——样品质量
v1——硝酸银溶液体积ml
v2——滴定消耗的硫氰酸铵溶液体积
F——硝酸银与硫氰酸铵溶液体积比
C——硝酸银溶液的浓度
0.0355——与1ml硝酸银标准溶液1mol/l相当的氯元素质量g
（2）重复性
每个样品取2个平行样进行测定，以算术平均值为分析结果。
氯含量在3%以下，允许绝对差0.05，含量在3%以上，允许相对偏差3%
6.注意事项
（1）在标定硝酸银溶液时，或滴定试样滤液时，速度应快，且不要过分剧烈摇动，以防下述反应：AgCl+CNS- AgCNS+Cl- ，多消耗硫氰酸铵溶液，使结果偏底。
（2）本法测定中是根据氯离子来计算氯化钠含量的，但由于配合饲料或单一饲料（如鱼粉或合成赖氨酸等）中，都带入氯离子，所以此估测值仅做参考值。
实验五 饲料中粗灰分的测定
1. 原理：在600℃灼烧后所得残渣，用重量百分比表示
2. 测定
（1） 将干净的带盖坩埚放入茂福炉中在600℃下烧30min（坩埚盖半开），等炉温降至200℃，将坩埚移入干燥器中，冷却1h后称重，再将坩埚放入茂福炉中灼烧，恒重。
（2） 在坩埚中称取风干样2克。
（3） 将试样在电炉上炭化至无烟，再移入茂福炉中，在600℃下灼烧，坩埚盖半开，约烧4h，直至样本呈白色为止。
（4） 冷却完毕，待炉温降至200℃，移入干燥器内冷却1h，称重，再将坩埚放入茂福炉中烧15min，再冷却，恒重至相差0.0001克。
（坩埚重+灰分重）-坩埚重
样品重
3. 数据处理
粗灰分含量（%）= ×100

实验六 饲料中钙的测定
1. 原理：高温将试样中有机物破坏，使钙制备成溶液，用三乙醇铵，乙二胺，盐酸羟铵 和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用EDTA标准溶液络合滴定钙。
2. 试剂准备
（1） 盐酸羟铵
（2） 盐酸：1+1（v1+v2）
（3） 浓硝酸
（4） 高氯酸
（5） 氢氧化钾溶液：200g/l
（6） 三乙醇胺水溶液：1+1（v1+v2）
（7） 乙二胺水溶液：1+1（v1+v2）
（8） 淀粉溶液：10g/l，称取1g可溶性淀粉放入200ml烧杯中，加5ml水润湿，加95ml沸水搅拌，煮沸，冷却备用
（9） 孔雀石绿水溶液：1g/L
（10） 钙黄绿素-甲基百里香酚蓝指示剂：0.1g钙黄绿素与0.13g甲基百里香酚蓝，5g氯化钾研细，贮于磨口瓶中备用
（11） 钙标准溶液：0.0010g/ml
（12） 乙二胺四乙酸钠标准滴定溶液（EDTA），T=0.4mg/ml（滴定度），表示1ml标准溶液相当于0。4mg钙。
3. 测定
（1） 试样分解
干法：测定灰分后的试样+盐酸溶液10ml+浓硝酸数滴 ，小心煮沸，冷却，转入100ml容量瓶中，冷却，定容，摇匀。
湿法（无机物或液体饲料）：称取0.2g样品于凯氏烧瓶中，加入浓硝酸30ml，加热煮沸5min，取下冷却后加入高氯酸10ml，小心煮沸驱逐黄烟至白烟（严禁蒸干），冷却后加水20ml，煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶，定容，摇匀。
（2） 测定
淀粉溶液10ml
水50ml
乙二胺1ml
三乙醇胺2ml
1滴孔雀石绿

