吩噻嗪类抗精神病药物的分析.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十一章,吩噻嗪类抗精神病药物的分析,The analysis of,Phenothiazine antipsychotics,药物分析学教研室,yanzhao,1,本 章 内 容,2,3,4,基本结构与性质,鉴 别,有关物质检查,含量测定,掌握：结构、性质和分析测定方法,熟悉：鉴别试验及有关物质检查的方法,了解：性状、临床特性及其体内药物分析,教学目的与要求,各种幻觉妄想为主的患者称为精神分裂症,I,型,情感淡漠、思维贫乏为主的患者称为精神分裂症,II,型,脑内多巴胺神经系统的功能亢进,吩噻嗪类药物,吩噻嗪类药物的作用机制,第一节 结构与性质,Structure and Property,吩噻嗪类药物为,苯并噻嗪,的衍生物，分子结构中均含有,硫氮杂蒽,母核。,R:-H,、,-Cl,、,-CF,3,、,-COCH,3,、,-SCH,2,CH,3,R:,具有,2,3,碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物,吩噻嗪类药物的基本结构,P292,典型药物分子结构,盐酸异丙嗪,Promethazine Hydrochloride,盐酸氯丙嗪,Chlorpromazine Hydrochloride,奋乃静,Perphenazine,盐酸氟奋乃静,Fluphenazine Hydrochloride,癸氟奋乃静,Fluphenazine Decanoate,盐酸三氟拉嗪,Trifluoperazine Hydrochloride,盐酸硫利达嗪,Thioridazine Hydrochloride,盐酸氯丙嗪,Chlorpromazine Hydrochloride,结构分析,1.,硫氮杂蒽母核,（,1,）含,S,、,N,的三环共轭的大,体系，,S,、,N,与苯环形成,p-,共轭,具有紫外吸收光谱特征,（,2,）硫氮杂蒽环上硫原子为,-2,价，具有还原性，易氧化呈色,（,3,）硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色,2.,取代基,R,：脂烃胺基、哌嗪基，具碱性,R,：卤素,1.,弱碱性,主要理化性质,碱性较强,弱碱性极弱,脂肪烃氨基、哌嗪及哌啶等衍生物所含氮原子碱性较强，可用于鉴别和含量测定。,2.,易氧化性,光照时易氧化变质，避光保存,易被,H,2,SO,4,、,HNO,3,、,H,2,O,2,、,FeCl,3,氧化,药物,硫酸,硝酸,过氧化氢,盐酸氯丙嗪,显红色，渐变为淡黄色,盐酸异丙嗪,显樱桃红色，放置后颜色渐变深,生成红色沉淀，加热即溶解，溶液由红色转变为橙黄色,奋乃静,显深红色，放置后红色渐褪去,盐酸氟奋乃静,显淡红色，温热后变成红褐色,盐酸三氟拉嗪,生成微带红色的白色沉淀；放置后，红色变深，加热后变黄色,盐酸硫利达嗪,显蓝色,3.,与金属离子配合呈色,可与钯离子配合生成有色化合物，可用于鉴别和含量测定。氧化产物亚砜和砜无此反应,机理,4.,紫外光吸收特性,硫氮杂蒽母核为,共轭体系,，紫外区三个吸收峰值，约,205nm,、,254nm,、,300nm,，,最强多在,254nm,附近,药物,溶剂,C(g/ml),max,(nm),A,百分吸收系数,盐酸氯丙嗪,盐酸,(91000),5,254,0.46,915,306,盐酸异丙嗪,盐酸,(0.1mol/L),6,249,883937,奋乃静,无水乙醇,7,258,0.65,盐酸氟奋乃静,盐酸,(91000),10,255,553593,盐酸三氟拉嗪,盐酸,(120),10,256,630,盐酸硫利达嗪,乙醇,8,264,与,315,2,位上的取代基,(R),不同，会引起吸收峰发生位移,其结构中,-2,价的硫，易氧化，氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰,5.,红外吸收特性,D,A,B,C,第二节 