外周血干细胞骨髓腔内输注对移植物抗宿主病的影响.doc

外周血干细胞骨髓腔内输注对移植物抗宿主
病的影响

作者：毕延智,曾冬香,盛桂凤,张琰,陈宝安

【摘要】 本研究建立髓腔内外周造血干细胞输注(IBM PBSCT)

动物移植模型并观察该方法对移植物抗宿主病(GVHD)的影响。选取雌

性 C57BL/6 小鼠为移植受鼠，于第 0 天接受全身照射(TBI) 4Gy 后，

输注经 rhG CSF 动员的雄性 BABL/c 小鼠外周血造血干细胞(1×

107)，2 天后腹腔注射环磷酰胺(CTX)，观察各组小鼠 GVHD 发生情况。

结果显示： 髓腔内 PBSCT 组的受鼠 GVHD 发生率较尾静脉输注组明显减

低(p<0.05)，移植后在受鼠体内观察到供鼠来源的 Y 染色体存在。

结论：与尾静脉输注比较，髓腔内输注外周血造血干细胞不仅能减少

GVHD 的发生，而且更有利于干细胞植入。

【关键词】 移植物抗宿主病

Influence of Intra bone Marrow Infusion of Peripheral

Hematopoietic Stem Cells on Graft Versus Host Disease

Abstract This study was aimed to explore whether the graft

versus host disease (GVHD) could be alleviated by intra

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bone marrow (IBM) infusion of allogeneic hematopoietic stem

cells. Female C57BL/6 mice as recipients received total body

irradiation (TBI) 4 Gy on day 0, followed by injection of

peripheral hematopoietic stem cells (1×107) from mobilized

male BALB/c with granulocyte colony stimulating factor (rhG

CSF), and cyclophosphamide (200 mg/kg) was injected

intraperitoneally two days later. The results showed that the

incidence and severity of GVHD were more low and alleviative in

group IBM PBSCT than that in group TV PBSCT (p<0.05). Y

chromosome of doenor mice could be detected in the bone marrow

of recipient mice. It is concluded that the method of intra

bone marrow infusion is superior to injection via the tail

vein in the engraftment of hematopoietic stem cells in terms of

stem cell homing while the frequency and severity of GVHD in

allogeneic mice decrease.

Key words hematopoietic stem cell transplantation; intra

bone marrow infusion; graft versus host disease

外周血来源的造血干细胞移植因其干细胞采集方便、供者痛苦

少、移植后造血和免疫功能重建快等优势已成为目前治疗某些恶性血

液病和自身免疫性疾病的重要方法，但移植后严重的移植物抗宿主病

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(GVHD)的发生在一定程度上限制了其应用。有证据表明，大量造血干

细胞移植可以克服主要组织相容性复合物(MHC)屏障， 促进造血干细胞

的植入(大剂量效应)［1］ 。我们将供者骨髓细胞直接注入到受者骨髓

腔内(IBM BMT)， 成功建立了稳定的免疫耐受模型， 且未观察到 GVHD

的发生［2］
。在此基础上，我们进一步实验证实了重组人粒细胞集落

刺激因子(rhG CSF)动员的外周血干细胞髓腔内输注较尾静脉输注

更有利于促进嵌合体形成，减少 GVHD 发生，现报道如下。

材料和方法

实验动物

供鼠为雄性 BALB/c 小鼠(H 2d)，8-10 周龄，体重 18-20 g；

受鼠为雌性 C57BL/6 小鼠(H 2b,B6)，8-10 周龄，体重 18-20 g，均

为清洁级，购自上海 SLAC 实验动物有限责任公司。

主要试剂

环磷酰胺（CTX）购于江苏恒瑞医药股份有限公司，重组人粒细

胞集落刺激因子 (rhG CSF)： 75 微克/支，购于上海三维生物技术

有限公司。

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