5-10ml试样分解液+ +氢氧化钾溶液 无色

5ml氢氧化钾溶液
0.1g盐酸羟胺
钙黄素少许

黑色背景下EDTA滴定 绿色荧光消失

4.数据处理
（1） 计算
EDTA标液对钙的滴定度×消耗EDTA体积
试样质量×移取分解液体积/分解液总体积

Ca% = ×100

（2） 重复性
做二个平行样，对钙量在5%以上，允许相对偏差在3%，钙量5-1%，允许相对偏差5%，钙量1%以下，允许相对偏差10%。
5.标准溶液的配置和标定
（1） 0010g/ml钙标准溶液的配置：准确称取2.497g于105-110℃干燥至恒重的基准碳酸钙，溶于40ml盐酸中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水转移至1000ml容量瓶中，稀释至刻度。
（2） T=0.0004g/mlEDTA标准滴定溶液的配置：称取3.8EDTA二钠放入200ml烧杯中加200ml水，加热溶解冷却后用水转移到1000ml容量瓶中，稀释至刻度。
（3） EDTA标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液10ml，同试样测定
进行滴定。 EDTA滴定溶液对钙的滴定度为
钙标准溶液的浓度× 钙标准溶液体积/EDTA标准溶液的用量
实验七 饲料中总磷量的测定
1.原理 游离磷 + 钒钼酸铵 酸性溶液中 磷钼黄（黄色），420nm波长下比色测定。
2.试剂
（1） 盐酸
（2） 硝酸
（3） 高氯酸
（4） 钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25g，加硝酸250ml，另称取钼酸铵25g，加水400ml加热溶解之后，在降温条件下将后者倒入前者，定容，避光保存。
（5） 磷标准溶液 ：将磷酸二氢钾在105℃干燥1h，在干燥器中冷却30min，称取0.2195g溶于水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，定容，即为50ug/ml的磷标准液。
3.测定
（1） 试样的分解：同测钙。
（2） 标准曲线的制作 准确移取0﹑1.0﹑2.0﹑5.0﹑10.0﹑15.0ml磷标准溶液于50ml的容量瓶中，各加钒钼酸铵10ml，定容，放10min，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，420nm波长下，测吸光度。以磷为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线或做出回归方程。
（3） 试样的测定 准确移取试样分解液ml于50ml容量瓶中，加钒钼酸铵10ml，定容，比色测定吸光度，用标准曲线查得试样分解液的含磷量。
4.结果计算 磷% = 标准曲线查得含磷量/试样质量×移取试样分解液体积×100
重复性：取至少二个平行样取平均值。含磷量小于0.5%，允许相对偏差小于10%，含磷量在0.5%之上，允许偏差不超过3%。
实验八 饲料中粗纤维的测定
1.原理 用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醚，乙醇除去醚容物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余为粗纤维。
2.试剂
（1） 硫酸：分析纯，0.255±0.005N（每100ml含硫酸1.25g，用氢氧化钾标准溶液标定。）
（2） 氢氧化钠：分析纯，0.313±0.005N（每100ml含氢氧化钠1.25g，用茎准邻苯二甲酸氢钾标定）
（3） 酸洗石棉：将中等长度洗涤石棉薄铺在蒸发皿中，放入600℃茂福炉中灼烧16h，用配置的1.25%硫酸浸没石棉，煮沸30min，过滤，用蒸馏水洗净酸，同样用1.25%氢氧化钠煮沸30min，过滤，用蒸馏水洗净。烘干。放入600℃茂福炉中灼烧16h，烧去有机物。
（4） 正辛醇
3.测定
（1） 取2g样品用乙醚提去脂肪后，全部移入500ml锥形瓶中。
（2） 在锥形瓶中加煮沸的0.255N 硫酸液200ml和1滴防泡沫剂。用蜡笔在液面处画一刻度线，在锥形瓶口加表玻璃盖或连接回流冷凝瓶。
（3） 将锥形瓶立即放在电热板上加热，使瓶内液体在2min内煮沸，继续煮沸30min，每隔5min摇动锥形瓶一次，以充分混合瓶内物质，避免样品贴杂液面以上的瓶壁上，在加热过程中溶液若有蒸发，应添加煮沸的蒸馏水至锥形瓶的200ml刻度处。
（4） 30min后立即移开锥形瓶，随后用铺有滤布的抽滤漏斗抽滤。调节漏斗抽气速度，使200ml滤液在10min内全部滤净，再以沸水洗涤锥形瓶与残渣，直至滤液用蓝色石蕊试纸检查呈中性反应为止。
（5） 用200ml煮沸的0.313N氢氧化钠溶液，将滤布上的残全部冲入原锥形瓶中，在锥形瓶中加表玻璃皿。
（6） 立即将锥形瓶放在电热板上，在1min内煮沸，重复（3）（4），在洗涤过程中可先用25ml煮沸的0.255N硫酸液，再用沸水洗涤，直至滤液用红色石蕊试纸检查诚中性反应为止。
（7） 在抽滤瓶上安装一个铺有石棉的致密薄层古氏坩埚。
（8） 将滤布上的饿残渣全部移入古氏坩埚，进行方法同（5），但是只用蒸馏水冲洗，用抽滤瓶抽去古氏坩埚中的水。再用25ml乙醇冲洗坩埚中的水。
（9） 将坩埚及内容物放入105℃烘箱中烘至恒重。
（10） 将坩埚及内容物先在电炉上炭化，然后移入600℃茂福炉中灼烧，至恒重（约30min）。
4.计算
粗纤维% = 坩埚及内容物烘干后的重量-灰化后坩埚及内容物重量/样本重 × 100