鉴别试验,Test of Identification,化学鉴别法,光谱法,色谱法,其他方法,第二节 鉴别试验,一般选用,24,种不同原理的分析方法组成一组鉴别试验,盐酸异丙嗪片（,ChP2015,）,氧化显色反应,氯化物的鉴别反应,薄层色谱法,(TLC),或高效液相色谱法,(HPLC),提取后红外分光光度法,(IR),盐酸氯丙嗪,（,USP32-NF27,）,红外分光光度法,(IR),薄层色谱法,(TLC),氯化物的鉴别反应,奋乃静,（,EP7,）,熔点测定,红外分光光度法,(IR),盐酸硫利达嗪,（,JP15,）,氧化显色反应,红外分光光度法,(IR),氯化物的鉴别反应,一、化学鉴别法,弱碱性,易氧化性,与金属离子配合呈色,生物碱沉淀剂反应,氧化显色,反应,与钯离子配合呈色反应,卤素取代基,吩噻嗪类药物的盐酸盐,含卤素取代基的反应,氯化物的鉴别反应,【,示例,11-1】,盐酸氯丙嗪鉴别（,JP15,）,化学鉴别法,1.,与生物碱沉淀剂反应,0.1g/20ml,稀盐酸,3,滴,三硝基苯酚,10ml,静置,5,小时,生成沉淀,测定熔点,175179,滤过,洗涤,丙酮重结晶,105,干燥,1,小时,盐酸氯丙嗪,片,鉴别？,三硝基苯酚沉淀,再用丙酮重结晶,测定熔点,2.,氧化显色反应,HNO,3,FeCl,3,H,2,SO,4,H,2,O,2,常用氧化剂,化学鉴别法,常见显色,药物,硫酸,硝酸,过氧化氢,盐酸氯丙嗪,显红色，渐变为淡黄色,盐酸异丙嗪,显樱桃红色，放置后颜色渐变深,生成红色沉淀，加热即溶解，溶液由红色转变为橙黄色,奋乃静,显深红色，放置后红色渐褪去,盐酸氟奋乃静,显淡红色，温热后变成红褐色,盐酸三氟拉嗪,生成微带红色的白色沉淀；放置后，红色变深，加热后变黄色,盐酸硫利达嗪,显蓝色,化学鉴别法,盐酸异丙嗪,（,2,）取本品约,0.1g,，加水,3ml,溶解后，加硝酸,1ml,，即生成,红色沉淀,；加热，沉淀即溶解，溶液由,红色,转变为,橙黄色,。,（,1,）取本品约,5mg,，加硫酸,5ml,溶解后，溶液显,樱桃红色,；放置后，,色渐变深。,化学鉴别法,盐酸氯丙嗪,示例,11-3,取本品约,10mg,，加水,1ml,溶解后，加硝酸,5,滴即,显红色,，渐变为,淡黄色,。,化学鉴别法,盐酸氯丙嗪,片,鉴别？,示例,11-4,示例,11-5 11-6 JP15,三氯化铁 红色,3.,与钯离子配合显色,【,示例,11-7】,癸氟奋乃静的鉴别,ChP,（,2015,）,取本品约,50mg,，加甲醇,2ml,溶解后，加,0.1%,氯化钯溶液,3ml,，即有沉淀生成，并,显红色,，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。,化学鉴别法,4.,含卤素取代基的反应,奋乃静,绿色,焰色反应,化学鉴别法,铜网,P297,(,红色,),(,无色,),显色反应,（如氟奋乃静等含氟有机药物）,4.,含卤素取代基的反应,盐酸癸氟奋乃静注射液（,ChP2015,）,加茜素锆,碳酸钠及碳酸钾各约,100mg,600,灰化,20mg,加盐酸酸化、过滤,加热、蒸干,化学鉴别法,氟化物,酸性茜素锆试液,ZrF,6,2-,(,黄色,),茜素磺酸钠,5.,氯化物的鉴别反应,鉴别反应,与,AgNO,3,的沉淀反应,与,MnO,2,等氧化剂的氧化还原反应,化学鉴别法,AgNO,3,沉淀反应鉴别：由于硫氮杂蒽母核具有还原性，稀,HNO,3,的加入使该类药物发生氧化显色反应。,可在供试品溶液中,加氨试液使成碱性，吩噻嗪类药物析出，,滤除沉淀，,取滤液进行试验。,注意,MnO,2,等氧化剂的氧化还原反应进行鉴别：,注意：,硫氮杂蒽母核和氯离子均被氧化,鉴别方法：,具有挥发性的氧化产物氯气使 用水湿润的,碘化钾淀粉试纸显蓝色,鉴别反应,与,AgNO,3,的沉淀反应,与,MnO,2,等氧化剂的氧化还原反应,化学鉴别法,5.,氯化物的鉴别反应,化学法小结,（一）,与生物碱沉淀剂反应,:,与生物碱沉淀剂形成衍生物，测定熔点,（二）,氧化显色反应,：,S,原子为,-2,价，具有还原性,（三）,与钯离子配合呈色,：,Pd,2+,与,S,配合,（四）,含卤素取代基的反应,:,焰色反应；显色反应,（五）,氯化物的鉴别反应,：,AgNO,3,沉淀反应；,MnO,2,氧化还原反应,1.,紫外分光光度法,母核在,205 nm,、,254 nm,和,300 nm,三个波长处附近有最大吸收，,最强峰多在,250,265nm,2,位上的取代基,(R),不同，会引起吸收峰发生位移,其结构中,-2,价的硫，易氧化，氧化产物砜及亚砜产生四个吸收峰,二、光谱法,ChP2010,收载的吩噻嗪类原料药均采用红外分光光度法,(IR),鉴别，制剂提取后,IR,鉴别。,光谱法,2.,红外分光光度法,盐酸氯丙嗪,盐酸异丙嗪,光谱法,三、色谱法,主要用于吩噻嗪类药物及其制剂的鉴别,方法：,对照品法,要求供试品溶液所显主斑点的,颜色,和,位置,与对照品溶液的主斑点相同。,TLC,法,主要用于吩噻嗪类药物及其制剂的鉴别,HPLC,法,方法：对照品法,要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的,t,R,与对照品峰的,t,R,一致。,吩噻嗪类药物还可以通过熔点测定进行鉴别,【,示例,11-22】,EP7,奋乃静鉴别法：照毛细管法测定，,本品的熔点为,96100,。,四、其他方法,D,A,B,C,第三节 有关物质检查,Test of related substances,Is it pure?,有哪些有关物质？,合,成,路,线,残留的中间产物,有哪些有关物质？,贮藏过程中产生的有关物质,有哪些有关物质？,有关物质,:,一、,残留的中间产物,二、贮藏过程中产生的有关物质,如何检查这些有关物质？,测定方法,样品液,10.1%-1.0%,溶液,样品液,20.01%-0.1%,溶液,有关物质检查,高低浓度对照法,薄层色谱（,TLC,）,高效液相色谱（,HPLC,）,（一）,TLC,薄层色谱很直观，,定性定量用途宽。,定性根据比移值，,半定量法靠斑点。,样,1,样,2,TLC,判断,:,控制杂质斑点个数，,控制杂质种类,样,1,杂质斑点强度不得,超过样,2,主斑点,10l,硅胶,G,板,【,示例,11-25】,：盐酸氯丙嗪的有关物质检查,供试液：,对照液：,TLC,试验：,5mg/ml,25g/ml,展开后晾干,空气中干 燥,20min,紫外灯下检视,判定杂,质斑点,USP32-NF27,检查法,特点：,（,1,）简便易行，不需特殊的仪器；,（,2,）只能控制单个杂质的限量。,（二）,HPLC,法,1.,峰面积归一化法,2.,不加校正因子的主成分自身对照法,3.,加校正因子的主成分自身对照法（有对照品）,4.,内标法加校正因子测定杂质的含量,(,有对照品,),5.,外标法,(,有对照品,),（二）,HPLC,法,（高低浓度对比法）,供试品,对照液,判定方法：,规定杂质峰数目,规定杂质峰面积,特点：,（,1,）需特殊仪器；,（,2,）可以控制杂质总量。,Waters,液相色谱仪,2690,岛津液相色谱仪,LC-10A,【,示例,11-23】,盐酸氯丙嗪的有关物质检查,供试液：,0.4mg/mL,对照液：,0.002mg/mL,ChP2015,检查法,杂质限量,?,【,示例,11-23】,盐酸氯丙嗪的有关物质检查,单个不大于，总和不超过,2,倍,ChP2015,检查法,D,A,B,C,第四节 含量测定,CONTENT ASSAY,吩噻嗪类药物,含量测定,？,酸碱滴定,A,分光光度法,B,HPLC,C,HPLC-MS,D,一、酸碱滴定法,1.,非水溶液滴定法,进行非水酸碱滴定的原因：,许多弱酸、弱碱不能直接在水溶液中滴定,(CK HBr H,2,SO,4,HCl HNO,3,冰醋酸是强酸的区分溶剂。强酸在冰醋酸中的总强度的顺序为：,?,HBr HCl HNO,3,HClO,4,H,2,SO,4,酸性溶剂是弱碱的均化性溶剂，是强酸的区分性溶剂,碱性溶剂是弱酸的均化性溶剂，是强碱的区分性溶剂,+,HClO,4,滴定,空白试验校正,终点指示,10ml30ml,8,pK,b,10,冰醋酸作溶剂,10,pK,b,12,冰醋酸,+,醋酐,pK,b,12,醋酐,弱碱的滴定,有机碱及其盐类供试品,冰醋酸,结果,电位指示终点法,HAc,体积随温度变化较大，且还具有挥发性，测定样品与标定标准溶液时温度不同，应对浓度进行校正,。,如果：,t,1,-t,0,10,C,或贮存时间超过30天,则在临用前必须重新标定标准溶液的浓度。,标准溶液的稳定性,等当点,H,+,+Cl,-,+NaOH NaCl+H,2,O,BH,+,+Cl,-,+NaOH B+H,2,O+NaCl,突跃体积,V,1,V,2,滴定体积,V,V,2,V,1,乙醇,-,水溶液中，采用,NaOH,滴定；在反应体系加入适量盐酸，采用电位滴定法指示终点,一、酸碱滴定法,2.乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法,1.,直接分光光度法,(,原料药,),2.,提取后分光光度法,(,制剂,),3.,提取后双波长分光光度法,(,去除氧化物干扰,),4.,二阶导数分光光度法,(,自学,),5.,钯离子比色法,二、分光光度法,3.,提取后双波长分光光度法,提取后分光光度法能够除去一些干扰物质，但却,不能,除去吩噻嗪类药物的,氧化物,。提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定时，因结构相近，,氧化物,在吩噻嗪类药物的,测定波长处产生吸收,，干扰测定。,即，,吸收度差值（,A,）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。,定量依据：样品在二波长下吸收度差值,（,A,）,【,示例,11-37】,盐酸氯丙嗪注射液的含量测定（,USP32-NF27,）,式中：,C,(mg/ml),为对照品溶液的浓度；,V,(ml),为所取供试品的体积；,括号内的公式分别为供试品溶液,(U),和对照品溶液,(S),在下标所示波长处的吸光度差。,测定波长,：,254nm,（最大吸收波长）,277nm,（等吸收波长）,空白对照液,：,0.1mol/L,盐酸溶液,计算公式,：,吩噻嗪类药物在,pH 20.1,的缓冲溶液中，与钯离子,(Pd,2+,),形成红色配合物，在,500nm,波长附近具有最大吸收,由于,钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色,，,消除了,药物中,氧化物,对测定的,干扰,。,比色液的浓度：,50 250,g/mL,显色稳定性：,10,分钟后可稳定约,2,小时,5.,钯离子比色法,【,示例,11-38】,盐酸异丙嗪注射液,USP32-NF27,6.25mg,加,饱和,氯化钾溶液,氢氧化钠溶液,碱化,甲醇,正庚烷提取,3,次,470nm,处测定,吸收度,合并提取液,盐酸酸化提取,3,次,合并提取液,并定容至,50ml,标准品和对照品溶液各,2ml+PdCl,2,显色,Stationary phase,ODS,三、高效液相色谱法,1.,反相高效液相色谱法,方法特点：,ODS,内标法,+,校正因子,甲醇,-,水；乙腈,-,水,紫外,三乙胺溶液,-,甲醇,-,乙腈,色谱柱：,流动相：,检测器：,定量法：,2.,离子对高效液相色谱法,极性强,反相,ODS,柱保留弱,影响离子对形成的条件,反离子的性质与浓度,流动相的组成,流动相,pH,离子强度,常用的离子对试剂：,烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。,影响条件：,流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解,离子对试剂的,非极性部分越大,，形成的离子对分配系数越大，保留时间越长（十二烷基磺酸钠庚烷磺酸钠戊烷磺酸钠）,四、液相色谱,-,质谱联用技术,液相色谱,-,质谱联用技术集,HPLC,的高分离效能和,MS,的高专属性及高灵敏度于一体，已经成为目前测定复杂生物样本中微量药物的首选方法，同时也是进行药物及有关物质定性分析的常用方法。,基,本,要,求,应用,：本类药物的鉴别试验,酸碱滴定法含量测定,离子对高效液相色谱法,描述,：本类药物的结构与性质,本章小结,1.,有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的鉴别方法为,A.,非水溶液滴定法,B.,紫外分光光度法,C.,荧光分光光度法,D.,钯离子比色法,E.pH,指示剂吸收度比值法,B,D,课堂练习,2.,有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的含量测定方法为,A.,非水溶液滴定法,B.,紫外分光光度法,C.,荧光分光光度法,D.,钯离子比色法,E.pH,指示剂吸收度比值法,D,3.,检查盐酸异丙嗪中“有关物质”时，采用的对照溶液为,A.,杂质的标准溶液,B.,标准“有关物质”溶液,C.,供试品溶液,D.,供试液的稀释溶液,E.,对照溶液,D,4.,吩噻嗪类药物的鉴别试验为,A,紫外分光光度法,(,规定吸收波长与相应吸收度法,),B,与钯离子,(Pd,2+,),生成橙红色不溶性配位化合物,.,C,硝酸氧化呈色反应,D,硫酸氧化呈色反应,E,与铜离子,(Cu,2+,),生成橙红色不溶性配位化合物,.,5.,生物碱类药物的一般鉴别试验包括,(),A,熔点测定,B,呈色反应,C,沉淀反应,D,紫外光谱,E,红外光谱,6.,冰醋酸是各种无机强酸的区分溶剂，各种无机酸在其中的酸性强弱顺序为,A HCl0,4,HBrH,2,S0,4,HClHN0,3,B HBrHClHN0,3,HCl0,4,H,2,S0,4,C H,2,S0,4,HClHN0,3,HBrHCl0,4,D HCl0,4,H,2,S0,4,HClHBrHN0,3,E HCl0,4,HClH,2,S0,4,HBrHN0,3,7.,吩噻嗪类药物的含量测定中，与钯离子反应的比色法需在以下哪种酸性条件下进行,A.pH4,B.pH3,3.5,C.pH20.1,D.pH1,E.pH5,8,盐酸氯丙嗪的含量测定方法有,A.,氧化还原法,B.,非水滴定法,C.,紫外法,D.,旋光法,E.HPLC,法,9,吩噻嗪类药物的母核,(),。,A,含有,1,个氮原子、,1,个氧原子，氮原子上一般含,有取代基,B,仅含有,1,个氮原子，氮原子上无取代基，而母环,上有取代基,C,仅含有,1,个氮原子，母环上无取代基，而氮原子,上有取代基,D,含有,1,个氮原子和,1,个硫原子，氮原子上有取代,基,E,含有,1,个氮原子和,1,个硫原子，氮原子上,无取代基,D,吩噻嗪类药物具有怎样的结构特征？,吩噻嗪类药物为苯并噻嗪的衍生物，其分子结构中均含有硫氮杂蒽母核。,预习 第十二章 与 第十三章,